માટે FAQ'sએનિમલ ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કીટ

તમે જે સમસ્યાઓનો સામનો કરી શકો છો તેનું નીચેનું વિશ્લેષણપ્રાણી પેશી/સેલ આરએનએ નિષ્કર્ષણ will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

આરએનએ કાઢવામાં આવતું નથી અથવા આરએનએ ઉપજ ઓછી છે

પુનઃપ્રાપ્તિ કાર્યક્ષમતાને અસર કરતા વિવિધ પરિબળો ઘણીવાર હોય છે, જેમ કે: ટીશ્યુ સેમ્પલ આરએનએ સામગ્રી, કામગીરીની પદ્ધતિ, ઉત્સર્જન વોલ્યુમ વગેરે.

1. ઓપરેશન દરમિયાન બરફ સ્નાન અથવા ક્રાયોજેનિક (4 °C) સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કરવામાં આવ્યું હતું.

ભલામણ: સમગ્ર પ્રક્રિયા દરમિયાન ઓરડાના તાપમાને (15-25 ° સે) પર કામ કરો, બરફના સ્નાન અને નીચા તાપમાને સેન્ટ્રીફ્યુજ ન કરો.

2. અયોગ્ય નમૂનાની જાળવણી અથવા વધુ પડતા નમૂના સંગ્રહ સમય.

ભલામણ: નમૂનાઓને -80 °C પર સ્ટોર કરો અથવા પ્રવાહી નાઇટ્રોજનમાં સ્થિર કરો અને વારંવાર ફ્રીઝ-થૉનો ઉપયોગ ટાળો;RNA નિષ્કર્ષણ માટે તાજા પેશી અથવા સંસ્કારી કોષોનો ઉપયોગ કરવાનો પ્રયાસ કરો.

3. અપર્યાપ્ત નમૂના lysis.

ભલામણ: ટીશ્યુને એકરૂપ બનાવતી વખતે, ખાતરી કરો કે પેશી પર્યાપ્ત રીતે એકરૂપ છે અને ટીશ્યુ કોષો RNA ના પ્રકાશનને સમજાવવા માટે પૂરતા પ્રમાણમાં વિભાજિત છે.

4. એલુએન્ટ યોગ્ય રીતે ઉમેરવામાં આવ્યું નથી.

ભલામણ: પુષ્ટિ કરો કે RNase-ફ્રી ddH₂O શુદ્ધિકરણ સ્તંભ પટલની મધ્યમાં ડ્રોપવાઇઝ ઉમેરવામાં આવે છે.

5. બફર RL2 અથવા બફર RW2 માં સંપૂર્ણ ઇથેનોલનું યોગ્ય પ્રમાણ ઉમેરવામાં આવ્યું ન હતું.

ભલામણ: સૂચનાઓનું પાલન કરો, બફર RL2 અને Buffer RW2 માં સંપૂર્ણ ઇથેનોલની સાચી માત્રા ઉમેરો અને કીટનો ઉપયોગ કરતા પહેલા સારી રીતે ભળી દો.

6. ટીશ્યુ સેમ્પલ ડોઝ યોગ્ય નથી.

ભલામણ: 10-20 મિલિગ્રામ પેશી અથવા (1-5) × 10 નો ઉપયોગ કરો⁶કોષો પ્રતિ 500 μl બફર RL1, કારણ કે વધુ પડતા પેશીના ઉપયોગથી RNA નિષ્કર્ષણમાં ઘટાડો થઈ શકે છે.

7. અયોગ્ય ઇલ્યુશન વોલ્યુમ અથવા અપૂર્ણ ઇલ્યુશન.

ભલામણ: શુદ્ધિકરણ સ્તંભનું એલ્યુશન વોલ્યુમ 50-200 μl છે;જો ઉત્સર્જન અસર સંતોષકારક ન હોય, તો પ્રીહિટેડ RNase-ફ્રી ddH ઉમેર્યા પછી ઓરડાના તાપમાને પ્લેસમેન્ટનો સમય વધારવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.₂ઓ, દા.ત. 5-10 મિનિટ માટે.

8. બફર RW2 ધોવા પછી શુદ્ધિકરણ સ્તંભમાં ઇથેનોલ અવશેષો છે.

