ડિટેક્શન ટેક્નોલોજીના ઈતિહાસમાં ઘણી ક્રાંતિકારી આવિષ્કારો મારા ધ્યાનમાં છે, એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સ્પેસિફિક બાઈન્ડિંગ, પીસીઆર ટેક્નોલોજી અને સિક્વન્સિંગ ટેક્નોલોજીના સિદ્ધાંત પર આધારિત ઇમ્યુનોલેબલિંગ ટેક્નોલોજી છે.આજે આપણે પીસીઆર ટેક્નોલોજી વિશે વાત કરીશું.પીસીઆર ટેક્નોલોજીના ઉત્ક્રાંતિ અનુસાર, લોકો પીસીઆર ટેક્નોલોજીને સામાન્ય રીતે ત્રણ પેઢીઓમાં વિભાજિત કરે છે: સામાન્ય પીસીઆર ટેક્નોલોજી, રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆર ટેક્નોલોજી અને ડિજિટલ પીસીઆર ટેક્નોલોજી.
Cઓમોન પીસીઆર તકનીક
કેરી મુલિસ (1944.12.28-2019.8.7)
કેરી મુલિસે 1983 માં પોલિમરેઝ ચેઇન રિએક્શન (પોલિમરેઝ ચેઇન રિએક્શન , પીસીઆર) ની શોધ કરી હતી. એવું કહેવાય છે કે જ્યારે તે તેની ગર્લફ્રેન્ડને ડ્રાઇવ કરી રહ્યો હતો, ત્યારે તેને અચાનક પ્રેરણાનો ઝબકારો થયો અને તેણે પીસીઆર (ડ્રાઇવિંગના ફાયદાઓ પર) ના સિદ્ધાંત વિશે વિચાર્યું.કેરી મુલિસને 1993 માં રસાયણશાસ્ત્રમાં નોબેલ પારિતોષિક એનાયત કરવામાં આવ્યું હતું. ધ ન્યૂ યોર્ક ટાઇમ્સે ટિપ્પણી કરી: "અત્યંત મૂળ અને નોંધપાત્ર, લગભગ બાયોલોજીને પૂર્વ-પીસીઆર અને પીસીઆર પછીના યુગમાં વિભાજિત કરે છે.
પીસીઆરનો સિદ્ધાંત: ડીએનએ પોલિમરેઝના ઉત્પ્રેરક હેઠળ, મધર સ્ટ્રેન્ડ ડીએનએનો ટેમ્પલેટ તરીકે ઉપયોગ થાય છે, અને વિશિષ્ટ પ્રાઈમરનો ઉપયોગ વિસ્તરણના પ્રારંભિક બિંદુ તરીકે થાય છે, અને મધર સ્ટ્રેન્ડ ટેમ્પ્લેટ ડીએનએના પૂરક પુત્રી સ્ટ્રેન્ડ ડીએનએ ડિનેચરેશન, એનેલીંગ, એક્સ્ટેંશન અને અન્ય સ્ટેપ દ્વારા વિટ્રોમાં નકલ કરવામાં આવે છે.તે વિટ્રોમાં ડીએનએ સંશ્લેષણ એમ્પ્લીફિકેશન ટેકનોલોજી છે, જે વિટ્રોમાં કોઈપણ લક્ષ્ય ડીએનએને ઝડપથી અને વિશિષ્ટ રીતે વિસ્તૃત કરી શકે છે.
