બેઝિક મોલેક્યુલર બાયોલોજીના શબ્દોની સમજૂતી
1. cDNA અને cccDNA: cDNA એ ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ DNA છે જે mRNA માંથી રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેઝ દ્વારા સંશ્લેષણ કરવામાં આવે છે;cccDNA એ રંગસૂત્રથી મુક્ત પ્લાઝમિડ ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ બંધ ગોળાકાર DNA છે.
2. સ્ટાન્ડર્ડ ફોલ્ડિંગ યુનિટ: પ્રોટીન સેકન્ડરી સ્ટ્રક્ચર યુનિટ α-હેલિક્સ અને β-શીટ વિવિધ કનેક્ટિંગ પોલિપેપ્ટાઈડ્સ દ્વારા ખાસ ભૌમિતિક ગોઠવણી સાથે માળખાકીય બ્લોક્સ બનાવી શકે છે.આ પ્રકારના નિર્ધારિત ફોલ્ડિંગને સામાન્ય રીતે સુપર સેકન્ડરી સ્ટ્રક્ચર કહેવામાં આવે છે.લગભગ તમામ તૃતીય રચનાઓ આ ફોલ્ડિંગ પ્રકારો દ્વારા વર્ણવી શકાય છે, અને તેમના સંયુક્ત પ્રકારો દ્વારા પણ, તેથી તેમને પ્રમાણભૂત ફોલ્ડિંગ એકમો પણ કહેવામાં આવે છે.
3. CAP: ચક્રીય એડેનોસિન મોનોફોસ્ફેટ (cAMP) રીસેપ્ટર પ્રોટીન CRP (cAMP રીસેપ્ટર પ્રોટીન), સીએએમપી અને સીઆરપીના સંયોજન પછી રચાયેલ સંકુલને સક્રિય પ્રોટીન સીએપી (સીએએમપી સક્રિય પ્રોટીન) કહેવામાં આવે છે.
4. પેલિન્ડ્રોમિક સિક્વન્સ: ડીએનએ ફ્રેગમેન્ટના સેગમેન્ટનો વિપરીત પૂરક ક્રમ, ઘણીવાર પ્રતિબંધ એન્ઝાઇમ સાઇટ.
5. માઈકઆરએનએ: પૂરક દખલકારી આરએનએ અથવા એન્ટિસેન્સ આરએનએ, જે mRNA ક્રમના પૂરક છે અને mRNA ના અનુવાદને અટકાવી શકે છે.
6. રિબોઝાઇમ: ઉત્પ્રેરક પ્રવૃત્તિ સાથેનું આરએનએ, જે આરએનએની વિભાજન પ્રક્રિયામાં ઓટોકેટાલિટીક ભૂમિકા ભજવે છે.
7. મોટિફ: પ્રોટીન પરમાણુઓની અવકાશી રચનામાં સમાન ત્રિ-પરિમાણીય આકાર અને ટોપોલોજી ધરાવતા કેટલાક સ્થાનિક પ્રદેશો છે.
8. સિગ્નલ પેપ્ટાઈડ: પ્રોટીન સંશ્લેષણ દરમિયાન એન-ટર્મિનસ પર 15-36 એમિનો એસિડ અવશેષો સાથેનું પેપ્ટાઈડ, જે પ્રોટીનના ટ્રાન્સમેમ્બ્રેનને માર્ગદર્શન આપે છે.
9. એટેન્યુએટર: ઑપરેટર પ્રદેશ અને સ્ટ્રક્ચરલ જનીન વચ્ચેનો ન્યુક્લિયોટાઇડ ક્રમ જે ટ્રાન્સક્રિપ્શનને સમાપ્ત કરે છે.
10. મેજિક સ્પોટ: જ્યારે બેક્ટેરિયા વધે છે અને એમિનો એસિડની સંપૂર્ણ અભાવનો સામનો કરે છે, ત્યારે બેક્ટેરિયા તમામ જનીનોની અભિવ્યક્તિને રોકવા માટે કટોકટીની પ્રતિક્રિયા પેદા કરશે.સિગ્નલો કે જે આ કટોકટી પ્રતિભાવ પેદા કરે છે તે છે ગુઆનોસિન ટેટ્રાફોસ્ફેટ (ppGpp) અને guanosine pentaphosphate (pppGpp).PpGpp અને pppGpp ની ભૂમિકા માત્ર એક અથવા થોડા ઓપરોન નથી, પરંતુ તેમાંથી મોટી સંખ્યામાં અસર કરે છે, તેથી તેમને સુપર-રેગ્યુલેટર અથવા મેજિક સ્પોટ્સ કહેવામાં આવે છે.
