એન્ટિબોડીઝ, જેને ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન (Ig) પણ કહેવાય છે, તે ગ્લાયકોપ્રોટીન છે જે ખાસ કરીને એન્ટિજેન્સ સાથે જોડાય છે.
 
પરંપરાગત એન્ટિબોડી તૈયારી પ્રાણીઓને રોગપ્રતિરક્ષા કરીને અને એન્ટિસેરમ એકત્રિત કરીને બનાવવામાં આવે છે.તેથી, એન્ટિસેરમમાં સામાન્ય રીતે સીરમમાં અન્ય અસંબંધિત એન્ટિજેન્સ અને અન્ય પ્રોટીન ઘટકો સામે એન્ટિબોડીઝ હોય છે.સામાન્ય એન્ટિજેન પરમાણુઓ મોટે ભાગે બહુવિધ અલગ-અલગ એપિટોપ્સ ધરાવે છે, તેથી પરંપરાગત એન્ટિબોડીઝ પણ વિવિધ એપિટોપ્સ સામે એન્ટિબોડીઝનું મિશ્રણ છે.સમાન એપિટોપ સામે નિર્દેશિત પરંપરાગત સીરમ એન્ટિબોડીઝ પણ હજુ પણ વિવિધ બી સેલ ક્લોન્સ દ્વારા ઉત્પાદિત વિજાતીય એન્ટિબોડીઝથી બનેલા છે.તેથી, પરંપરાગત સીરમ એન્ટિબોડીઝને પોલીક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ અથવા ટૂંકમાં પોલીક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ પણ કહેવામાં આવે છે.
 
મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી (મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી) એ અત્યંત સમાન એન્ટિબોડી છે જે સિંગલ બી સેલ ક્લોન દ્વારા ઉત્પાદિત થાય છે અને માત્ર ચોક્કસ એપિટોપ સામે નિર્દેશિત થાય છે.તે સામાન્ય રીતે હાઇબ્રિડોમા ટેક્નોલોજી દ્વારા તૈયાર કરવામાં આવે છે - હાઇબ્રિડોમા એન્ટિબોડી ટેક્નોલોજી સેલ ફ્યુઝન ટેક્નોલોજી પર આધારિત છે, જેમાં ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ અને માયલોમા કોશિકાઓને બી-સેલ હાઇબ્રિડોમામાં અનંત વૃદ્ધિ ક્ષમતા સાથે સ્ત્રાવ કરવાની ક્ષમતા સાથે સંયોજન કરવામાં આવે છે.આ હાઇબ્રિડોમા કોષમાં પિતૃ કોષની વિશેષતાઓ છે.તે માયલોમા કોષો જેવા વિટ્રોમાં અનિશ્ચિત અને અમર રૂપે પ્રસરી શકે છે, અને તે સ્પ્લેનિક લિમ્ફોસાઇટ્સ જેવા ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝનું સંશ્લેષણ અને સ્ત્રાવ કરી શકે છે.ક્લોનિંગ દ્વારા, સિંગલ હાઇબ્રિડોમા સેલમાંથી મેળવેલી મોનોક્લોનલ લાઇન, એટલે કે, હાઇબ્રિડોમા સેલ લાઇન મેળવી શકાય છે.તે જે એન્ટિબોડીઝ ઉત્પન્ન કરે છે તે સમાન એન્ટિજેનિક નિર્ણાયક, એટલે કે મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ સામે અત્યંત સજાતીય એન્ટિબોડીઝ છે.
 