સામાન્ય પીસીઆરના ફાયદા
1.ક્લાસિક પદ્ધતિ, સંપૂર્ણ આંતરરાષ્ટ્રીય અને સ્થાનિક ધોરણો
2.ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ રીએજન્ટ્સની ઓછી કિંમત
3.અન્ય પરમાણુ જીવવિજ્ઞાન પ્રયોગો માટે PCR ઉત્પાદનો પુનઃપ્રાપ્ત કરી શકાય છે
ભલામણ કરેલ ફોરજીન પીસીઆર મશીન: https://www.foreivd.com/foreamp-sn-695-series-thermal-cycler-96-wells-pcr-machine-product/
સંબંધિત ઉત્પાદનો: https://www.foreivd.com/pcr-herotm-with-dye-product/
સામાન્ય પીસીઆરના ગેરફાયદા
1.પ્રદૂષિત કરવા માટે સરળ
2.બોજારૂપ કામગીરી
3.માત્ર ગુણાત્મક વિશ્લેષણ
4.મધ્યમ સંવેદનશીલતા
5.ત્યાં બિન-વિશિષ્ટ એમ્પ્લીફિકેશન છે, અને જ્યારે બિન-વિશિષ્ટ બેન્ડ લક્ષ્ય બેન્ડ જેટલું જ કદ ધરાવે છે, ત્યારે તેને ઓળખી શકાતું નથી.
Cએપિલરી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ આધારિત પીસીઆર
સામાન્ય પીસીઆરની ખામીઓના જવાબમાં, કેટલાક ઉત્પાદકોએ કેશિલરી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસના સિદ્ધાંત પર આધારિત સાધનો રજૂ કર્યા છે.રુધિરકેશિકામાં PCR એમ્પ્લીફિકેશન પછી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પગલું પૂર્ણ થાય છે.સંવેદનશીલતા વધારે છે, અને અનેક પાયાના તફાવતને ઓળખી શકાય છે અને MAERKER દ્વારા એમ્પ્લીફિકેશનની ગણતરી કરી શકાય છે.ઉત્પાદન સામગ્રી.ગેરલાભ એ છે કે PCR ઉત્પાદનને હજી પણ ખોલવાની અને સાધનમાં મૂકવાની જરૂર છે, અને હજુ પણ દૂષિત થવાનું મોટું જોખમ છે.
CએપિલરીEઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ
2. રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆર (ક્વોન્ટિટેટિવ રીઅલ-ટાઇમ પીસીઆર, qPCR) ટેકનોલોજીફ્લોરોસન્ટ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆર, જેને રીઅલ-ટાઇમ પીસીઆર પણ કહેવાય છે, એ PE (પર્કિન એલ્મર) દ્વારા 1995માં વિકસાવવામાં આવેલી નવી ન્યુક્લિક એસિડ જથ્થાત્મક તકનીક છે. ફ્લોરોસન્ટ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆરનો વિકાસ એબીઆઈ, રોચે અને બાયો-આઈઆર જેવા જાયન્ટ્સના આત્માને ઉત્તેજિત કરતા સંઘર્ષોનો ઇતિહાસ છે.જો તમને રસ હોય, તો તમે તેને તપાસી શકો છો.આ તકનીક હાલમાં સૌથી વધુ પરિપક્વ અને વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાતી અર્ધ-માત્રાત્મક પીસીઆર તકનીક છે.
ભલામણ કરેલ qPCR મશીન:https://www.foreivd.com/mini-real-time-pcr-system-forequant-sf2sf4-product/
ફ્લોરોસન્ટ ડાય પદ્ધતિ (SYBR ગ્રીન I):SYBR ગ્રીન I એ જથ્થાત્મક પીસીઆર માટે સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતો ડીએનએ-બંધનકર્તા રંગ છે, જે બિન-વિશિષ્ટ રીતે ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ સાથે જોડાય છે.મુક્ત સ્થિતિમાં, SYBR ગ્રીન નબળા ફ્લોરોસેન્સનું ઉત્સર્જન કરે છે, પરંતુ એકવાર ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ સાથે બંધાઈ ગયા પછી, તેની ફ્લોરોસેન્સ 1000-ગણી વધી જાય છે.તેથી, પ્રતિક્રિયા દ્વારા ઉત્સર્જિત કુલ ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ હાજર ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએની માત્રાના પ્રમાણસર છે અને એમ્પ્લીફાઇડ ઉત્પાદનના વધારા સાથે વધશે.રંગ બિન-વિશિષ્ટ રીતે ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ સાથે જોડતો હોવાથી, ખોટા હકારાત્મક પરિણામો ઉત્પન્ન થઈ શકે છે.