11. અપસ્ટ્રીમ પ્રમોટર એલિમેન્ટ: DNA ક્રમનો સંદર્ભ આપે છે જે પ્રમોટરની પ્રવૃત્તિમાં નિયમનકારી ભૂમિકા ભજવે છે, જેમ કે -10 પ્રદેશમાં TATA, -35 પ્રદેશમાં TGACA, વધારનારા અને એટેન્યુએટર્સ.
12. ડીએનએ પ્રોબ: જાણીતા ક્રમ સાથે ડીએનએનું લેબલ થયેલ સેગમેન્ટ, જેનો ઉપયોગ અજાણ્યા ક્રમ અને સ્ક્રીન લક્ષ્ય જનીનોને શોધવા માટે વ્યાપકપણે થાય છે.
13. SD ક્રમ: તે રાઈબોઝોમ અને mRNA નો બંધનકર્તા ક્રમ છે, જે અનુવાદને નિયંત્રિત કરે છે.
14. મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી: એક એન્ટિબોડી જે માત્ર એક એન્ટિજેનિક નિર્ણાયક સામે કાર્ય કરે છે.
15. કોસ્મિડ: તે કૃત્રિમ રીતે બાંધવામાં આવેલ એક્ઝોજેનસ ડીએનએ વેક્ટર છે જે ફેજના બંને છેડે COS પ્રદેશોને જાળવી રાખે છે અને પ્લાઝમિડ સાથે જોડાયેલ છે.
16. વાદળી-સફેદ સ્પોટ સ્ક્રીનીંગ: LacZ જનીન (એન્કોડિંગ β-galactosidase), એન્ઝાઇમ ક્રોમોજેનિક સબસ્ટ્રેટ X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) ને વિઘટિત કરીને વાદળી પેદા કરી શકે છે, આમ તાણ વાદળી બને છે.જ્યારે એક્સોજેનસ ડીએનએ દાખલ કરવામાં આવે છે, ત્યારે LacZ જનીન વ્યક્ત કરી શકાતું નથી, અને તાણ સફેદ હોય છે, જેથી પુનઃસંયોજક બેક્ટેરિયાને તપાસી શકાય.આને વાદળી-સફેદ સ્ક્રીનીંગ કહેવામાં આવે છે.
17. સીઆઈએસ-અભિનય તત્વ: ડીએનએમાં પાયાનો ચોક્કસ ક્રમ જે જનીન અભિવ્યક્તિને નિયંત્રિત કરે છે.
18. ક્લેનોઉ એન્ઝાઇમ: ડીએનએ પોલિમરેઝ I નો મોટો ટુકડો, સિવાય કે 5' 3' એક્સોનોક્લીઝ પ્રવૃત્તિ DNA પોલિમરેઝ I હોલોએનઝાઇમમાંથી દૂર કરવામાં આવે છે
19. એન્કર કરેલ PCR: એક છેડે જાણીતા ક્રમ સાથે રસના DNA ને વિસ્તૃત કરવા માટે વપરાય છે.અજ્ઞાત ક્રમના એક છેડે પોલી-ડીજી પૂંછડી ઉમેરવામાં આવી હતી, અને પછી પોલી-ડીસી અને જાણીતી ક્રમનો પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન માટે પ્રાઈમર તરીકે ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો.
20. ફ્યુઝન પ્રોટીન: યુકેરીયોટિક પ્રોટીનનું જનીન એક્ઝોજેનસ જનીન સાથે જોડાયેલું છે, અને મૂળ જનીન પ્રોટીન અને એક્સોજેનસ પ્રોટીનના અનુવાદથી બનેલું પ્રોટીન એક જ સમયે વ્યક્ત થાય છે.
અન્ય મોલેક્યુલર બાયોલોજીના શબ્દો
1. ડીએનએનો ભૌતિક નકશો એ ક્રમ છે જેમાં ડીએનએ પરમાણુના (પ્રતિબંધ એન્ડોન્યુક્લીઝ-ડાઇજેસ્ટેડ) ટુકડાઓ ગોઠવાય છે.
2. RNase ના ક્લીવેજને બે પ્રકારમાં વિભાજિત કરવામાં આવે છે (ઓટોકેટાલિસિસ) અને (હેટરોકેટાલિસિસ).
3. પ્રોકેરીયોટ્સમાં ત્રણ દીક્ષા પરિબળો છે (IF-1), (IF-2) અને (IF-3).
4. ટ્રાન્સમેમ્બ્રેન પ્રોટીનને માર્ગદર્શન (સિગ્નલ પેપ્ટાઈડ્સ)ની જરૂર હોય છે, અને પ્રોટીન ચેપરોન્સની ભૂમિકા છે (પેપ્ટાઈડ સાંકળને પ્રોટીનના મૂળ સ્વરૂપમાં ફોલ્ડ કરવામાં મદદ કરે છે).