એન્ટિબોડીઝ એક અથવા વધુ Y આકારના મોનોમર્સ (એટલે ​​કે, મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ અથવા પોલીક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ) તરીકે અસ્તિત્વ ધરાવે છે.દરેક વાય આકારનું મોનોમર 4 પોલીપેપ્ટાઈડ સાંકળોથી બનેલું છે, જેમાં બે સરખી ભારે સાંકળો અને બે સમાન પ્રકાશ સાંકળોનો સમાવેશ થાય છે.લાઇટ ચેઇન અને હેવી ચેઇનને તેમના પરમાણુ વજન અનુસાર નામ આપવામાં આવ્યું છે.Y-આકારની રચનાની ટોચ ચલ પ્રદેશ છે, જે એન્ટિજેન બંધનકર્તા સ્થળ છે.(ડેટાઈ બાયો-મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી કોન્સેપ્ટમાંથી અવતરણ)
 
એન્ટિબોડી માળખું
ભારે સાંકળ
ગ્રીક અક્ષરો α, δ, ε, γ અને μ સાથે નામવાળી સસ્તન પ્રાણી Ig ભારે સાંકળો પાંચ પ્રકારની છે.અનુરૂપ એન્ટિબોડીઝને IgA, IgD, IgE, IgG અને IgM કહેવામાં આવે છે.વિવિધ ભારે સાંકળો કદ અને રચનામાં અલગ પડે છે.α અને γ આશરે 450 એમિનો એસિડ ધરાવે છે, જ્યારે μ અને ε આશરે 550 એમિનો એસિડ ધરાવે છે.
દરેક ભારે સાંકળમાં બે ક્ષેત્રો હોય છે: અચળ પ્રદેશ અને ચલ પ્રદેશ.સમાન પ્રકારના તમામ એન્ટિબોડીઝ સમાન સ્થિર પ્રદેશ ધરાવે છે, પરંતુ વિવિધ પ્રકારના એન્ટિબોડીઝ વચ્ચે તફાવત છે.ભારે સાંકળો γ, α અને δ ના સતત પ્રદેશો ત્રણ Ig ડોમેન્સથી બનેલા હોય છે, જેમાં તેની લવચીકતા વધારવા માટે હિન્જ પ્રદેશ હોય છે;ભારે સાંકળોના સતત પ્રદેશો μ અને ε 4 Ig ડોમેન્સથી બનેલા છે.વિવિધ B કોષો દ્વારા ઉત્પાદિત એન્ટિબોડીની ભારે સાંકળનો ચલ પ્રદેશ અલગ અલગ હોય છે, પરંતુ સમાન B કોષ અથવા સેલ ક્લોન દ્વારા ઉત્પાદિત એન્ટિબોડીનો ચલ પ્રદેશ સમાન હોય છે, અને દરેક ભારે સાંકળના ચલ પ્રદેશની લંબાઈ લગભગ 110 એમિનો એસિડ હોય છે., અને સિંગલ Ig ડોમેન બનાવે છે.
 
પ્રકાશ સાંકળ
સસ્તન પ્રાણીઓમાં માત્ર બે પ્રકારની પ્રકાશ સાંકળો છે: લેમ્બડા પ્રકાર અને કપ્પા પ્રકાર.દરેક પ્રકાશ સાંકળમાં બે જોડાયેલા ડોમેન્સ હોય છે: એક સ્થિર પ્રદેશ અને ચલ પ્રદેશ.પ્રકાશ સાંકળની લંબાઈ લગભગ 211~217 એમિનો એસિડ છે.દરેક એન્ટિબોડીમાં સમાયેલ બે પ્રકાશ સાંકળો હંમેશા સમાન હોય છે.સસ્તન પ્રાણીઓ માટે, દરેક એન્ટિબોડીમાં પ્રકાશ સાંકળ માત્ર એક જ પ્રકાર ધરાવે છે: કપ્પા અથવા લેમ્બડા.કેટલાક નીચલા કરોડઅસ્થિધારી પ્રાણીઓમાં, જેમ કે કાર્ટિલેજિનસ માછલીઓ (કોર્ટિલેજ માછલીઓ) અને હાડકાની માછલીઓ, અન્ય પ્રકારની પ્રકાશ સાંકળો જેમ કે આયોટા (iota) પ્રકાર પણ જોવા મળે છે.
 
