સમાચાર - SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ પરીક્ષણના મુખ્ય મુદ્દાઓનું વ્યાપક અર્થઘટન, શા માટે ખોટા નકારાત્મક અને પુનઃ પરીક્ષણ હકારાત્મક છે?

ફાટી નીકળવાના પ્રારંભિક તબક્કામાં, ઝડપી વિકાસને કારણે, શંકાસ્પદ દર્દીઓનું ઝડપી નિદાન એ COVID-19 ને રોકવા માટેની ચાવી છે.કેટલાક માન્ય ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શન રીએજન્ટ્સનો વિકાસ સમય ઓછો હોય છે, અને ઉતાવળમાં કામગીરીની પુષ્ટિ, અપર્યાપ્ત રીએજન્ટ ઓપ્ટિમાઇઝેશન અને બેચ વચ્ચેના મોટા તફાવત જેવી સમસ્યાઓ છે;ન્યુક્લિક એસિડ શોધ પ્રક્રિયાના વિવિધ પાસાઓમાં વિવિધ ક્લિનિકલ પ્રયોગશાળાઓની સમસ્યાઓ પણ ન્યુક્લિક એસિડ શોધ પરિણામોની ચોકસાઈને અસર કરી શકે છે.આ લેખ વર્તમાન SARS-CoV-2 ન્યુક્લિક એસિડ શોધમાં મુખ્ય લિંક્સ અને મુદ્દાઓ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરશે, અને પ્રયોગશાળા ન્યુક્લિક એસિડ શોધ અને ક્લિનિકલ અસંગતતાની ખોટી નકારાત્મક અને હકારાત્મક પુનઃપરીક્ષાની સમસ્યાઓનું વિશ્લેષણ કરશે.

SARS-CoV-2 ન્યુક્લિક એસિડ શોધના સિદ્ધાંતો

SARS-CoV-2 એ લગભગ 29 kb નો જિનોમ સિક્વન્સ ધરાવતો RNA વાયરસ છે, જેમાં 10 જીન્સ છે, જે અસરકારક રીતે 10 પ્રોટીનને એન્કોડ કરી શકે છે.વાયરસ આરએનએ અને પ્રોટીનથી બનેલા હોય છે, અને સૌથી બહારનું સ્તર લિપિડ્સ અને ગ્લાયકોપ્રોટીનથી બનેલું બાહ્ય આવરણ છે.અંદર, પ્રોટીન કેપ્સિડ તેમાં આરએનએને લપેટી લે છે, ત્યાં સરળતાથી ડિગ્રેડેબલ આરએનએ (P1) ને સુરક્ષિત કરે છે.

P1 SARS-COV-2 નું માળખું

વાયરસ ચેપનું કારણ બને તે માટે ચોક્કસ કોષ સપાટી રીસેપ્ટર્સ દ્વારા કોષો પર આક્રમણ કરે છે અને નકલ કરવા માટે યજમાન કોષોનો ઉપયોગ કરે છે.

વાઈરલ ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શનનો સિદ્ધાંત એ છે કે સેલ લાયસેટ દ્વારા વાયરલ આરએનએનો પર્દાફાશ કરવો અને પછી તપાસ માટે રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન-પોલિમરેઝ ચેઈન રિએક્શન (RT-PCR) નો ઉપયોગ કરવો.

ડિટેક્શન સિદ્ધાંતની ચાવી એ ન્યુક્લીક એસિડ સિક્વન્સનું "લક્ષિત મેચિંગ" હાંસલ કરવા માટે પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ્સનો ઉપયોગ કરવાનો છે, એટલે કે, SARS-CoV-2 નો ન્યુક્લીક એસિડ ક્રમ શોધવા માટે જે લગભગ 30,000 પાયામાં અન્ય વાયરસથી અલગ છે (અન્ય વાયરસ સાથે ન્યુક્લીક એસિડની સમાનતા), "પ્રાઈમ એરિયા" અને પ્રોબ ડિઝાઇન.

પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ્સ SARS-CoV-2 ન્યુક્લિક એસિડના ચોક્કસ ક્ષેત્ર સાથે ખૂબ જ મેળ ખાય છે, એટલે કે, વિશિષ્ટતા ખૂબ જ મજબૂત છે.એકવાર પરીક્ષણ કરવાના નમૂનાનું રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR એમ્પ્લીફિકેશન પરિણામ સકારાત્મક આવે, તે સાબિત કરે છે કે નમૂનામાં SARS-CoV-2 હાજર છે.P2 જુઓ.

