પરિચય:

આરએનએ, વૈજ્ઞાનિક નામ રિબોન્યુક્લીક એસિડ, તેનું સંક્ષિપ્ત નામ રિબોન્યુક્લીક એસિડ પરથી આવે છે, ફોસ્ફોડીસ્ટર બોન્ડ્સ દ્વારા ઓછામાં ઓછા ડઝનેક રિબોન્યુક્લિયોટાઇડ્સને જોડીને રચાયેલ ન્યુક્લીક એસિડનો એક પ્રકાર છે.

આરએનએની શોધખોળનો આધાર પ્રદૂષણ-મુક્ત કુલ આરએનએ કાઢવાનો છે, અને આરએનએ નિષ્કર્ષણના મૂળ સિદ્ધાંતને નીચે પ્રમાણે સારાંશ આપી શકાય છે:

1. પ્રથમ કોષોને વિક્ષેપિત કરો

2. પછી મેક્રોમોલેક્યુલર અશુદ્ધિઓ (પ્રોટીન, લિપિડ્સ, ડીએનએ, વગેરે) દૂર કરો.

3. અંતે, ક્ષાર અને કાર્બનિક દ્રાવકોને દૂર કરતી વખતે અને આરએનએને વધુ શુદ્ધ કરતી વખતે આરએનએ અવક્ષેપિત થાય છે.

નિષ્કર્ષણ પદ્ધતિનો ભૂતકાળ અને વર્તમાન

આરએનએ નિષ્કર્ષણ પદ્ધતિની પ્રથમ પેઢી TRIzol પ્રક્ષેપણ પદ્ધતિ છે (વપરાતા રીએજન્ટ્સમાં ગુઆનીડીન આઇસોથિયોસાયનેટ, ફિનોલ, ક્લોરોફોર્મ, વગેરેનો સમાવેશ થાય છે.) પિઓટર ચોમ્સિન્સ્કી અને દાદી નિકોલેટા સાચી નામના દાદા દ્વારા શોધાયેલ છે, કારણ કે આ શોધ આરએનએ નિષ્કર્ષણની મંજૂરી આપે છે ત્યારથી આરએનએ સંશોધન ઝડપી અને સરળ શરૂ થયું.

પાછળથી, દાદાએ આ પેટન્ટ ઇન્વિટ્રોજનને વેચી દીધી, અને ઇન્વિટ્રોજેને આ પદ્ધતિને વિશ્વમાં પ્રમોટ કરી અને વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાતી પદ્ધતિ બની.

પાછળથી, ઇન્વિટ્રોજન થર્મો દ્વારા હસ્તગત કરવામાં આવ્યું હતું!

પ્રતિનિધિ ઉત્પાદન: ઇન્વિટ્રોજનનું TRIzol રીએજન્ટ

જો કે, TRIzol વરસાદની પદ્ધતિમાં બહુવિધ વરસાદ અને RNA ના નિષ્કર્ષણની જરૂર પડે છે, અને ઉપયોગમાં લેવાતા રીએજન્ટ ઝેરી હોય છે અને તેને ચલાવવામાં લાંબો સમય લાગે છે.

તેથી, બીજી પેઢીના કૉલમ-એન્ઝાઇમ શુદ્ધિકરણ પદ્ધતિ અસ્તિત્વમાં આવી, જેમાં અન્ય અશુદ્ધિઓ દૂર કરતી વખતે નમૂનામાં આરએનએની પુનઃપ્રાપ્તિને મહત્તમ કરવા માટે ચોક્કસ ન્યુક્લિક એસિડ શોષણ સામગ્રી તરીકે સિલિકા જેલ મેમ્બ્રેનનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો.

બીજી પેઢીની પદ્ધતિ સ્થિર કામગીરીના આધારે ઓપરેશનને સરળ બનાવે છે, જોખમનું પરિબળ ઘટાડે છે અને RNA નિષ્કર્ષણની કાર્યક્ષમતામાં સુધારો કરે છે.

પ્રતિનિધિ ઉત્પાદનો: QIAGEN RNeasy અને મોટાભાગના સ્થાનિક ઉત્પાદનો

જો કે, પ્રથમ અને બીજી પેઢીની બંને પદ્ધતિઓમાં DNA દૂષણને દૂર કરવા માટે DNase નો ઉપયોગ જરૂરી છે, જે અનુગામી ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોમાં કેટલીક અસુવિધા લાવે છે.શેષ DNase રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્શનની કાર્યક્ષમતા ઘટાડશે અને ફર્સ્ટ-સ્ટ્રૅન્ડ cDNA સંશ્લેષણમાં ઘટાડો કરશે, જેનાથી પરિણામોની ચોકસાઈને અસર થશે.

