લીડ

લાંબા નોન-કોડિંગ આરએનએ, lncRNA એ 200 ન્યુક્લિયોટાઇડ્સ કરતા વધારે લંબાઈ સાથે નોન-કોડિંગ RNA છે, સામાન્ય રીતે 200-100000 nt ની વચ્ચે.lncRNA એપિજેનેટિક, ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન અને પોસ્ટ-ટ્રાન્સક્રિપ્શનલ સ્તરે જનીન અભિવ્યક્તિનું નિયમન કરે છે, અને X રંગસૂત્ર સાયલન્સિંગ, જીનોમ ઇમ્પ્રિંટિંગ અને ક્રોમેટિન ફેરફાર, ટ્રાન્સક્રિપ્શન સક્રિયકરણ, ટ્રાન્સક્રિપ્શન હસ્તક્ષેપ, પરમાણુ પરિવહન, કોષ ચક્ર નિયમન, સેલ ડિફરન્સિએશન કમ્પેક્શન અને અન્ય મહત્વપૂર્ણ અસરો (સંકલન પ્રક્રિયાઓ) અને અન્ય અસરોને નિયંત્રિત કરે છે. માનવીય રોગોની ઘટના, વિકાસ અને નિવારણ સાથે નજીકથી સંબંધિત છે, અને હાલમાં બાયોમેડિસિન ક્ષેત્રે હોટ સ્પોટ પૈકી એક છે.

01  LncRNA ના પ્રકારો અને લાક્ષણિકતાઓ

ઉપરની આકૃતિમાં બતાવ્યા પ્રમાણે lncRNA તેની રચનાના વિવિધ સ્ત્રોતો અનુસાર ઘણા પ્રકારોમાં વહેંચાયેલું છે.નીચેની લાક્ષણિકતાઓ ધરાવે છે:

1. lncRNAs સામાન્ય રીતે લાંબા હોય છે, ગતિશીલ અભિવ્યક્તિ અને ભિન્નતા દરમિયાન અલગ અલગ વિભાજન પદ્ધતિઓ સાથે
2. કોડિંગ જનીનોની સરખામણીમાં, lncRNA સામાન્ય રીતે નિમ્ન અભિવ્યક્તિ સ્તર ધરાવે છે
3. મોટાભાગના lncRNAsમાં પેશીના ભેદ અને વિકાસની પ્રક્રિયામાં સ્પષ્ટ ટેમ્પોરલ અને અવકાશી અભિવ્યક્તિ વિશિષ્ટતા હોય છે.
4. ગાંઠો અને અન્ય રોગોમાં લાક્ષણિક અભિવ્યક્તિઓ છે
5. lncRNA ના સબસેલ્યુલર સ્થાનો વિવિધ છે
6. ક્રમ સંરક્ષણમાં ઓછો છે, પરંતુ કાર્યમાં સંરક્ષણની ચોક્કસ ડિગ્રી છે, વગેરે.

02 LncRNA રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન વિશે વારંવાર પૂછાતા પ્રશ્નો

કોષોમાં lncRNA ની ઓછી સામગ્રી, લાંબી લંબાઈ અને ઉચ્ચ-સ્તરની રચનાને લીધે, આવા RNAમાં ઘણીવાર સ્ટેમ લૂપ્સ અથવા હેરપીન્સ જેવી જટિલ રચનાઓ હોય છે, અને RT-qPCR અસફળ રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન અથવા ઓછી કાર્યક્ષમતાની સમસ્યાઓનો ભોગ બને છે.

03 LncRNA રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન સોલ્યુશન

કેન્દ્રીય નિયમમાં, આરએનએ વાયરસ તેમના પોતાના રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસનો ઉપયોગ કરીને ડીએનએને ટેમ્પલેટ તરીકે ઉપયોગ કરીને સંશ્લેષણ કરવા માટે પ્રક્રિયાને રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન કહે છે.વિટ્રોમાં સીડીએનએ ટેમ્પલેટનું સંશ્લેષણ કરવા માટે આરએનએ વાયરસ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસનો ઉપયોગ કરવાની પ્રક્રિયાને રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન કહેવામાં આવે છે.રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન સિસ્ટમમાં સમાવિષ્ટ મુખ્ય ઘટકો: આરએનએ ટેમ્પલેટ, રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ, પ્રાઈમર્સ અને અન્ય ઘટકો.

1.RNA ટેમ્પલેટ

રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન પર આરએનએ ટેમ્પલેટનો પ્રભાવ તેની રચના, શુદ્ધતા અને અખંડિતતામાં પ્રતિબિંબિત થાય છે.એક્સટ્રેક્ટેડ આરએનએની શુદ્ધતા અને અખંડિતતા જેટલી વધારે છે, રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્શનની કાર્યક્ષમતા વધારે છે અને અનુગામી જથ્થાત્મક પરિણામો વધુ સચોટ છે.સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતા RNA નિષ્કર્ષણ રીએજન્ટ્સ દ્વારા શુદ્ધ કરાયેલ આરએનએમાં ઘણીવાર આલ્કોહોલ અને ગ્વાનિડિન ક્ષારના અવશેષો હોય છે, જે મોટાભાગના રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેઝ પર મજબૂત અવરોધક અસર ધરાવે છે.

2. રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ

સમગ્ર રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન સિસ્ટમમાં રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્ટેસનો મુખ્ય પ્રભાવ છે.મોટાભાગની પ્રયોગશાળાઓમાં વપરાતા રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ માટે યોગ્ય તાપમાન સામાન્ય રીતે 42°C હોય છે.વાસ્તવમાં, ઉચ્ચ-સ્તરની આરએનએ માળખું ખોલવા માટે ઊંચા તાપમાનની જરૂર પડે છે, અને રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેજની જરૂરિયાતો વધુ હોય છે.

3.પ્રાઈમર

રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન પ્રાઈમર્સમાં જનીન-વિશિષ્ટ પ્રાઇમર્સ, રેન્ડમ પ્રાઇમર્સ અને ઓલિગો ડીટી પ્રાઇમર્સનો સમાવેશ થાય છે.મોટા ભાગના lncRNAs માં પોલીએ પૂંછડીઓ હોતી નથી, અને ઓલિગો ડીટી સાથે રેન્ડમ પ્રાઇમર્સને યોગ્ય રીતે મેચ કરવું મહત્વપૂર્ણ છે.

4.અન્ય ઘટકો

એ હકીકતને ધ્યાનમાં રાખીને કે આરએનએ ખાસ કરીને ડિગ્રેડ કરવા માટે સરળ છે, રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન સિસ્ટમમાં ઘટકોની રજૂઆત ઘટાડી શકાય છે, જે અસરકારક રીતે RNase ના પ્રવેશને અટકાવી શકે છે અને રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શનની સરળ પ્રગતિની ખાતરી કરી શકે છે.

Fઓરેજીનઆરએનએ ટેમ્પલેટમાંથી મેળવે છે, qPCR માં ટ્રાન્સક્રિપ્શન રિવર્સ કરે છે

તમારા lncRNA શોધને વ્યાપકપણે એસ્કોર્ટ કરો

પ્રાણી કુલ RNA Iઉકેલકિટ (gDNA દૂર કરવાના કૉલમ સાથે)

સેલ કુલ RNA Iઉકેલકિટ (gDNA દૂર કરવાના કૉલમ સાથે)

Lnc-RT HeroTM I(gDNase સાથે)(lncRNA થી ફર્સ્ટ-સ્ટ્રૅન્ડ cDNA સંશ્લેષણ માટે સુપર પ્રિમિક્સ)

રીયલ ટાઇમ પીસીઆર ઇઝીટીએમ-એસવાયબીઆર ગ્રીન આઇ

Aફાયદા ofઆરએનએ નિષ્કર્ષણ:

કિટ ત્રીજી પેઢીની RNA નિષ્કર્ષણ તકનીકનો ઉપયોગ કરે છે, DNase નો ઉપયોગ કરવાની જરૂર નથી.

96, 24, 12, અને 6-વેલ પ્લેટ સંસ્કારી કોષોમાંથી 11 મિનિટ, જીડીએનએ-મુક્ત, ઉચ્ચ-શુદ્ધતા, ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા કુલ સેલ આરએનએનું ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતા નિષ્કર્ષણ.

lncRNA રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શનના ફાયદા:

જીનોમિક ડીએનએ દૂષણને ઝડપથી દૂર કરવા માટે LncRNA માટે ખાસ વિકસિત રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન સિસ્ટમ.

રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન સિસ્ટમ ઉચ્ચ થર્મલ સ્થિરતા ધરાવે છે અને હજુ પણ 50 ° સે પર સારી રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન કામગીરી ધરાવે છે.

ઉચ્ચ GC સામગ્રી અને જટિલ ગૌણ માળખું ધરાવતા નમૂનાઓ ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતા સાથે ઉલટાવી શકાય છે.

ફાયદાof qપીસીઆર:

હોટ સ્ટાર્ટ ફોરજીન ટાક પોલિમરેઝમાં ઉચ્ચ એમ્પ્લીફિકેશન કાર્યક્ષમતા, ઉચ્ચ એમ્પ્લીફિકેશન સંવેદનશીલતા અને ઉચ્ચ એમ્પ્લીફિકેશન વિશિષ્ટતા છે

ઑપ્ટિમાઇઝ્ડ રિયલ પીસીઆર ઇઝી મિક્સ SYBR ગ્રીન I ને વધુ તપાસ સંવેદનશીલતા ધરાવે છે, અને તેની ફ્લોરોસેન્સ તીવ્રતા સમાન ઉત્પાદનો કરતા 3-5 ગણી છે, જે વિવિધ પ્રકારના ફ્લોરોસેન્સ જથ્થાત્મક પ્રયોગોની જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરી શકે છે.