SARS-CoV-2 ન્યુક્લિક એસિડ નિર્ધારણના P2 પગલાં (રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR)

SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડની તપાસ માટે પ્રયોગશાળાની શરતો અને જરૂરિયાતો

ન્યુક્લિક એસિડ પરીક્ષણ પ્રયોગશાળાઓ નકારાત્મક દબાણ વાતાવરણ માટે સૌથી આદર્શ છે, અને તેઓએ દબાણની દેખરેખ પર ધ્યાન આપવું જોઈએ, હવાને વહેતી રાખવી જોઈએ અને એરોસોલ્સને દૂર કરવી જોઈએ.ન્યુક્લીક એસિડ પરીક્ષણ કર્મચારીઓને અનુરૂપ લાયકાત હોવી જોઈએ, સંબંધિત પોલિમરેઝ ચેઈન રિએક્શન તાલીમ મેળવવી જોઈએ અને મૂલ્યાંકન પાસ કરવું જોઈએ.લેબોરેટરીનું કડક સંચાલન કરવું જોઈએ, તે જગ્યાએ ઝોન કરવું જોઈએ અને અપ્રસ્તુત કર્મચારીઓને પ્રવેશવાની સખત પ્રતિબંધ છે.સ્વચ્છ વિસ્તાર વેન્ટિલેટેડ અને જગ્યાએ જંતુમુક્ત હોવો જોઈએ.સંબંધિત વસ્તુઓને ઝોનમાં મૂકવામાં આવે છે, સ્વચ્છ અને ગંદાને અલગ કરવામાં આવે છે, સમયસર બદલવામાં આવે છે અને તે જગ્યાએ ડિકોન્ટમિનેટ કરવામાં આવે છે.નિયમિત જીવાણુ નાશકક્રિયા: મોટા વિસ્તારો માટે ક્લોરીન ધરાવતું જંતુનાશક મુખ્ય ઉકેલ છે અને નાના વિસ્તારો માટે 75% આલ્કોહોલનો ઉપયોગ કરી શકાય છે.એરોસોલ્સ સાથે વ્યવહાર કરવાનો એક સારો માર્ગ એ છે કે વેન્ટિલેશન માટે બારીઓ ખોલવી, અને અલ્ટ્રાવાયોલેટ કિરણો, ગાળણક્રિયા અને હવાના જીવાણુ નાશકક્રિયા દ્વારા હવાના જીવાણુ નાશકક્રિયા પણ કરી શકાય છે.

SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ નિર્ધારણની મુખ્ય લિંક્સ અને પરિમાણો (રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR)

જો કે પ્રયોગશાળાઓ સામાન્ય રીતે ન્યુક્લીક એસિડ "શોધ" પર ખૂબ ધ્યાન આપે છે, હકીકતમાં, ન્યુક્લીક એસિડ "નિષ્કર્ષણ" એ પણ સફળ શોધ માટેના મુખ્ય પગલાઓમાંનું એક છે, જે વાયરસના નમૂનાઓના સંગ્રહ અને સંગ્રહ સાથે નજીકથી સંબંધિત છે.

હાલમાં, સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતા શ્વસન નમૂનાઓ, જેમ કે નાસોફેરિંજિયલ સ્વેબ, બીજી પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરે છે, જે ન્યુક્લીક એસિડ નિષ્કર્ષણ અને લિસિસ સોલ્યુશન પર આધારિત નિષ્ક્રિયકરણ (સંરક્ષણ) ઉકેલ છે.એક તરફ, આ વાઇરસ પ્રિઝર્વેશન સોલ્યુશન વાઇરસના પ્રોટીનને ડિનેચર કરી શકે છે, તેની પ્રવૃત્તિ ગુમાવી શકે છે અને હવે ચેપી બની શકશે નહીં, અને પરિવહન અને તપાસના તબક્કાની સલામતીમાં સુધારો કરી શકે છે;બીજી બાજુ, તે ન્યુક્લીક એસિડને મુક્ત કરવા, ન્યુક્લીક એસિડ વિઘટન કરનાર એન્ઝાઇમને દૂર કરવા અને વાયરસને અટકાવવા માટે વાયરસને સીધો ક્રેક કરી શકે છે.આરએનએ અધોગતિ પામે છે.