ફેબ અને એફસી સેગમેન્ટ્સ
એન્ટિબોડીઝને લેબલ કરવા માટે Fc સેગમેન્ટને ઉત્સેચકો અથવા ફ્લોરોસન્ટ રંગો સાથે સીધા જોડી શકાય છે.તે એ ભાગ છે જ્યાં ELISA પ્રક્રિયા દરમિયાન પ્લેટ પર એન્ટિબોડી રિવેટ્સ થાય છે, અને તે તે ભાગ પણ છે જ્યાં બીજી એન્ટિબોડી ઓળખાય છે અને ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન, ઇમ્યુનોબ્લોટિંગ અને ઇમ્યુનોહિસ્ટોકેમિસ્ટ્રીમાં બંધાયેલી છે.એન્ટિબોડીઝને પેપેન જેવા પ્રોટીઓલિટીક એન્ઝાઇમ દ્વારા બે F(ab) સેગમેન્ટમાં અને એક Fc સેગમેન્ટમાં હાઇડ્રોલાઇઝ કરી શકાય છે અથવા પેપ્સિન દ્વારા મિજાગરીના પ્રદેશમાંથી તોડીને એક F(ab)2 સેગમેન્ટ અને એક Fc સેગમેન્ટમાં હાઇડ્રોલાઇઝ્ડ કરી શકાય છે.IgG એન્ટિબોડી ટુકડાઓ ક્યારેક ખૂબ ઉપયોગી છે.Fc સેગમેન્ટની અછતને કારણે, F(ab) સેગમેન્ટ એન્ટિજેન સાથે અવક્ષેપિત થશે નહીં, કે તે વિવો અભ્યાસમાં રોગપ્રતિકારક કોષો દ્વારા કબજે કરવામાં આવશે નહીં.નાના પરમાણુ ટુકડાઓ અને ક્રોસ-લિંકિંગ કાર્યના અભાવને કારણે (Fc સેગમેન્ટની અછતને કારણે), ફેબ સેગમેન્ટનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે કાર્યાત્મક અભ્યાસમાં રેડિયોલેબલિંગ માટે થાય છે, અને Fc સેગમેન્ટનો ઉપયોગ મુખ્યત્વે હિસ્ટોકેમિકલ સ્ટેનિંગમાં અવરોધક એજન્ટ તરીકે થાય છે.
 