5. પ્રમોટર્સમાં તત્વોને સામાન્ય રીતે બે પ્રકારમાં વિભાજિત કરી શકાય છે: (મુખ્ય પ્રમોટર તત્વો) અને (અપસ્ટ્રીમ પ્રમોટર તત્વો).
6. મોલેક્યુલર બાયોલોજીની સંશોધન સામગ્રીમાં મુખ્યત્વે ત્રણ ભાગોનો સમાવેશ થાય છે: (સ્ટ્રક્ચરલ મોલેક્યુલર બાયોલોજી), (જીન એક્સપ્રેશન એન્ડ રેગ્યુલેશન), અને (ડીએનએ રિકોમ્બિનેશન ટેકનોલોજી).
7. ડીએનએ એ આનુવંશિક સામગ્રી છે તે દર્શાવતા બે મુખ્ય પ્રયોગો છે (ઉંદરનો ન્યુમોકોકસ ચેપ) અને (એસ્ચેરીચીયા કોલીનો T2 ફેજ ચેપ).સંભવિત).
8. hnRNA અને mRNA વચ્ચે બે મુખ્ય તફાવતો છે: (hnRNA ને mRNA માં રૂપાંતરિત કરવાની પ્રક્રિયામાં વિભાજિત કરવામાં આવે છે), (mRNA ના 5' છેડાને m7pGppp કેપ સાથે ઉમેરવામાં આવે છે, અને mRNA એસિડ (પોલીએ) પૂંછડીના 3' છેડે વધારાનું પોલિએડેનિલેશન છે).
9. પ્રોટીનના મલ્ટિ-સબ્યુનિટ સ્વરૂપના ફાયદાઓ છે (ડીએનએ ઉપયોગ માટે સબ્યુનિટ એક આર્થિક પદ્ધતિ છે), (પ્રોટીન પ્રવૃત્તિ પર પ્રોટીન સંશ્લેષણમાં રેન્ડમ ભૂલોની અસરને ઘટાડી શકે છે), (પ્રવૃત્તિ ખૂબ જ અસરકારક રીતે અને ઝડપથી ખોલવામાં અને બંધ થઈ શકે છે).
10. પ્રોટીન ફોલ્ડિંગ મિકેનિઝમ ફર્સ્ટ ન્યુક્લિએશન થિયરીની મુખ્ય સામગ્રીમાં (ન્યુક્લિએશન), (માળખાકીય સંવર્ધન), (અંતિમ પુન: ગોઠવણી) નો સમાવેશ થાય છે.
11. ગેલેક્ટોઝ બેક્ટેરિયા પર બેવડી અસર ધરાવે છે;એક તરફ (તે સેલ વૃદ્ધિ માટે કાર્બન સ્ત્રોત તરીકે ઉપયોગ કરી શકાય છે);બીજી બાજુ (તે કોષની દિવાલનો પણ એક ઘટક છે).તેથી, પૃષ્ઠભૂમિ સ્તરે કાયમી સંશ્લેષણ માટે સીએએમપી-સીઆરપી-સ્વતંત્ર પ્રમોટર S2 જરૂરી છે;તે જ સમયે, ઉચ્ચ-સ્તરના સંશ્લેષણને નિયંત્રિત કરવા માટે સીએએમપી-સીઆરપી-આશ્રિત પ્રમોટર S1 ની જરૂર છે.ટ્રાન્સક્રિપ્શન ( S2 ) થી G સાથે અને ( S1 ) થી G વગર શરૂ થાય છે.
12. રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએ ટેક્નોલોજીને (જીન ક્લોનિંગ) અથવા (મોલેક્યુલર ક્લોનિંગ) તરીકે પણ ઓળખવામાં આવે છે.અંતિમ ધ્યેય છે (એક જીવમાં રહેલા આનુવંશિક માહિતી ડીએનએને બીજા સજીવમાં સ્થાનાંતરિત કરવા).લાક્ષણિક ડીએનએ પુનઃસંયોજન પ્રયોગમાં સામાન્ય રીતે નીચેના પગલાંઓનો સમાવેશ થાય છે: (1) દાતા સજીવના લક્ષ્ય જનીન (અથવા એક્ઝોજેનસ જનીન) ને બહાર કાઢો અને નવા પુનઃસંયોજક ડીએનએ પરમાણુ બનાવવા માટે તેને અન્ય ડીએનએ પરમાણુ (ક્લોનિંગ વેક્ટર) સાથે એન્ઝાઈમેટિક રીતે જોડો.② રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએ પરમાણુ પ્રાપ્તકર્તા કોષમાં સ્થાનાંતરિત થાય છે અને પ્રાપ્તકર્તા કોષમાં નકલ કરવામાં આવે છે.આ પ્રક્રિયાને રૂપાંતર કહેવામાં આવે છે.③ સ્ક્રિન કરો અને તે પ્રાપ્તકર્તા કોષોને ઓળખો કે જેણે રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએને શોષી લીધું છે.④ વિદેશી સહાય જનીન વ્યક્ત થયેલ છે કે કેમ તે શોધવા માટે પુનઃસંયોજક ડીએનએ ધરાવતા કોષોને મોટી માત્રામાં ઉછેર કરો.