સંબંધિત ઉત્પાદનો: https://www.foreivd.com/real-time-pcr-easytm-sybr-green-i-kit-product/
ફ્લોરોસન્ટ પ્રોબ મેથડ (તકમાન ટેકનોલોજી): દરમિયાનPCR એમ્પ્લીફિકેશન, એક ચોક્કસ ફ્લોરોસન્ટ પ્રોબ એ જ સમયે પ્રાઇમરની જોડી તરીકે ઉમેરવામાં આવે છે.ચકાસણી એ રેખીય ઓલિગોન્યુક્લિયોટાઇડ છે, જેમાં ફ્લોરોસન્ટ રિપોર્ટર જૂથ અને ફ્લોરોસન્ટ ક્વેન્ચર જૂથ અનુક્રમે બંને છેડે લેબલ થયેલ છે.જ્યારે ચકાસણી અકબંધ હોય છે, ત્યારે રિપોર્ટર જૂથ દ્વારા ઉત્સર્જિત ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ ક્વેન્ચર જૂથ દ્વારા શોષાય છે, અને તપાસ ત્યાં કોઈ ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ નથી;PCR એમ્પ્લીફિકેશન દરમિયાન (એક્સ્ટેંશન સ્ટેજમાં), Taq એન્ઝાઇમની 5'-3' ડાયસર પ્રવૃત્તિ તપાસને ડાયજેસ્ટ કરશે અને ડિગ્રેડ કરશે, જેથી રિપોર્ટર ફ્લોરોસન્ટ ગ્રૂપ અને ક્વેન્ચર ફ્લોરોસન્ટ ગ્રૂપને અલગ કરવામાં આવે, જેથી ફ્લોરોસેન્સ મોનિટરિંગ સિસ્ટમ ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ પ્રાપ્ત કરી શકે, એટલે કે, દરેક વખતે એમ્પ્લીફ્યુએશન એ રિયલ એમ્પ્લીફિકેશન (એમ્પ્લોઇન્સ) સ્વરૂપે થાય છે. ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલોના સંચય અને પીસીઆર ઉત્પાદનોની રચનાનું સંપૂર્ણ સિંક્રનાઇઝેશન.ક્લિનિકલ ડિટેક્શનમાં તાકમાન પ્રોબ પદ્ધતિ સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતી તપાસ પદ્ધતિ છે.
સંબંધિત ઉત્પાદનો: https://www.foreivd.com/quickeasy%e1%b5%80%e1%b4%b9-real-time-pcr-kit-taqman-product/
qPCR ના ફાયદા
1.પદ્ધતિ પરિપક્વ છે અને સહાયક સાધનો અને રીએજન્ટ્સ પૂર્ણ છે
2.રીએજન્ટ્સની મધ્યમ કિંમત
3.વાપરવા માટે સરળ
4.ઉચ્ચ તપાસ સંવેદનશીલતા અને વિશિષ્ટતા
qPCR ના ગેરફાયદા
લક્ષ્ય જનીનનું પરિવર્તન ચૂકી ગયેલી શોધ તરફ દોરી જાય છે.
ઓછી સાંદ્રતા નમૂનાનું શોધ પરિણામ નક્કી કરી શકાતું નથી.
માત્રાત્મક શોધ માટે પ્રમાણભૂત વળાંકનો ઉપયોગ કરતી વખતે મોટી ભૂલ છે.