ન્યુક્લીક એસિડ નિષ્કર્ષણ લિસિસ સોલ્યુશનના આધારે તૈયાર કરાયેલ વાઈરસ સેમ્પલિંગ સોલ્યુશન.મુખ્ય ઘટકો છે સંતુલિત ક્ષાર, ઇથિલેનેડિયામિનેટેટ્રાએસેટિક એસિડ ચેલેટીંગ એજન્ટ, ગુઆનીડીન મીઠું (ગુઆનીડીન આઇસોથિયોસાયનેટ, ગુઆનીડીન હાઇડ્રોક્લોરાઇડ, વગેરે), એનિઓનિક સર્ફેક્ટન્ટ (ડોડેકેન) સોડિયમ સલ્ફેટ), કેશનિક સર્ફેક્ટન્ટ (ટેટ્રાડેસીલ ટ્રાઇમેથોલૉક્સીલાઈન, એમેથિઓલૉક્સીલાઈન-8) reitol, proteinase K અને અન્ય કેટલાક અથવા વધુ ઘટકો.હાલમાં, ન્યુક્લીક એસિડ નિષ્કર્ષણ કીટના ઘણા પ્રકારો છે, અને વિવિધ ન્યુક્લીક એસિડ નિષ્કર્ષણ અને શુદ્ધિકરણ રીએજન્ટ્સનો ઉપયોગ થાય છે.જો સમાન ન્યુક્લીક એસિડ નિષ્કર્ષણ અને શુદ્ધિકરણ રીએજન્ટનો ઉપયોગ કરવામાં આવે તો પણ, દરેક કીટની નિષ્કર્ષણ પ્રક્રિયાઓ અલગ છે.

હાલમાં, નેશનલ મેડિકલ પ્રોડક્ટ્સ એડમિનિસ્ટ્રેશન દ્વારા મંજૂર કરાયેલ ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શન કીટ ઉત્પાદનોની પસંદગી SARS-CoV-2 જીનોમમાં ORF1ab, E અને N જનીનોના આધારે કરવામાં આવે છે.વિવિધ ઉત્પાદનોના શોધ સિદ્ધાંતો મૂળભૂત રીતે સમાન હોય છે, પરંતુ તેમના પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ ડિઝાઇન અલગ અલગ હોય છે.સિંગલ-ટાર્ગેટ સેગમેન્ટ્સ (ORF1ab), ડ્યુઅલ-ટાર્ગેટ સેગમેન્ટ્સ (ORF1ab, N અથવા E), અને ત્રણ-લક્ષ્ય સેગમેન્ટ્સ (ORF1ab, N અને E) છે.શોધ અને અર્થઘટન, ન્યુક્લીક એસિડ નિષ્કર્ષણ અને રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ વચ્ચેનો તફાવત સંબંધિત કીટ સૂચનાઓનો સંદર્ભ લેવો જોઈએ, અને તે ભલામણ કરવામાં આવે છે કે વપરાશકર્તાઓ અર્થઘટન માટે કીટની સૂચનાઓમાં ઉલ્લેખિત અર્થઘટન પદ્ધતિનું સખતપણે પાલન કરે.રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR દ્વારા વિસ્તૃત સામાન્ય પ્રદેશો, પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ સિક્વન્સ P3 માં બતાવવામાં આવ્યા છે.

P3 જીનોમ પર SARS-CoV-2 એમ્પ્લિકન લક્ષ્યનું સ્થાન અને પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ્સનો ક્રમ

SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ નિર્ધારણના પરિણામોનું અર્થઘટન (Real-Time ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR)

"સાર્સ-કોવ-2 ચેપ માટે ન્યુમોનિયા નિવારણ અને નિયંત્રણ યોજના (બીજી આવૃત્તિ)" એ પ્રથમ વખત સિંગલ જીન એમ્પ્લીફિકેશનના પરિણામોને નક્કી કરવા માટેના માપદંડોને સ્પષ્ટ કર્યા છે:

1. કોઈ Ct અથવા Ct≥40 નકારાત્મક નથી;

2. Ct<37 હકારાત્મક છે;

3. 37-40 નું Ct મૂલ્ય એ ગ્રે-સ્કેલ વિસ્તાર છે.પ્રયોગને પુનરાવર્તિત કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.જો Ct<40 ને ફરીથી કરવાનું પરિણામ અને એમ્પ્લીફિકેશન કર્વ સ્પષ્ટ શિખરો ધરાવે છે, તો નમૂનાને હકારાત્મક ગણવામાં આવે છે, અન્યથા તે નકારાત્મક છે."

