માં સંભવિત સમસ્યાઓનું નીચેનું વિશ્લેષણબકલસ્વેબ/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

શુદ્ધિકરણ સ્તંભ ભરાયેલું છે

આ કીટમાં, જીનોમિક DNA નિષ્કર્ષણ કામગીરીમાં, શુદ્ધિકરણ સ્તંભ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન સ્ટેપ વિના સેમ્પલ એન્ઝાઈમેટિક લિસિસ મિશ્રણ પર સીધું શોષાય છે, અને અપૂર્ણ એન્ઝાઈમાઈઝેશન અને નમૂનાની ઉચ્ચ સ્નિગ્ધતાને કારણે શુદ્ધિકરણ કોલમ અવરોધિત થઈ શકે છે.

નીચેના સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.

1. પેશીઓના નમૂનાઓની અપૂર્ણ એન્ઝાઇમેટિક પાચન.

ભલામણ: ફોરજીન પ્રોટીઝના નમૂનાની પ્રક્રિયાનો સમય યોગ્ય રીતે વધારી શકાય છે અથવા 12,000 rpm (~13,400) પર સેન્ટ્રીફ્યુગેશન પછી સુપરનેટન્ટ લઈ શકાય છે.× g) 5 મિનિટ માટે.

2. પેશીના નમૂનાઓ અથવા મોટા પેશીઓનો વધુ પડતો ઉપયોગ.

ભલામણ: 1 થી વધુ ન હોવું શ્રેષ્ઠ છેબકલ નમૂનામાં સ્વેબ;જો નમૂના ખૂબ મોટો હોય, તો તે મુજબ બફર ST1, ફોરજીન પ્રોટીઝ, બફર ST2 ની માત્રા વધારવી.

3. નમૂનાની સ્નિગ્ધતા ખૂબ ઊંચી છે.

ભલામણ: જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ પહેલાં નમૂનાઓને ટ્રિસ-એચસીએલના 10 એમએમ સાથે યોગ્ય રીતે પાતળું કરી શકાય છે.

4. બ્લડ કાર્ડના ટુકડા ચૂસવામાં આવ્યા છે.

ભલામણ: બ્લડ સ્પોટ (FTA કાર્ડ) જીનોમિક નિષ્કર્ષણના સ્ટેપ 6 નો ક્ષણિક સેન્ટ્રીફ્યુગેશન સમય યોગ્ય રીતે વધારી શકાય છે.

ઓછી ઉપજ અથવા ડીએનએ નથી

ઘણીવાર વિવિધ પરિબળો હોય છે જે જીનોમિક ડીએનએ ઉપજને અસર કરે છે, જેમાં નમૂનાની ઉત્પત્તિ, નમૂના સંગ્રહની સ્થિતિ, નમૂનાની તૈયારી, મેનીપ્યુલેશન વગેરેનો સમાવેશ થાય છે.

નિષ્કર્ષણ દરમિયાન જીનોમિક ડીએનએ મેળવી શકાતું નથી

સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.

1. નમૂનાઓની અયોગ્ય જાળવણી અથવા ખૂબ લાંબા સમય સુધી સંગ્રહ જીનોમિક DNA અધોગતિ તરફ દોરી જાય છે.

ભલામણ: ઓરલ સ્વેબ્સ પ્રાધાન્યમાં તાજા નમૂના લેવા જોઈએ, અને જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ કામગીરી માટે સાચવેલ સ્વેબનો ઉપયોગ કરવાની સલાહ આપવામાં આવતી નથી;બ્લડ સ્પોટ સેમ્પલ એ સુનિશ્ચિત કરવું જોઈએ કે ગુણવત્તા લાયક છે અને સંગ્રહ સમય ખૂબ લાંબો ન હોવો જોઈએ.

2. ટીશ્યુનો ખૂબ ઓછો ઉપયોગ અનુરૂપ જીનોમિક ડીએનએના નિષ્કર્ષણમાં પરિણમી શકે છે.