13. બે પ્રકારના પ્લાઝમિડ પ્રતિકૃતિ છે: જેઓ યજમાન કોષ પ્રોટીન સંશ્લેષણ દ્વારા સખત રીતે નિયંત્રિત થાય છે તેને (ચુસ્ત પ્લાઝમિડ્સ) કહેવામાં આવે છે, અને જે યજમાન કોષ પ્રોટીન સંશ્લેષણ દ્વારા સખત રીતે નિયંત્રિત નથી તેને (રિલેક્સ્ડ પ્લાઝમિડ્સ) કહેવામાં આવે છે.
14. પીસીઆર પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીમાં નીચેની શરતો હોવી જોઈએ: a.ડીએનએ પ્રાઇમર્સ (લગભગ 20 પાયા) અલગ કરવાના લક્ષ્ય જનીનની બે સેરના દરેક છેડે પૂરક ક્રમ સાથે.bથર્મલ સ્થિરતા સાથે ઉત્સેચકો જેમ કે: TagDNA પોલિમરેઝ.c, dNTPd, ટેમ્પલેટ તરીકે રસનો DNA ક્રમ
15. પીસીઆરની મૂળભૂત પ્રતિક્રિયા પ્રક્રિયામાં ત્રણ તબક્કાઓનો સમાવેશ થાય છે: (ડિનેચ્યુરેશન), (એનિલિંગ), અને (એક્સ્ટેંશન).
16. ટ્રાન્સજેનિક પ્રાણીઓની મૂળભૂત પ્રક્રિયામાં સામાન્ય રીતે સમાવેશ થાય છે: ①ફળદ્રુપ ઇંડા અથવા ગર્ભ સ્ટેમ સેલના ન્યુક્લિયસમાં ક્લોન કરેલા વિદેશી જનીનનો પરિચય;②માદા ગર્ભાશયમાં ઇનોક્યુલેટેડ ફળદ્રુપ ઇંડા અથવા ગર્ભ સ્ટેમ સેલનું ટ્રાન્સપ્લાન્ટેશન;③સંપૂર્ણ ગર્ભ વિકાસ અને વૃદ્ધિ વિદેશી જનીનો સાથેના સંતાનો માટે;④ આ પ્રાણીઓનો ઉપયોગ કરો કે જેઓ નવી હોમોઝાયગસ રેખાઓનું સંવર્ધન કરવા માટે સંવર્ધન સ્ટોક તરીકે વિદેશી પ્રોટીન ઉત્પન્ન કરી શકે છે.
17. હાઈબ્રિડોમા કોષ રેખાઓ (માયલોમા) કોશિકાઓ સાથે (બરોળ B) કોશિકાઓના સંકરણ દ્વારા ઉત્પન્ન થાય છે, અને કારણ કે (બરોળના કોષો) હાયપોક્સેન્થિનનો ઉપયોગ કરી શકે છે અને (અસ્થિના કોષો) કોષ વિભાજનના કાર્યો પૂરા પાડે છે, તેથી તેઓ HAT માધ્યમમાં ઉગાડી શકાય છે.વધવું
18. સંશોધનના ઊંડાણ સાથે, એન્ટિબોડીઝની પ્રથમ પેઢીને (પોલીક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ), બીજી પેઢી (મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ), અને ત્રીજી પેઢી (જીનેટિક એન્જિનિયરિંગ એન્ટિબોડીઝ) કહેવામાં આવે છે.
19. હાલમાં, જંતુના વાયરસનું આનુવંશિક ઇજનેરી મુખ્યત્વે બેક્યુલોવાયરસ પર કેન્દ્રિત છે, જે (એક્સોજેનસ ટોક્સિન જીન) ના પરિચયમાં પ્રગટ થાય છે;(જનીનો જે જંતુઓના સામાન્ય જીવન ચક્રને વિક્ષેપિત કરે છે);(વાયરસ જનીનોમાં ફેરફાર).
20. સ્તન્ય પ્રાણીઓમાં ગર્ભમાં રહેલા બચ્ચાની રક્ષા માટેનું આચ્છાદન RNA પોલિમરેઝ II પ્રમોટરમાં સામાન્ય તત્વો TATA, GC અને CAAT ને અનુરૂપ ટ્રાન્સ-એક્ટિંગ પ્રોટીન પરિબળો અનુક્રમે (TFIID), (SP-1) અને (CTF/NF1) છે.