માર્ગદર્શિકાની ત્રીજી આવૃત્તિ અને માર્ગદર્શિકાની ચોથી આવૃત્તિએ ઉપરોક્ત માપદંડો ચાલુ રાખ્યા.જો કે, વાણિજ્યિક કીટમાં ઉપયોગમાં લેવાતા વિવિધ લક્ષ્યોને લીધે, માર્ગદર્શિકાની ઉપરોક્ત 3જી આવૃત્તિએ નિર્માતા દ્વારા પૂરી પાડવામાં આવેલ સૂચનાઓ પ્રચલિત રહેશે તેના પર ભાર મૂકતા, લક્ષ્યોના સંયોજનને નિર્ધારિત કરવા માટેના માપદંડો આપ્યા નથી.માર્ગદર્શિકાની પાંચમી આવૃત્તિથી શરૂ કરીને, બે લક્ષ્યોને સ્પષ્ટ કરવામાં આવ્યા છે, ખાસ કરીને એક લક્ષ્ય માટેના નિર્ણયના માપદંડ કે જેનો નિર્ણય કરવો મુશ્કેલ છે.એટલે કે, જો પ્રયોગશાળા એ પુષ્ટિ કરવા માંગે છે કે SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ શોધ માટે કેસ પોઝિટિવ છે, તો નીચેની 2 શરતોમાંથી 1 પૂરી કરવી જરૂરી છે:

(1) એક જ નમૂનામાં SARS-CoV-2 (ORF1ab, N) ના બે લક્ષ્યો રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR દ્વારા સકારાત્મક પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યા છે.જો એક જ લક્ષ્ય હકારાત્મક હોય, તો ફરીથી નમૂના લેવા અને ફરીથી પરીક્ષણ જરૂરી છે.જો પરીક્ષણ પરિણામો છે જો એકલ લક્ષ્ય હજુ પણ હકારાત્મક છે, તો તેને હકારાત્મક ગણવામાં આવે છે.

(2) રીઅલ-ટાઇમ ફ્લોરોસન્ટ RT-PCR ના બે નમૂનાઓ એક જ સમયે એક જ લક્ષ્ય હકારાત્મક દર્શાવે છે અથવા સમાન પ્રકારનાં બે નમૂનાઓ એક જ લક્ષ્ય હકારાત્મક પરીક્ષણ પરિણામ દર્શાવે છે, જે હકારાત્મક તરીકે નક્કી કરી શકાય છે.જો કે, માર્ગદર્શિકા એ પણ ભાર મૂકે છે કે ન્યુક્લીક એસિડ પરીક્ષણના નકારાત્મક પરિણામો SARS-CoV-2 ચેપને બાકાત રાખી શકતા નથી.ખોટા નકારાત્મક કારણ બની શકે તેવા પરિબળોને બાકાત રાખવાની જરૂર છે, જેમાં નબળા નમૂનાની ગુણવત્તા (ઓરોફેરિન્ક્સ અને અન્ય ભાગોમાંથી શ્વસનના નમૂનાઓ), નમૂનાનો સંગ્રહ ખૂબ વહેલો અથવા ખૂબ મોડો, નમૂનાઓનો સંગ્રહ, પરિવહન અને યોગ્ય રીતે પ્રક્રિયા કરવામાં આવી ન હતી, અને ટેક્નોલોજીમાં જ સમસ્યાઓ હતી (વાયરસ વિવિધતા, PCR અવરોધ), વગેરે.

SARS-CoV-2 શોધમાં ખોટા નકારાત્મક કારણો

ન્યુક્લીક એસિડ પરીક્ષણમાં "ખોટા નકારાત્મક" ની વિભાવના જે હાલમાં ચિંતિત છે, તે ઘણીવાર "ખોટા નકારાત્મક" નો સંદર્ભ આપે છે જેમાં ન્યુક્લીક એસિડ પરીક્ષણ પરિણામો ક્લિનિકલ અભિવ્યક્તિઓ સાથે અસંગત હોય છે, એટલે કે, ક્લિનિકલ લક્ષણો અને ઇમેજિંગ પરિણામો COVID-19 માટે ખૂબ જ શંકાસ્પદ હોય છે, પરંતુ ન્યુક્લિક એસિડ પરીક્ષણો હંમેશા "નકારાત્મક" હોય છે.નેશનલ હેલ્થ કમિશનના ક્લિનિકલ લેબોરેટરી સેન્ટરે "ખોટા નેગેટિવ" SARS-CoV-2 ટેસ્ટને સમજાવ્યું.

(1) ચેપગ્રસ્ત વ્યક્તિના કોષોમાં ચોક્કસ માત્રામાં વાયરસ હોય છે.હાલના ડેટા દર્શાવે છે કે શરીરમાં વાયરસથી ચેપ લાગ્યા પછી, વાયરસ નાક અને મોં દ્વારા ગળામાં પ્રવેશ કરે છે, પછી શ્વાસનળી અને શ્વાસનળીમાં, અને પછી એલ્વેલીમાં પહોંચે છે.ચેપગ્રસ્ત વ્યક્તિ સેવનનો સમયગાળો, હળવા લક્ષણો અને પછી ગંભીર લક્ષણોની પ્રક્રિયા અને રોગના વિવિધ તબક્કાઓનો અનુભવ કરશે.અને શરીરના જુદા જુદા ભાગોમાં વાયરસનું પ્રમાણ અલગ-અલગ હોય છે.