તેથી, ત્રીજી પેઢીના નિષ્કર્ષણ પદ્ધતિને બીજી પેઢીના આધારે ઑપ્ટિમાઇઝ કરવામાં આવે છે.પ્રયોગમાં કોઈપણ ઉત્સેચકો ઉમેરવાની જરૂર નથી, અને આરએનએ ફક્ત બે કૉલમ સાથે સરળતાથી મેળવી શકાય છે.

કૉલમ 1: ડીએનએ સાફ કરવા માટે DNA-સફાઈ કૉલમ

કૉલમ 2: RNA-માત્ર કૉલમ ખાસ કરીને RNAને શોષી લે છે અને પુનઃપ્રાપ્ત કરે છે

આવા સરળ ઓપરેશન માત્ર સમય બચાવે છે, પરંતુ ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોના સંચાલનને પણ સરળ બનાવે છે!

પ્રતિનિધિ ઉત્પાદનો: QIAGEN RNeasy Plus અનેફોરજીનઆરએનએ શુદ્ધિકરણ શ્રેણી ઉત્પાદનો

(RNeasy Plus)

(ફોરજીનનુંપ્લાન્ટ ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કીટ)

તમને શાંતિથી કહું!ફોરજીનની આરએનએ કીટ પણ વાપરવા માટે ખૂબ જ સરળ RNase ઇરેઝર રજૂ કરે છે, જે માનવ શરીરમાં કોઈપણ ઝેરી પદાર્થો ઉમેર્યા વિના 1 મિનિટમાં ઘન સપાટી પરના 400μg RNaseને સંપૂર્ણપણે દૂર કરી શકે છે!

તસવીર1: ઓપરેશનલ પ્રક્રિયા સરખામણી ચાર્ટ

ફોરજીનનાં ઉત્પાદનો ફક્ત બે ગીતોમાં આરએનએ નિષ્કર્ષણ પૂર્ણ કરી શકે છે, તમારા પ્રયોગની પ્રગતિથી અન્ય લોકોને ઈર્ષ્યા ન કરો!

તસવીર2:Eપ્રયોગાત્મક પરિણામો સરખામણી ચાર્ટ

પ્રથમ પેઢી (1: TRIzol)

બીજી પેઢી (2: RNeasy of QIAGEN)

ત્રીજી પેઢી (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

તસવીર3: qPCR ગ્રાફ (એમ્પ્લીફિકેશન કર્વ ગ્રાફ)

પ્રથમ પેઢી (લીલો એટલે TRIzol -, લાલ એટલે TRIzol +)

બીજી જનરેશન (આકાશ વાદળી એટલે કિયાજેન આરનેસી-, લાલ એટલે કિયાજેન આરનેસી +)

ત્રીજી પેઢી (વાદળી એટલે QIAGEN RNeasy પ્લસ, લીલો એટલે ફોરજીન)

(નોંધ: qPCR ગ્રાફ “-” સૂચવે છે કે DNase ઉમેરવામાં આવ્યું નથી અને DNA દૂષણ દૂર કરવામાં આવ્યું નથી. તેથી, CT વધારે છે અને પરિણામ સચોટ નથી; “+” સૂચવે છે કે DNase ઉમેરવામાં આવ્યું છે અને DNA દૂષણ દૂર કરવામાં આવ્યું છે, પરિણામ સચોટ છે)

દરેક તકનીકી અપગ્રેડનો અર્થ એ છે કે પ્રયોગનું સંચાલન સરળ અને વધુ વપરાશકર્તા-મૈત્રીપૂર્ણ દિશામાં વિકાસ કરી રહ્યું છે.

ફોરજીનનો હેતુ વધુ વૈજ્ઞાનિક સંશોધકોને પ્રાયોગિક સમય અને ખર્ચ બચાવવા, ઉચ્ચ-ગુણવત્તાના પ્રાયોગિક પરિણામો મેળવવા અને સંયુક્ત રીતે વધુ મૂલ્યવાન વૈજ્ઞાનિક સંશોધન સિદ્ધિઓ બનાવવામાં મદદ કરવાનો છે.