એકવીસ.RNA પોલિમરેઝ Ⅱ ના મૂળભૂત ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો છે, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, અને તેમનો બંધનકર્તા ક્રમ છે: (D, A, B, E).જેમાં TFII-D નું કાર્ય છે (TATA બોક્સ માટે બંધનકર્તા).
બાવીસ.મોટાભાગના ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો જે ડીએનએ સાથે જોડાય છે તે ડાયમર્સના સ્વરૂપમાં કાર્ય કરે છે.ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળોના કાર્યાત્મક ડોમેન્સ જે ડીએનએ સાથે જોડાય છે તે સામાન્ય રીતે નીચે મુજબ છે (હેલિક્સ-ટર્ન-હેલિક્સ), (ઝિંક ફિંગર મોટિફ), (બેઝિક-લ્યુસીન) ઝિપર મોટિફ).
ત્રેવીસ.ત્રણ પ્રકારના પ્રતિબંધ એન્ડોન્યુક્લીઝ ક્લીવેજ મોડ્સ છે: (5' ચીકણા છેડા બનાવવા માટે સમપ્રમાણતા ધરીની 5' બાજુએ કાપો), (3' ચીકણા છેડા બનાવવા માટે સમપ્રમાણતા ધરીની 3' બાજુએ કાપો (સપ્રમાણતા અક્ષ પર કાપો).
ચોવીસ.પ્લાઝમિડ ડીએનએ ત્રણ અલગ અલગ રૂપરેખાંકનો ધરાવે છે: (SC રૂપરેખાંકન), (oc રૂપરેખાંકન), (L રૂપરેખાંકન).ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસમાં પ્રથમ છે (SC રૂપરેખાંકન).
25. એક્ઝોજેનસ જનીન અભિવ્યક્તિ પ્રણાલીઓ, મુખ્યત્વે (Escherichia coli), (યીસ્ટ), (જંતુ) અને (સસ્તન કોષ કોષ્ટક).
26. ટ્રાન્સજેનિક પ્રાણીઓ માટે સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતી પદ્ધતિઓ છે: (રેટ્રોવાયરલ ચેપ પદ્ધતિ), (ડીએનએ માઇક્રોઇન્જેક્શન પદ્ધતિ), (ગર્ભ સ્ટેમ સેલ પદ્ધતિ).
એપ્લિકેશન મોલેક્યુલર બાયોલોજી
1. 5 થી વધુ RNA ના કાર્યોને નામ આપો?
ટ્રાન્સફર RNA tRNA ટ્રાન્સફર એમિનો એસિડ રિબોઝોમ RNA rRNA રિબોઝોમ મેસેન્જર RNA mRNA પ્રોટીન સંશ્લેષણ ટેમ્પલેટની રચના કરે છે વિજાતીય અણુ RNA hnRNA પરિપક્વ mRNA નાના ન્યુક્લિયર RNA snRNA ના અગ્રદૂત કદના સિગ્નલ રેકગ્નિશન બોડી ઘટકો એન્ટિસેન્સ આરએનએ એનઆરએનએ/માઇકઆરએનએ જનીન અભિવ્યક્તિનું નિયમન કરે છે રિબોઝાઇમ આરએનએ એન્ઝાઇમેટિકલી સક્રિય આરએનએ
2. પ્રોકાર્યોટિક અને યુકેરીયોટિક પ્રમોટર્સ વચ્ચે મુખ્ય તફાવત શું છે?
પ્રોકાર્યોટિક ટીટીજીએસીએ --- TATAAT------પ્રારંભ સાઇટ-35 -10 યુકેરીયોટિક એન્હાન્સર---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-પ્રારંભ સાઇટ-110 -70 -25
3. કુદરતી પ્લાઝમિડ્સના કૃત્રિમ બાંધકામના મુખ્ય પાસાઓ શું છે?
કુદરતી પ્લાઝમિડ્સમાં ઘણીવાર ખામીઓ હોય છે, તેથી તે આનુવંશિક ઇજનેરી માટે વાહક તરીકે ઉપયોગ કરવા માટે યોગ્ય નથી, અને તેમાં ફેરફાર અને નિર્માણ કરવું આવશ્યક છે: a.યોગ્ય પસંદગી માર્કર જનીનો ઉમેરો, જેમ કે બે અથવા વધુ, જે પસંદગી માટે ઉપયોગમાં સરળ છે, સામાન્ય રીતે એન્ટિબાયોટિક જનીનો.bપુનઃસંયોજનની સુવિધા માટે યોગ્ય એન્ઝાઇમ કટીંગ સાઇટ્સ વધારો અથવા ઘટાડો.cલંબાઈ ટૂંકી કરો, બિનજરૂરી ટુકડાઓ કાપી નાખો, આયાત કાર્યક્ષમતામાં સુધારો કરો અને લોડિંગ ક્ષમતામાં વધારો કરો.ડી.પ્રતિકૃતિ બદલો, ચુસ્તમાંથી છૂટક, ઓછી નકલોમાંથી વધુ નકલોમાં.ઇ.આનુવંશિક ઇજનેરીની વિશેષ આવશ્યકતાઓ અનુસાર વિશેષ આનુવંશિક તત્વો ઉમેરો
4. પેશી-વિશિષ્ટ cDNA ની વિભેદક તપાસ માટેની પદ્ધતિનું ઉદાહરણ આપો?