કોષોના વાયરલ લોડના સંદર્ભમાં, મૂર્ધન્ય ઉપકલા કોષો (નીચલા શ્વસન માર્ગ)> વાયુમાર્ગ ઉપકલા કોષો (ઉપલા શ્વસન માર્ગ)> ફાઈબ્રોબ્લાસ્ટ્સ, એન્ડોથેલિયલ કોષો અને મેક્રોફેજ વગેરે;નમૂનાના પ્રકારમાંથી, મૂર્ધન્ય લૅવેજ પ્રવાહી (સૌથી ઉત્તમ)>ઊંડી ખાંસી ગળફામાં>નેસોફેરિંજલ સ્વેબ>ઓરોફેરિન્જિયલ સ્વેબ>રક્ત.આ ઉપરાંત, મળમાં પણ વાયરસ શોધી શકાય છે.જો કે, ઓપરેશનની સગવડતા અને દર્દીઓની સ્વીકૃતિને ધ્યાનમાં લેતા, સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતા ક્લિનિકલ સેમ્પલ ઓર્ડરમાં ઓરોફેરિંજલ સ્વેબ>નાસોફેરિન્જિયલ સ્વેબ>બ્રોન્કિયલ લેવેજ ફ્લુઇડ (જટિલ ઓપરેશન) અને ડીપ સ્પુટમ (સામાન્ય રીતે સૂકી ઉધરસ, મેળવવામાં મુશ્કેલ) છે.

તેથી, કેટલાક દર્દીઓના ઓરોફેરિન્ક્સ અથવા નાસોફેરિન્ક્સના કોષોમાં વાયરસનું પ્રમાણ ઓછું અથવા અત્યંત ઓછું હોય છે.જો માત્ર ઓરોફેરિન્ક્સ અથવા નાસોફેરિન્ક્સના નમૂનાઓ પરીક્ષણ માટે લેવામાં આવે છે, તો વાયરલ ન્યુક્લિક એસિડ શોધી શકાશે નહીં.

(2) નમૂનાના સંગ્રહ દરમિયાન કોઈ વાયરસ ધરાવતા કોષો એકત્રિત કરવામાં આવ્યા ન હતા, અથવા વાયરલ ન્યુક્લિક એસિડ અસરકારક રીતે સાચવવામાં આવ્યા ન હતા.

[① અયોગ્ય સંગ્રહ સ્થળ, ઉદાહરણ તરીકે, જ્યારે ઓરોફેરિંજલ સ્વેબ એકત્રિત કરવામાં આવે છે, ત્યારે સંગ્રહની ઊંડાઈ પૂરતી હોતી નથી, એકત્રિત નાસોફેરિન્જિયલ સ્વેબ અનુનાસિક પોલાણમાં ઊંડે સુધી એકત્રિત કરવામાં આવતાં નથી, વગેરે. એકત્રિત કરાયેલા મોટાભાગના કોષો વાયરસ-મુક્ત કોષો હોઈ શકે છે;

②સેમ્પલિંગ સ્વેબનો ઉપયોગ ખોટી રીતે થાય છે.ઉદાહરણ તરીકે, સ્વેબ હેડની સામગ્રી માટે પીઈ ફાઈબર, પોલિએસ્ટર ફાઈબર અને પોલીપ્રોપીલિન ફાઈબર જેવા સિન્થેટીક ફાઈબરની ભલામણ કરવામાં આવે છે.કુદરતી તંતુઓ જેમ કે કપાસનો ઉપયોગ વાસ્તવિક કામગીરીમાં થાય છે (પ્રોટીનનું મજબૂત શોષણ અને ધોવા માટે સરળ નથી) અને નાયલોન રેસા (નબળું પાણી શોષણ, જે અપૂરતા સેમ્પલિંગ વોલ્યુમ તરફ દોરી જાય છે);

③વાયરસ સ્ટોરેજ ટ્યુબનો ખોટો ઉપયોગ, જેમ કે પોલીપ્રોપીલીન અથવા પોલીઈથીલીન પ્લાસ્ટિક સ્ટોરેજ ટ્યુબનો દુરુપયોગ કે જે ન્યુક્લીક એસિડ્સ (DNA/RNA) ને શોષવામાં સરળ હોય છે, પરિણામે સ્ટોરેજ સોલ્યુશનમાં ન્યુક્લીક એસિડની સાંદ્રતામાં ઘટાડો થાય છે.વ્યવહારમાં, વાયરલ ન્યુક્લીક એસિડને સંગ્રહિત કરવા માટે પોલિઇથિલિન-પ્રોપીલિન પોલિમર પ્લાસ્ટિક અને કેટલાક ખાસ સારવારવાળા પોલિપ્રોપીલિન પ્લાસ્ટિકના કન્ટેનરનો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.]