3. ડિજિટલ પીસીઆર (ડિજિટલ પીસીઆર, ડીપીસીઆર) ટેકનોલોજી
ડિજિટલ પીસીઆર એ ન્યુક્લીક એસિડ પરમાણુઓના સંપૂર્ણ પ્રમાણીકરણ માટેની તકનીક છે.qPCR ની સરખામણીમાં, ડિજિટલ PCR સીધા જ DNA/RNA પરમાણુઓની સંખ્યા વાંચી શકે છે, જે પ્રારંભિક નમૂનામાં ન્યુક્લીક એસિડ પરમાણુઓનું સંપૂર્ણ પ્રમાણીકરણ છે.1999માં, બર્ટ વોગેલસ્ટીન અને કેનેથ ડબલ્યુ. કિન-ઝ્લરે ઔપચારિક રીતે dPCR ના ખ્યાલનો પ્રસ્તાવ મૂક્યો હતો.
2006 માં, ફ્લુઇડિગમ એ કોમર્શિયલ ચિપ-આધારિત dPCR સાધનનું ઉત્પાદન કરનાર પ્રથમ હતું.2009 માં, લાઇફ ટેક્નોલોજીએ ઓપનએરે અને ક્વોન્ટસ્ટુડિયો 12K ફ્લેક્સ ડીપીસીઆર સિસ્ટમ્સ લોન્ચ કરી.2013 માં, લાઇફ ટેક્નોલોજિસે ક્વોન્ટસ્ટુડિયો 3DdPCR સિસ્ટમ શરૂ કરી, જે 20,000 વ્યક્તિગત કોષોમાં સમાનરૂપે નમૂનાઓનું વિતરણ કરવા માટે ઉચ્ચ-ઘનતા નેનોસ્કેલ માઇક્રોફ્લુઇડિક ચિપ તકનીકનો ઉપયોગ કરે છે.પ્રતિક્રિયામાં સારી રીતે.
2011 માં, Bio-Rad એ ટીપું-આધારિત QX100 dPCR ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ લોન્ચ કર્યું, જે 20,000 ટીપાં-વોટર-ઇન-ઓઇલમાં નમૂનાને સમાનરૂપે વિતરિત કરવા માટે વોટર-ઇન-ઓઇલ ટેક્નોલોજીનો ઉપયોગ કરે છે, અને ટીપાંનું વિશ્લેષણ કરવા માટે ડ્રોપલેટ એનાલાઇઝરનો ઉપયોગ કરે છે.2012 માં, RainDance એ રેઈનડ્રોપ dPCR સાધન લોન્ચ કર્યું, જે ઉચ્ચ-દબાણવાળા ગેસ દ્વારા ચલાવવામાં આવે છે, દરેક પ્રમાણભૂત પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીને 1 મિલિયનથી 10 મિલિયન પિકોલિટર-લેવલના સૂક્ષ્મ-ડ્રોપલેટ્સ ધરાવતા પ્રતિક્રિયા પ્રવાહીમાં વિભાજીત કરવા માટે.
અત્યાર સુધીમાં, ડિજિટલ પીસીઆરએ બે મુખ્ય જૂથો બનાવ્યા છે, ચિપ પ્રકાર અને ડ્રોપલેટ પ્રકાર.ભલે ગમે તે પ્રકારનું ડિજિટલ પીસીઆર હોય, તેના મુખ્ય સિદ્ધાંતો મંદન, એન્ડપોઈન્ટ પીસીઆર અને પોઈસન વિતરણને મર્યાદિત કરે છે.ન્યુક્લીક એસિડ ટેમ્પ્લેટ્સ ધરાવતી પ્રમાણભૂત PCR પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીને હજારો પીસીઆર પ્રતિક્રિયાઓમાં સમાનરૂપે વિભાજિત કરવામાં આવે છે, જે ચિપ્સ અથવા માઇક્રોડ્રોપ્લેટ્સમાં વિતરિત કરવામાં આવે છે, જેથી દરેક પ્રતિક્રિયામાં શક્ય તેટલું નમૂનો પરમાણુ હોય, અને એક-પરમાણુ નમૂના PCR પ્રતિક્રિયા કરવામાં આવે.ફ્લોરોસેન્સ વાંચીને, સિગ્નલની હાજરી અથવા ગેરહાજરી ગણવામાં આવે છે, અને આંકડાકીય પોઈસન વિતરણના માપાંકન પછી સંપૂર્ણ પ્રમાણીકરણ કરવામાં આવે છે.