બે કોષોની વસ્તી તૈયાર કરવામાં આવે છે, લક્ષ્ય જનીન એક કોષમાં વ્યક્ત અથવા અત્યંત વ્યક્ત કરવામાં આવે છે, અને લક્ષ્ય જનીન અન્ય કોષમાં વ્યક્ત અથવા નીચું દર્શાવવામાં આવતું નથી, અને પછી લક્ષ્ય જનીન વર્ણસંકરીકરણ અને સરખામણી દ્વારા જોવા મળે છે.ઉદાહરણ તરીકે, ગાંઠોની ઘટના અને વિકાસ દરમિયાન, ગાંઠ કોશિકાઓ સામાન્ય કોષો કરતાં અલગ અભિવ્યક્તિ સ્તરો સાથે mRNA રજૂ કરશે.તેથી, ગાંઠ-સંબંધિત જનીનો વિભેદક સંકરણ દ્વારા તપાસી શકાય છે.ઇન્ડક્શન પદ્ધતિનો ઉપયોગ જનીનોને તપાસવા માટે પણ થઈ શકે છે જેની અભિવ્યક્તિ પ્રેરિત છે.
5. હાઇબ્રિડોમા કોષ રેખાઓનું નિર્માણ અને સ્ક્રીનીંગ?
બરોળના બી કોષો + માયલોમા કોષો, સેલ ફ્યુઝનને પ્રોત્સાહન આપવા માટે પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ (PEG) ઉમેરો અને HAT માધ્યમમાં ઉગાડવામાં આવેલા સ્પ્લેનિક B-માયલોમા ફ્યુઝન કોષો (હાયપોક્સેન્થિન, એમિનોપ્ટેરિન, ટી ધરાવતા) પોષણનું વિસ્તરણ કરવાનું ચાલુ રાખે છે.સેલ ફ્યુઝન સમાવે છે: બરોળ-બરોળ ફ્યુઝન કોશિકાઓ: વૃદ્ધિ કરવામાં અસમર્થ, બરોળના કોષોને વિટ્રોમાં સંવર્ધિત કરી શકાતા નથી.બોન-બોન ફ્યુઝન કોષો: હાયપોક્સેન્થિનનો ઉપયોગ કરી શકતા નથી, પરંતુ ફોલેટ રીડક્ટેઝનો ઉપયોગ કરીને બીજા માર્ગ દ્વારા પ્યુરીનનું સંશ્લેષણ કરી શકે છે.એમિનોપ્ટેરિન ફોલેટ રિડક્ટેઝને અટકાવે છે અને તેથી તે વધી શકતું નથી.અસ્થિ-બરોળ ફ્યુઝન કોશિકાઓ: HAT માં વૃદ્ધિ કરી શકે છે, બરોળના કોષો હાયપોક્સેન્થિનનો ઉપયોગ કરી શકે છે, અને અસ્થિ કોષો કોષ વિભાજન કાર્ય પ્રદાન કરે છે.
6. ડીડીઓક્સી ટર્મિનલ ટર્મિનેશન મેથડ (સેંગર મેથડ) દ્વારા ડીએનએનું પ્રાથમિક માળખું નક્કી કરવાનો સિદ્ધાંત અને પદ્ધતિ શું છે?