(4) ક્લિનિકલ લેબોરેટરી ઓપરેશન પ્રમાણિત નથી.નમૂનાના પરિવહન અને સંગ્રહની સ્થિતિ, તબીબી પ્રયોગશાળાઓનું પ્રમાણભૂત સંચાલન, પરિણામનું અર્થઘટન અને ગુણવત્તા નિયંત્રણ એ પરીક્ષણ પરિણામોની ચોકસાઈ અને વિશ્વસનીયતાને સુનિશ્ચિત કરવા માટેના મુખ્ય પરિબળો છે.નેશનલ હેલ્થ કમિશનના ક્લિનિકલ લેબોરેટરી સેન્ટર દ્વારા 16-24 માર્ચ, 2020 ના રોજ કરવામાં આવેલા બાહ્ય ગુણવત્તા મૂલ્યાંકનના પરિણામો અનુસાર, માન્ય પરિણામો પ્રાપ્ત કરનાર 844 પ્રયોગશાળાઓમાંથી, 701 (83.1%) લાયક હતી, અને 143 (16.9%) ન હતી.લાયકાત ધરાવતા, એકંદરે પ્રયોગશાળા પરીક્ષણની સ્થિતિ સારી છે, પરંતુ વિવિધ પ્રયોગશાળાઓમાં હજુ પણ કર્મચારીઓની કામગીરીની ક્ષમતા, સિંગલ-લક્ષ્ય હકારાત્મક નમૂના અર્થઘટન ક્ષમતા અને ગુણવત્તા નિયંત્રણમાં તફાવત છે.

SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શનના ખોટા નકારાત્મકને કેવી રીતે ઘટાડવું?

ન્યુક્લીક એસિડ શોધમાં ખોટા નકારાત્મકને ઘટાડવું એ ખોટા નકારાત્મક પેદા કરવાના ચાર પાસાઓમાંથી ઑપ્ટિમાઇઝ થવું જોઈએ.

(1) ચેપગ્રસ્ત વ્યક્તિના કોષોમાં ચોક્કસ માત્રામાં વાયરસ હોય છે.શંકાસ્પદ ચેપગ્રસ્ત વ્યક્તિઓના શરીરના જુદા જુદા ભાગોમાં વાયરસની સાંદ્રતા જુદા જુદા સમયે અલગ અલગ હશે.જો ત્યાં કોઈ ફેરીંક્સ નથી, તો તે શ્વાસનળીના લેવેજ પ્રવાહી અથવા મળમાં હોઈ શકે છે.જો પરીક્ષણ માટે એક જ સમયે અથવા રોગના વિકાસના જુદા જુદા તબક્કામાં બહુવિધ પ્રકારના નમૂનાઓ એકત્રિત કરી શકાય છે, તો ખોટા નકારાત્મક ટાળવામાં મદદ કરશે.

(2) સેમ્પલ કલેક્શન દરમિયાન વાયરસ ધરાવતા કોષો એકત્રિત કરવા જોઈએ.સેમ્પલ કલેક્ટર્સની તાલીમને વધુ મજબૂત કરીને આ સમસ્યાને ઘણી હદ સુધી હલ કરી શકાય છે.

(3) વિશ્વસનીય IVD રીએજન્ટ્સ.રાષ્ટ્રીય સ્તરે રીએજન્ટની તપાસ કામગીરી મૂલ્યાંકન પર સંશોધન હાથ ધરીને, અને હાલની સમસ્યાઓની ચર્ચા કરીને, રીએજન્ટ્સની શોધ કાર્યક્ષમતામાં વધુ સુધારો કરી શકાય છે અને વિશ્લેષણની સંવેદનશીલતા સુધારી શકાય છે.