ભલામણ: અનુસરોબુકાl ઓપરેશન માર્ગદર્શિકામાં સ્વેબ સેમ્પલિંગ સૂચનાઓ, અને શક્ય તેટલી વાર સાફ કરો જેથી જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ માટે મૌખિક સ્વેબ સાથે પૂરતા કોષો જોડી શકાય;બ્લડ સ્પોટ સેમ્પલ નિષ્કર્ષણ માટે, બ્લડ સ્પોટ કટીંગ એરિયા યોગ્ય રીતે વધારી શકાય છે.

3. ફોરજીન પ્રોટીઝ અયોગ્ય રીતે સચવાય છે, પરિણામે તેની પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો અથવા નિષ્ક્રિયતા આવે છે.

ભલામણ: ની સ્ટોરેજ શરતોની પુષ્ટિ કરોએફઓરેજીન પ્રોટીઝ અથવા એન્ઝાઈમેટિક પ્રતિક્રિયા માટે તેને નવા ફોરજીન પ્રોટીઝ સાથે બદલો.

4. કીટની અયોગ્ય જાળવણી અથવા સ્ટોરેજનો સમય ઘણો લાંબો છે, જેના પરિણામે કીટમાંના કેટલાક ઘટકો નિષ્ફળ જાય છે.

ભલામણ: એક નવું ખરીદોબકલ સ્વેબ ડીએનએઆઇસોલેશન સંબંધિત પ્રક્રિયાઓ માટે કીટ.

5. બફર WB સંપૂર્ણ ઇથેનોલ ઉમેરતું નથી.

ભલામણ: પુષ્ટિ કરો કે બફર WB સંપૂર્ણ ઇથેનોલનું યોગ્ય વોલ્યુમ ઉમેરે છે.

6. સિલિકોન ફિલ્મમાં એલ્યુએન્ટ યોગ્ય રીતે ઉમેરવામાં આવતું નથી.

ભલામણ: 65 ઉમેરો°Cપ્રી-ગરમ કરેલ એલ્યુએન્ટ સિલિકોન મેમ્બ્રેનની મધ્યમાં આવે છે અને ઇલ્યુશન કાર્યક્ષમતા વધારવા માટે ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દે છે.

Lજીનોમિક ડીએનએ ઓવ-યીલ્ડ અલગ

નીચેના સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.

1. નમૂનાઓની અયોગ્ય જાળવણી અથવા ખૂબ લાંબા સમય સુધી સંગ્રહ જીનોમિક DNA અધોગતિ તરફ દોરી જાય છે.

ભલામણ: ઓરલ સ્વેબ પ્રાધાન્યમાં તાજા નમૂના લેવામાં આવે છે, અને સાચવેલ સ્વેબનો ઉપયોગ જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ માટે થવો જોઈએ નહીં.

2. જો પેશીના નમૂનાની માત્રા ખૂબ ઓછી હોય, તો કાઢવામાં આવેલ જીનોમિક ડીએનએ સામગ્રી ઓછી હશે.

ભલામણ: ઓપરેટિંગ માર્ગદર્શિકામાં મૌખિક સ્વેબ સેમ્પલિંગ સૂચનાઓને અનુસરો, શક્ય તેટલી વાર સાફ કરો જેથી જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ માટે ઓરલ સ્વેબ સાથે પૂરતા કોષો જોડી શકાય.

3. ફોરજીન પ્રોટીઝ અયોગ્ય રીતે સચવાય છે, પરિણામે તેની પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો અથવા નિષ્ક્રિયતા આવે છે.

ભલામણ: ની સ્ટોરેજ શરતોની પુષ્ટિ કરોthe Fઓરેજીન પ્રોટીઝ અથવા તેને નવી સાથે બદલો એન્ઝાઇમેટિક પ્રતિક્રિયા માટે ફોરજીન પ્રોટીઝ.

4. Eluent સમસ્યાઓ.

ભલામણ: ઇલ્યુશન માટે બફર ઇબીનો ઉપયોગ કરો;જો ddH નો ઉપયોગ કરી રહ્યા હોય₂ઓ અથવા અન્ય એલ્યુએન્ટ્સ, પુષ્ટિ કરો કે એલ્યુએટનું pH 7.0-8.5 ની વચ્ચે છે.

5. એલ્યુએટ યોગ્ય રીતે ડ્રોપવાઇઝ ઉમેરવામાં આવ્યું નથી.