સિદ્ધાંત એ છે કે ડીએનએના વિસ્તરણને સમાપ્ત કરવા માટે ન્યુક્લિયોટાઇડ ચેઇન ટર્મિનેટર-2,,3,-ડાઇડોક્સિન્યુક્લિયોટાઇડનો ઉપયોગ કરવો.તેમાં 3/5/ફોસ્ફોડિસ્ટર બોન્ડની રચના માટે જરૂરી 3-OH નો અભાવ હોવાથી, એકવાર DNA સાંકળમાં સમાવિષ્ટ થઈ ગયા પછી, DNA સાંકળને આગળ વધારી શકાતી નથી.બેઝ પેરિંગના સિદ્ધાંત મુજબ, જ્યારે પણ ડીએનએ પોલિમરેઝને સામાન્ય રીતે વિસ્તૃત ડીએનએ સાંકળમાં ભાગ લેવા માટે ડીએનએમપીની જરૂર પડે છે, ત્યાં બે શક્યતાઓ છે, એક ડીડીએનટીપીમાં ભાગ લેવો, જેના પરિણામે ડીઓક્સીન્યુક્લિયોટાઇડ સાંકળના વિસ્તરણને સમાપ્ત કરવામાં આવે છે;બીજું dNTP માં ભાગ લેવાનું છે, જેથી આગામી ddNTP સામેલ ન થાય ત્યાં સુધી DNA સાંકળ હજુ પણ વિસ્તરવાનું ચાલુ રાખી શકે.આ પદ્ધતિ અનુસાર, ddNTP માં સમાપ્ત થતા વિવિધ લંબાઈના DNA ટુકડાઓનું જૂથ મેળવી શકાય છે.પદ્ધતિને અનુક્રમે ddAMP, ddGMP, ddCMP અને ddTMP એમ ચાર જૂથોમાં વિભાજિત કરવાની છે.પ્રતિક્રિયા પછી, પોલિએક્રીલામાઇડ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ સ્વિમિંગ બેન્ડ્સ અનુસાર ડીએનએ ક્રમ વાંચી શકે છે.
7. ટ્રાન્સક્રિપ્શન પર એક્ટિવેટર પ્રોટીન (CAP) ની હકારાત્મક નિયમન અસર શું છે?
ચક્રીય એડેનીલેટ (સીએએમપી) રીસેપ્ટર પ્રોટીન સીઆરપી (સીએએમપી રીસેપ્ટર પ્રોટીન), સીએએમપી અને સીઆરપીના સંયોજનથી બનેલા સંકુલને સીએપી (સીએએમપી એક્ટિવેટેડ પ્રોટીન) કહેવામાં આવે છે.જ્યારે E. coli ગ્લુકોઝની અછત ધરાવતા માધ્યમમાં ઉગાડવામાં આવે છે, ત્યારે CAP નું સંશ્લેષણ વધે છે, અને CAP લેક્ટોઝ (Lac) જેવા પ્રમોટર્સને સક્રિય કરવાનું કાર્ય ધરાવે છે.કેટલાક CRP-આશ્રિત પ્રમોટરોમાં સામાન્ય પ્રમોટરો પાસે લાક્ષણિક -35 રીજન સિક્વન્સ ફીચર (TTGACA) નો અભાવ હોય છે.તેથી, આરએનએ પોલિમરેઝ માટે તેની સાથે જોડવું મુશ્કેલ છે.CAP (કાર્ય) ની હાજરી: એન્ઝાઇમ અને પ્રમોટરના બંધનકર્તા સ્થિરતાને નોંધપાત્ર રીતે સુધારી શકે છે.તે મુખ્યત્વે નીચેના બે પાસાઓ દર્શાવે છે: ① CAP એન્ઝાઇમના પરમાણુને પ્રમોટરની રચના અને એન્ઝાઇમ સાથેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાને બદલીને યોગ્ય રીતે દિશામાન કરવામાં મદદ કરે છે, જેથી -10 પ્રદેશ સાથે જોડાઈ શકે અને -35 પ્રદેશના કાર્યને બદલવાની ભૂમિકા ભજવે.②CAP RNA પોલિમરેઝને DNA માં અન્ય સાઇટ્સ સાથે બંધનકર્તાને પણ અટકાવી શકે છે, જેનાથી તેના ચોક્કસ પ્રમોટર સાથે બંધન થવાની સંભાવના વધી જાય છે.
8. સામાન્ય રીતે ડીએનએ પુનઃસંયોજન પ્રયોગમાં કયા પગલાઓનો સમાવેશ કરવામાં આવે છે?
aદાતા જીવતંત્રના લક્ષ્ય જનીન (અથવા એક્ઝોજેનસ જનીન) ને બહાર કાઢો, અને નવા રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએ પરમાણુ બનાવવા માટે તેને એન્ઝાઈમેટિકલી અન્ય ડીએનએ પરમાણુ (ક્લોનિંગ વેક્ટર) સાથે જોડો.bરિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએ પરમાણુને પ્રાપ્તકર્તા કોષમાં સ્થાનાંતરિત કરો અને તેને પ્રાપ્તકર્તા કોષમાં પ્રતિકૃતિ બનાવો અને સાચવો.આ પ્રક્રિયાને રૂપાંતર કહેવામાં આવે છે.cસ્ક્રિન કરો અને તે પ્રાપ્તકર્તા કોષોને ઓળખો કે જેણે રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએને શોષી લીધું છે.ડી.વિદેશી સહાય જનીન વ્યક્ત થાય છે કે કેમ તે શોધવા માટે રિકોમ્બિનન્ટ ડીએનએ ધરાવતા કોષોનું માસ કલ્ચર.