મેં ઉપયોગમાં લીધેલા કેટલાક ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મ્સની નીચેની લાક્ષણિકતાઓ છે:
1. બાયો-રેડ QX200 ટીપું ડિજિટલ પીસીઆર બાયો-રેડQX200 એ ખૂબ જ ક્લાસિક ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મ છે, મૂળભૂત તપાસ પ્રક્રિયા: 20,000 નમૂનાઓ ડ્રોપલેટ જનરેટર દ્વારા જનરેટ કરવામાં આવે છે વોટર-ઇન-ઓઇલ માઇક્રો-ડ્રોપલેટ્સને સામાન્ય PCR મશીન પર એમ્પ્લીફાઇડ કરવામાં આવે છે, અને અંતે દરેક માઇક્રો-ડ્રોપલેટના ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલને માઇક્રો-ડ્રોપલેટ રીડર દ્વારા વાંચવામાં આવે છે.ઓપરેશન વધુ જટિલ છે, અને પ્રદૂષણનું જોખમ મધ્યમ છે.
Xinyi TD1 માઇક્રો-ડ્રોપલેટ ડિજિટલ PCRXinyi TD1 એ સ્થાનિક ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મ છે, જે મૂળભૂત તપાસ પ્રક્રિયા છે: ડ્રોપલેટ જનરેટર દ્વારા 30,000-50,000 વોટર-ઇન-ઓઇલ ટીપું જનરેટ કરો, સામાન્ય PCR ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ પર એમ્પ્લીફાય કરો અને અંતે ડ્રોપલેટ રીડર દરેક ટીપાના ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલને વાંચે છે.આ પ્લેટફોર્મમાં ટીપું જનરેશન અને વાંચન બંને દૂષણના ઓછા જોખમ સાથે સમર્પિત ચિપમાં કરવામાં આવે છે.
STILLA Naica માઇક્રો-ડ્રોપલેટ ચિપ ડિજિટલ PCRSTILLA Naica પ્રમાણમાં નવું ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મ છે.મૂળભૂત તપાસ પ્રક્રિયા છે: ચિપમાં પ્રતિક્રિયા ઉકેલ ઉમેરો, ચિપને માઇક્રો-ડ્રોપલેટ જનરેશન અને એમ્પ્લીફિકેશન સિસ્ટમમાં મૂકો અને 30,000 માઇક્રો-ટીપું બનાવો.ચિપ પર ફેલાવો, અને પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન ચિપ પર પૂર્ણ થાય છે.પછી એમ્પ્લીફાઇડ ચિપને માઇક્રો-ડ્રોપલેટ રીડિંગ એનાલિસિસ સિસ્ટમમાં ટ્રાન્સફર કરવામાં આવે છે, અને ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ ચિત્રો લઈને વાંચવામાં આવે છે.આખી પ્રક્રિયા બંધ ચિપમાં થતી હોવાથી, દૂષણનું જોખમ ઓછું છે.
4. થર્મોફિશર ક્વોન્ટસ્ટુડિયો 3D ચિપ ડિજિટલ પીસીઆર
ThermoFisher QuantStudio 3D એ અન્ય ક્લાસિક ચિપ-આધારિત ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મ છે.તેની મૂળભૂત તપાસ પ્રક્રિયા છે: સ્પ્રેડરમાં પ્રતિક્રિયા ઉકેલ ઉમેરો, અને સ્પ્રેડર દ્વારા 20,000 માઇક્રોવેલ્સ સાથે ચિપ પર સમાનરૂપે પ્રતિક્રિયા ઉકેલ ફેલાવો., એમ્પ્લીફાય કરવા માટે પીસીઆર મશીન પર ચિપ મૂકો અને છેલ્લે રીડરમાં ચિપ મૂકો અને ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ વાંચવા માટે ફોટો લો.ઓપરેશન પ્રમાણમાં જટિલ છે, અને આખી પ્રક્રિયા બંધ ચિપમાં હાથ ધરવામાં આવે છે, અને દૂષિત થવાનું જોખમ ઓછું છે.