(4) ક્લિનિકલ લેબોરેટરીઓની પ્રમાણભૂત કામગીરી.પ્રયોગશાળાના કર્મચારીઓની તાલીમને મજબૂત કરીને, પ્રયોગશાળા ગુણવત્તા વ્યવસ્થાપન પ્રણાલીમાં સતત સુધારો કરીને, વાજબી વિભાગોને સુનિશ્ચિત કરીને અને કર્મચારીઓની શોધવાની ક્ષમતામાં સુધારો કરીને, અયોગ્ય પ્રયોગશાળા કામગીરીને કારણે ખોટા નકારાત્મકને ઘટાડી શકાય છે.

સાજા થયેલા અને ડિસ્ચાર્જ થયેલા દર્દીઓમાં SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ ટેસ્ટના પુનઃ પરીક્ષણ પોઝિટિવ આવવાના કારણો

"COVID-19 નિદાન અને સારવાર યોજના (ટ્રાયલ સેવન્થ એડિશન)" સ્પષ્ટપણે જણાવે છે કે COVID-19 દર્દીઓને સાજા થવા અને હોસ્પિટલમાંથી રજા આપવા માટેનો એક માપદંડ એ છે કે સતત બે શ્વસન માર્ગના નમૂનાઓમાં ન્યુક્લીક એસિડ ટેસ્ટ નેગેટિવ હોય છે (ઓછામાં ઓછા 24 કલાકના અંતરે), પરંતુ ત્યાં ઘણા ઓછા SA-V-SV-એસસીડ પોઝિટિવ દર્દીઓમાં ફરીથી કોવિડ-19 ની તપાસ કરવામાં આવી હતી. કારણો

(1)SARS-CoV-2 એક નવો વાયરસ છે.તેની પેથોજેનિક મિકેનિઝમ, રોગનું સંપૂર્ણ ચિત્ર અને રોગના કોર્સની લાક્ષણિકતાઓને વધુ સમજવું જરૂરી છે.તેથી, એક તરફ, રજા આપવામાં આવેલા દર્દીઓના સંચાલનને મજબૂત બનાવવું અને 14-દિવસનું તબીબી નિરીક્ષણ કરવું જરૂરી છે.રોગની ઘટના, વિકાસ અને પરિણામની સમગ્ર પ્રક્રિયાની સમજને વધુ ઊંડી બનાવવા માટે ફોલો-અપ, આરોગ્ય દેખરેખ અને આરોગ્ય માર્ગદર્શન હાથ ધરો.

(2) દર્દી ફરીથી વાયરસથી સંક્રમિત થઈ શકે છે.એકેડેમિશિયન ઝોંગ નાનશને કહ્યું: કારણ કે સાજા થયેલા દર્દીઓમાં એન્ટિબોડીઝ હોય છે, જ્યારે તેઓ ફરીથી આક્રમણ કરે છે ત્યારે SARS-CoV-2 એન્ટિબોડીઝ દ્વારા દૂર કરી શકાય છે.ઘણા કારણો છે, જે સાજા થયેલા દર્દીનું કારણ હોઈ શકે છે, અથવા તે વાયરસના પરિવર્તન સાથે સંબંધિત હોઈ શકે છે, અથવા પ્રયોગશાળા પરીક્ષણનું કારણ પણ હોઈ શકે છે.જો તે પોતે વાયરસ છે, તો SARS-CoV-2 મ્યુટેશનને કારણે સાજા થયેલા દર્દી દ્વારા ઉત્પાદિત એન્ટિબોડી પરિવર્તિત વાયરસ સામે બિનઅસરકારક બની શકે છે.જો દર્દી ફરીથી પરિવર્તિત વાયરસથી ચેપ લાગ્યો હોય, તો ન્યુક્લીક એસિડ ટેસ્ટ ફરીથી હકારાત્મક હોઈ શકે છે.

(3)જ્યાં સુધી પ્રયોગશાળા પરીક્ષણ પદ્ધતિઓનો સંબંધ છે, દરેક પરીક્ષણ પદ્ધતિની તેની મર્યાદાઓ છે.SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડની તપાસ જનીન ક્રમની પસંદગી, રીએજન્ટની રચના, પદ્ધતિની સંવેદનશીલતા અને અન્ય કારણોને કારણે થાય છે, જેના કારણે હાલની કીટની પોતાની ઓછી તપાસ મર્યાદા હોય છે.દર્દીની સારવાર કર્યા પછી, શરીરમાં વાયરસ ઘટે છે.જ્યારે પરીક્ષણ કરવાના નમૂનામાં વાયરલ લોડ તપાસની નીચલી મર્યાદાથી નીચે હોય, ત્યારે "નકારાત્મક" પરિણામ દેખાશે.જો કે, આ પરિણામનો અર્થ એ નથી કે શરીરમાં વાયરસ સંપૂર્ણપણે અદૃશ્ય થઈ ગયો છે.સારવાર બંધ થયા પછી વાયરસ હોઈ શકે છે.પુનરુત્થાન”, નકલ કરવાનું ચાલુ રાખો.તેથી, ડિસ્ચાર્જ પછી 2 થી 4 અઠવાડિયાની અંદર અઠવાડિયામાં એકવાર સમીક્ષા કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.