ચલ અને સ્થિર પ્રદેશો
ચલ પ્રદેશ (V પ્રદેશ) N-ટર્મિનસની નજીક એચ સાંકળના 1/5 અથવા 1/4 (લગભગ 118 એમિનો એસિડ અવશેષો ધરાવે છે) અને L સાંકળના N-ટર્મિનસની નજીક 1/2 (લગભગ 108-111 એમિનો એસિડ અવશેષો ધરાવે છે) પર સ્થિત છે.દરેક V પ્રદેશમાં ઇન્ટ્રા-ચેઇન ડિસલ્ફાઇડ બોન્ડ્સ દ્વારા રચાયેલી પેપ્ટાઇડ રિંગ હોય છે, અને દરેક પેપ્ટાઇડ રિંગમાં આશરે 67 થી 75 એમિનો એસિડ અવશેષો હોય છે.V પ્રદેશમાં એમિનો એસિડની રચના અને ગોઠવણી એન્ટિબોડીની એન્ટિજેન બંધનકર્તા વિશિષ્ટતા નક્કી કરે છે.V પ્રદેશમાં એમિનો એસિડના સતત બદલાતા પ્રકારો અને ક્રમને લીધે, વિવિધ બંધનકર્તા એન્ટિજેન વિશિષ્ટતાઓ સાથે ઘણા પ્રકારના એન્ટિબોડીઝની રચના થઈ શકે છે.L સાંકળ અને H સાંકળના V વિસ્તારોને અનુક્રમે VL અને VH કહેવામાં આવે છે.VL અને VH માં, કેટલાક સ્થાનિક પ્રદેશોના એમિનો એસિડની રચના અને ક્રમમાં ઉચ્ચ ડિગ્રીની વિવિધતા હોય છે.આ પ્રદેશોને હાયપરવેરિયેબલ રિજન (HVR) કહેવામાં આવે છે.V પ્રદેશમાં બિન-HVR ભાગોની એમિનો એસિડ રચના અને ગોઠવણી પ્રમાણમાં રૂઢિચુસ્ત છે, જેને ફ્રેમવર્ક પ્રદેશ કહેવામાં આવે છે.VL માં ત્રણ હાયપરવેરિયેબલ પ્રદેશો છે, સામાન્ય રીતે એમિનો એસિડ અવશેષો 24 થી 34 અને 89 થી 97 અનુક્રમે સ્થિત છે.VL અને VH ના ત્રણ HVR ને અનુક્રમે HVR1, HVR2 અને HVR3 કહેવામાં આવે છે.એક્સ-રે ક્રિસ્ટલ ડિફ્રેક્શનના સંશોધન અને પૃથ્થકરણે સાબિત કર્યું છે કે હાયપરવેરિયેબલ ક્ષેત્ર ખરેખર તે સ્થાન છે જ્યાં એન્ટિબોડી એન્ટિજેન જોડાય છે, તેથી તેને પૂરક-નિર્ધારણ ક્ષેત્ર (સીડીઆર) કહેવામાં આવે છે.VL અને VH ના HVR1, HVR2 અને HVR3 ને અનુક્રમે CDR1, CDR2 અને CDR3 કહી શકાય.સામાન્ય રીતે, CDR3 ની હાયપરવેરિબિલિટીની ઉચ્ચ ડિગ્રી હોય છે.હાઈપરવેરિયેબલ પ્રદેશ એ મુખ્ય સ્થાન પણ છે જ્યાં Ig પરમાણુઓના આઇડિયોટાઇપિક નિર્ધારકો અસ્તિત્વમાં છે.મોટા ભાગના કિસ્સાઓમાં, એચ સાંકળ એન્ટિજેન સાથે જોડવામાં વધુ મહત્વની ભૂમિકા ભજવે છે.
સતત પ્રદેશ (C પ્રદેશ)C ટર્મિનસ નજીક H ચેઇનના 3/4 અથવા 4/5 (અંદાજે એમિનો એસિડ 119 થી C ટર્મિનલ સુધી) અને L ચેઇનના C ટર્મિનસની નજીક 1/2 (લગભગ 105 એમિનો એસિડ અવશેષો ધરાવે છે) પર સ્થિત છે.એચ સાંકળના દરેક કાર્યાત્મક પ્રદેશમાં લગભગ 110 એમિનો એસિડ અવશેષો હોય છે, અને તેમાં એક પેપ્ટાઇડ રિંગ હોય છે જે 50-60 એમિનો એસિડ અવશેષોથી બનેલી હોય છે જે ડાયસલ્ફાઇડ બોન્ડ દ્વારા જોડાયેલ હોય છે.આ પ્રદેશની એમિનો એસિડ રચના અને ગોઠવણી સમાન પ્રાણી Ig આઇસોટાઇપ એલ સાંકળ અને સમાન પ્રકારની H સાંકળમાં પ્રમાણમાં સ્થિર છે.તે જ, તે માત્ર અનુરૂપ એન્ટિજેન સાથે વિશિષ્ટ રીતે જોડાઈ શકે છે, પરંતુ તેના C પ્રદેશની રચના સમાન છે, એટલે કે, તે સમાન એન્ટિજેનિસિટી ધરાવે છે.ઘોડા વિરોધી માનવ IgG ગૌણ એન્ટિબોડી (અથવા એન્ટિ-એન્ટિબોડી) એ બે એન્ટિબોડીઝ (IgG) ના સંયોજનો સાથે જોડી શકાય છે જે વિવિધ એક્સોટોક્સિન્સ સામે થાય છે.ગૌણ એન્ટિબોડીઝ તૈયાર કરવા અને ફ્લોરોસીન, આઇસોટોપ્સ, એન્ઝાઇમ્સ અને અન્ય લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝ લાગુ કરવા માટે આ એક મહત્વપૂર્ણ આધાર છે.
 
 
સંબંધિત વસ્તુઓ:
સેલ ડાયરેક્ટ RT-qPCR કીટ