5. JN MEDSYS ક્લેરિટી ચિપ ડિજિટલ PCR
JN MEDSYS ક્લેરિટી એ પ્રમાણમાં નવું ચિપ-પ્રકારનું ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મ છે.તેની મૂળભૂત તપાસ પ્રક્રિયા છે: એપ્લીકેટરમાં રીએક્શન સોલ્યુશન ઉમેરો અને એપ્લીકેટર દ્વારા પીસીઆર ટ્યુબમાં નિશ્ચિત 10,000 પીસીઆર ટ્યુબ પર રીએક્શન સોલ્યુશનને સરખે ભાગે ફેલાવો.માઇક્રોપોરસ ચિપ પર, રિએક્શન સોલ્યુશન કેશિલરી એક્શન દ્વારા ચિપમાં પ્રવેશે છે, અને ચિપ સાથેની પીસીઆર ટ્યુબ એમ્પ્લીફિકેશન માટે પીસીઆર મશીન પર મૂકવામાં આવે છે, અને છેલ્લે ફોટો લઈને ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ વાંચવા માટે ચિપને રીડરમાં મૂકવામાં આવે છે.ઓપરેશન વધુ જટિલ છે.દૂષણનું જોખમ ઓછું છે.
દરેક ડિજિટલ પીસીઆર પ્લેટફોર્મના પરિમાણોનો સારાંશ નીચે મુજબ છે:
ડિજિટલ પીસીઆર પ્લેટફોર્મના મૂલ્યાંકન સૂચકાંકો છે: વિભાજીત એકમોની સંખ્યા, ફ્લોરોસન્ટ ચેનલોની સંખ્યા, કામગીરીની જટિલતા અને દૂષણનું જોખમ.પરંતુ સૌથી મહત્વની વસ્તુ તપાસની ચોકસાઈ છે.ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મ્સનું મૂલ્યાંકન કરવાની એક રીત એ છે કે એકબીજાને ચકાસવા માટે બહુવિધ ડિજિટલ PCR પ્લેટફોર્મનો ઉપયોગ કરવો, અને બીજી રીત એ છે કે ચોક્કસ મૂલ્યો સાથે પ્રમાણભૂત પદાર્થોનો ઉપયોગ કરવો.
ડીપીસીઆરના ફાયદા
1.સંપૂર્ણ પરિમાણ પ્રાપ્ત કરવું
2.ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા અને વિશિષ્ટતા
3.ઓછી નકલના નમૂનાઓ શોધી શકે છે
dPCR ના ગેરફાયદા1. મોંઘા સાધનો અને રીએજન્ટ્સ 2. જટિલ કામગીરી અને લાંબી શોધ સમય 3. સાંકડી શોધ શ્રેણી
હાલમાં, પીસીઆર ટેક્નોલોજીની ત્રણ પેઢીના પોતાના ફાયદા અને ગેરફાયદા છે, અને દરેકના પોતાના એપ્લિકેશન ક્ષેત્રો છે, અને તે એવો સંબંધ નથી કે એક પેઢી બીજી પેઢીને બદલે.ટેક્નોલોજીની સતત પ્રગતિએ પીસીઆર ટેક્નોલોજીમાં નવું જોમ ઇન્જેક્ટ કર્યું છે, જે તેને એક પછી એક એપ્લિકેશન દિશાને અનલૉક કરવામાં સક્ષમ બનાવે છે, જે ન્યુક્લિક એસિડ શોધને વધુ અનુકૂળ અને સચોટ બનાવે છે.
સ્ત્રોત: ડૉ. યુઆન તમને પરીક્ષણ માટે લઈ જાય છે
ભલામણ કરેલ ઉત્પાદનો:
પોસ્ટ સમય: નવેમ્બર-18-2022