(4) ન્યુક્લીક એસિડ એ વાયરસની આનુવંશિક સામગ્રી છે.દર્દીએ એન્ટિવાયરલ સારવાર કરાવ્યા પછી વાયરસ માર્યો જાય છે, પરંતુ બાકીના વાયરલ આરએનએ ટુકડાઓ હજુ પણ માનવ શરીરમાં જળવાઈ રહે છે, અને શરીરમાંથી સંપૂર્ણપણે વિસર્જિત થતા નથી.કેટલીકવાર, ચોક્કસ સંજોગોમાં, તેને વધુ જાળવી શકાય છે.લાંબો સમય, અને આ સમયે ન્યુક્લિક એસિડ પરીક્ષણ "ક્ષણિક" હકારાત્મક હશે.દર્દીના પુનઃપ્રાપ્તિ સમયના વિસ્તરણ સાથે, શરીરમાં શેષ આરએનએ ટુકડાઓ ધીમે ધીમે ખતમ થઈ જાય પછી, ન્યુક્લિક એસિડ પરીક્ષણ પરિણામ નકારાત્મક થઈ શકે છે.

(5) SARS-CoV-2 નું ન્યુક્લિક એસિડ પરીક્ષણ પરિણામ માત્ર વાયરલ આરએનએની હાજરી અથવા ગેરહાજરી સાબિત કરે છે, અને વાયરસની પ્રવૃત્તિ અને વાયરસ સંક્રમિત છે કે કેમ તે સાબિત કરી શકતું નથી.તે સાબિત કરવું જરૂરી છે કે જે દર્દીનો ન્યુક્લીક એસિડ ટેસ્ટ ફરીથી પોઝિટિવ આવ્યો છે તે ફરીથી ચેપનો સ્ત્રોત બનશે કે કેમ.તે ચેપી છે તે સાબિત કરવા માટે ક્લિનિકલ નમૂનાઓ પર વાયરસ સંસ્કૃતિ હાથ ધરવા અને "જીવંત" વાયરસની ખેતી કરવી જરૂરી છે.

સારાંશ

સારાંશમાં, SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ પરીક્ષણ ખોટા નકારાત્મક, પુનઃ પરીક્ષણ હકારાત્મક અને અન્ય સ્થિતિઓ જે ક્લિનિકલ અભિવ્યક્તિઓ સાથે અસંગત છે તેને સંપૂર્ણપણે ટાળી શકાતી નથી.વાસ્તવિક તપાસ અને પરીક્ષણમાં, ચૂકી ગયેલ નિદાન અને ખોટા નિદાનને રોકવા માટે વ્યાપક નિદાન માટે ક્લિનિકલ લક્ષણો, ઇમેજિંગ પરીક્ષાઓ (CT) અને પ્રયોગો પ્રયોગશાળા પરીક્ષણ (ન્યુક્લીક એસિડ ટેસ્ટ + વાયરસ-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડી પરીક્ષણ) પરિણામોને જોડવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.જો પરીક્ષણના પરિણામો સ્પષ્ટપણે ક્લિનિકલ અભિવ્યક્તિઓ સાથે અસંગત હોવાનું જણાય છે, તો SARS-CoV-2 વાયરસના પ્રારંભિક ચેપ, પુનરાવર્તિત ચેપ અથવા અન્ય શ્વસન વાયરસ ચેપ, વગેરે સાથે સંયોજિત થવા માટે સંપૂર્ણ પરીક્ષણ લિંક (નમૂના સંગ્રહ, પરિભ્રમણ અને પ્રક્રિયા લિંક્સ) નું વ્યાપક વિશ્લેષણ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.જો શરતો પરવાનગી આપે છે, તો પુનઃપરીક્ષણ માટે વધુ સંવેદનશીલ નમૂનાઓ જેમ કે સ્પુટમ અથવા મૂર્ધન્ય લેવેજ પ્રવાહી એકત્રિત કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.

સંબંધિત વસ્તુઓ:

SARS-CoV-2 ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શન કીટ (મલ્ટીપ્લેક્સ પીસીઆર ફ્લોરોસન્ટ પ્રોબ મેથડ)

પોસ્ટનો સમય: સપ્ટેમ્બર-03-2021