9. જીન લાઇબ્રેરીનું નિર્માણ પુનઃસંયોજકોની તપાસ માટે ત્રણ પદ્ધતિઓ આપવામાં આવી છે અને પ્રક્રિયાનું ટૂંકમાં વર્ણન કરવામાં આવ્યું છે.
એન્ટિબાયોટિક રેઝિસ્ટન્સ સ્ક્રિનિંગ, ઇન્સર્ટેશનલ ઇનએક્ટિવેશન ઑફ રેઝિસ્ટન્સ, બ્લુ-વ્હાઇટ સ્પોટ સ્ક્રીનિંગ અથવા પીસીઆર સ્ક્રીનિંગ, ડિફરન્સિયલ સ્ક્રિનિંગ, ડીએનએ પ્રોબ મોટાભાગના ક્લોનિંગ વેક્ટર એન્ટિબાયોટિક રેઝિસ્ટન્સ જનીન (એન્ટી-એમ્પીસિલિન, ટેટ્રાસાયક્લાઇન) ધરાવે છે.જ્યારે પ્લાઝમિડ એસ્ચેરીચીયા કોલીમાં સ્થાનાંતરિત થાય છે, ત્યારે બેક્ટેરિયા પ્રતિકાર પ્રાપ્ત કરશે, અને ટ્રાન્સફર વિનાના લોકોમાં પ્રતિકાર હશે નહીં.પરંતુ તે અલગ કરી શકતું નથી કે તેનું પુનર્ગઠન કરવામાં આવ્યું છે કે નહીં.બે પ્રતિકારક જનીનો ધરાવતા વેક્ટરમાં, જો વિદેશી ડીએનએ ટુકડો એક જનીનમાં દાખલ કરવામાં આવે છે અને તે જનીનને નિષ્ક્રિય કરવા માટેનું કારણ બને છે, તો વિવિધ દવાઓ ધરાવતા બે પ્લેટ નિયંત્રણોનો ઉપયોગ હકારાત્મક રીકોમ્બિનન્ટ્સ માટે સ્ક્રીનીંગ કરવા માટે કરી શકાય છે.ઉદાહરણ તરીકે, pUC પ્લાઝમિડમાં LacZ જનીન (એનકોડિંગ β-galactosidase) હોય છે, જે ક્રોમોજેનિક સબસ્ટ્રેટ X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) ને વિઘટિત કરીને વાદળી પેદા કરી શકે છે, આમ તાણ વાદળી થઈ જાય છે.જ્યારે વિદેશી ડીએનએ દાખલ કરવામાં આવે છે, ત્યારે LacZ જનીન વ્યક્ત કરી શકાતું નથી, અને તાણ સફેદ હોય છે, જેથી પુનઃસંયોજક બેક્ટેરિયાને તપાસી શકાય.
10. ગર્ભના સ્ટેમ સેલ દ્વારા ટ્રાન્સજેનિક પ્રાણીઓ મેળવવાની મૂળભૂત પ્રક્રિયા સમજાવો?
એમ્બ્રીયોનિક સ્ટેમ કોશિકાઓ (ES) એ ભ્રૂણના વિકાસ દરમિયાન ગર્ભના કોષો છે, જે કૃત્રિમ રીતે સંવર્ધન અને વિસ્તરણ કરી શકાય છે અને અન્ય પ્રકારના કોષોમાં ભિન્નતાનું કાર્ય ધરાવે છે.ES કોશિકાઓની સંસ્કૃતિ: બ્લાસ્ટોસિસ્ટનો આંતરિક કોષ સમૂહ અલગ અને સંસ્કારી છે.જ્યારે ES ને ફીડર-ફ્રી લેયરમાં સંવર્ધન કરવામાં આવે છે, ત્યારે તે સ્નાયુ કોશિકાઓ અને N કોશિકાઓ જેવા વિવિધ કાર્યાત્મક કોષોમાં ભેદ પાડશે.જ્યારે ફાઈબ્રોબ્લાસ્ટ્સ ધરાવતા માધ્યમમાં સંવર્ધન કરવામાં આવે છે, ત્યારે ES ભિન્નતા કાર્યને જાળવી રાખશે.ES ને આનુવંશિક રીતે મેનિપ્યુલેટ કરી શકાય છે, અને તેના ભિન્નતા કાર્યને તેના ભિન્નતા કાર્યને અસર કર્યા વિના એકીકૃત કરી શકાય છે, જે રેન્ડમ એકીકરણની સમસ્યાને હલ કરે છે.ગર્ભના સ્ટેમ કોશિકાઓમાં એક્ઝોજેનસ જનીનો દાખલ કરો, પછી ગર્ભવતી માદા ઉંદરના ગર્ભાશયમાં રોપવામાં આવે છે, બચ્ચાંમાં વિકાસ થાય છે અને હોમોઝાયગસ ઉંદર મેળવવા માટે ક્રોસ થાય છે.