ભલામણ: સિલિકોન મેમ્બ્રેનની મધ્યમાં એલ્યુએન્ટ ટીપાં ઉમેરો અને ઇલ્યુશન કાર્યક્ષમતા વધારવા માટે ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દો.

6. ઇલ્યુશન પ્રવાહી ખૂબ ઓછું એકઠું થાય છે.

ભલામણ: જીનોમિક ડીએનએ ઇલ્યુશન માટે ઓછામાં ઓછા સૂચનોમાં આવશ્યકતા મુજબ ઇલ્યુએન્ટનો ઉપયોગ કરોઓછું નહિ 15 કરતાંμl.

Lઓહ શુદ્ધતા of જીનોમિક ડીએનએઅલગ

ઓછી જીનોમિક ડીએનએ શુદ્ધતા ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોના નિષ્ફળતા અથવા અસંતોષકારક પરિણામો તરફ દોરી શકે છે, જેમ કે: ઉત્સેચકો ખુલ્લા કાપી શકાતા નથી, પીસીઆર રસના જનીન ટુકડાને મેળવી શકતા નથી, વગેરે.

સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.

1. હેટેરોપ્રોટીન પ્રદૂષણ, આરએનએ પ્રદૂષણ.

વિશ્લેષણ: બફર પીડબ્લ્યુનો ઉપયોગ કરીને શુદ્ધિકરણ કૉલમ ધોવાઇ ન હતી;બફર PW વૉશ શુદ્ધિકરણ કૉલમ યોગ્ય કેન્દ્રત્યાગી ગતિનો ઉપયોગ કરીને ધોવાઇ ન હતી.

ભલામણ: ઇથેનોલ ઉમેરતા પહેલા ખાતરી કરો કે સુપરનેટન્ટમાં કોઈ વરસાદ નથી;સૂચનો અનુસાર શુદ્ધિકરણ કૉલમ ધોવાની ખાતરી કરો, અને આ પગલું અવગણી શકાય નહીં.

2. અશુદ્ધતા આયન પ્રદૂષણ.

વિશ્લેષણ: બફર WB વૉશ શુદ્ધિકરણ કૉલમ અવગણવામાં આવી હતી અથવા ફક્ત એક જ વાર ધોવાઇ હતી, પરિણામે શેષ આયનીય દૂષણ થયું હતું.

ભલામણ: શેષ આયનોને શક્ય તેટલું દૂર કરવા માટે બફર WB ને 2 વખત ધોવાનું સુનિશ્ચિત કરો.

3. આરએનએ એન્ઝાઇમ દૂષણ.

વિશ્લેષણ: વિદેશી RNases બફરમાં ઉમેરવામાં આવ્યા હતા;બફર PW વૉશ ઑપરેશન ખોટું હતું, પરિણામે RNase અવશેષો, ડાઉનસ્ટ્રીમ RNA પ્રાયોગિક કામગીરીને અસર કરે છે, જેમ કે ઇન વિટ્રો ટ્રાન્સક્રિપ્શન.

ભલામણ: ફોરજીન શ્રેણી ન્યુક્લીક એસિડisolation કિટ RNase ના વધારાના ઉમેરા વગર RNA ને દૂર કરી શકે છે,આમ બકલ સ્વેબ/એફટીએ કાર્ડ ડીએનએ આઇસોલેશન કીટજરૂર't RNase ઉમેરો;બફર પીડબ્લ્યુ વૉશિંગ પ્યુરિફિકેશન કૉલમ માટેની સૂચનાઓનું પાલન કરવાની ખાતરી કરો, અને આ પગલું અવગણી શકાય નહીં.

4. ઇથેનોલ અવશેષ.

વિશ્લેષણ: બફર WB એ શુદ્ધિકરણ સ્તંભને ધોયા પછી ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કર્યું ન હતું.

ભલામણ: સૂચનાઓ અનુસાર યોગ્ય ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઓપરેશન કરો.

5. અન્ય અશુદ્ધતા પ્રદૂષણ.

પૃથ્થકરણ: સાચવેલા નમૂનાઓ અથવા વિશિષ્ટ નમૂનાઓ પ્રીટ્રેટેડ નથી.

ભલામણ: સૂચના મુજબ નમૂનાને સારી રીતે પ્રીટ્રીટ કરો.