ભલામણ: જો બફર RW2 ધોવા પછી ઇથેનોલ અવશેષો હોય, તો ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન 1 મિનિટ માટે, ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઑપરેશન માટેનો સમય વધારીને 2 મિનિટ કરી શકાય છે, અથવા શુદ્ધિકરણ કૉલમ ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે મૂકી શકાય છે જેથી તે પર્યાપ્ત રીતે અવશેષો દૂર કરી શકાય.

શુદ્ધ થયેલ આરએનએ ડિગ્રેજ થાય છે

શુદ્ધ RNA ની ગુણવત્તા નમૂનાની જાળવણી, RNase દૂષણ અને મેનીપ્યુલેશન વગેરે જેવા પરિબળો સાથે સંબંધિત છે.

1. ટિશ્યુ સેમ્પલ સમયસર રાખવામાં આવતા નથી.

ભલામણ: જો પેશીના નમૂનાઓ અથવા કોષોનો સંગ્રહ કર્યા પછી સમયસર ઉપયોગ કરવામાં આવતો નથી, તો તરત જ -80 °C અથવા પ્રવાહી નાઇટ્રોજન પર ક્રાયોપ્રિઝર્વ કરો.આરએનએ કાઢવા માટે, જ્યારે પણ શક્ય હોય ત્યારે નવા લીધેલા પેશી અથવા કોષના નમૂનાનો ઉપયોગ કરો.

2. પેશીના નમૂનાઓનું વારંવાર ફ્રીઝ-પીગળવું.

ભલામણ: પેશીના નમૂનાઓનો સંગ્રહ કરતી વખતે, તેને સાચવવા માટે નાના ટુકડાઓમાં કાપવા શ્રેષ્ઠ છે, અને નમૂનાના વારંવાર ફ્રીઝ-પીગળવા અને આરએનએના અધોગતિને ટાળવા માટે તેનો ઉપયોગ કરતી વખતે એક ટુકડાને દૂર કરો.

3. ઓપરેશન દરમિયાન RNase દાખલ કરવામાં આવે છે અથવા નિકાલજોગ ગ્લોવ્સ, માસ્ક વગેરે પહેર્યા નથી.

ભલામણ: આરએનએ નિષ્કર્ષણ પ્રયોગો અલગ આરએનએ મેનિપ્યુલેશન રૂમમાં શ્રેષ્ઠ રીતે કરવામાં આવે છે અને પ્રયોગ પહેલાં ટેબલ સાફ કરવામાં આવે છે.

RNase ની રજૂઆતને કારણે થતા RNA અધોગતિને ઘટાડવા માટે પ્રયોગ દરમિયાન નિકાલજોગ ગ્લોવ્ઝ અને માસ્ક પહેરો.

4. ઉપયોગ દરમિયાન રીએજન્ટ્સ RNase થી દૂષિત થાય છે.

ભલામણ: સંબંધિત પ્રયોગો માટે નવી એનિમલ ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કિટ સાથે બદલો.

5. આરએનએ મેનીપ્યુલેશનમાં વપરાતી સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, ટીપ્સ વગેરે RNase થી દૂષિત છે.

ભલામણ: ખાતરી કરો કે આરએનએ નિષ્કર્ષણમાં વપરાતી સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, ટીપ્સ, પાઈપેટ્સ વગેરે તમામ RNase-મુક્ત છે.

શુદ્ધ મેળવેલ આરએનએ ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોને અસર કરે છે

શુદ્ધિકરણ સ્તંભ દ્વારા શુદ્ધ થયેલ આરએનએ, જો મીઠાના આયનો, પ્રોટીનની સામગ્રી ખૂબ મોટી હોય તો ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગને અસર કરશે, જેમ કે: રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન, નોર્ધન બ્લોટ એટ અલ.

1. વિસર્જન થયેલ આરએનએમાં મીઠું આયન અવશેષો હોય છે.

ભલામણ: ખાતરી કરો કે બફર RW2 માં ઇથેનોલનું યોગ્ય પ્રમાણ ઉમેરવામાં આવ્યું છે અને ઓપરેશન માટે દર્શાવેલ કેન્દ્રત્યાગી ગતિએ 2 શુદ્ધિકરણ કૉલમ ધોવા;જો ત્યાં કોઈ મીઠું આયન અવશેષો હોય, તો શુદ્ધિકરણ કૉલમને બફર RW2 પર ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દો અને મીઠું દૂષણને મહત્તમ રીતે દૂર કરવા માટે સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કરો.

2. એલ્યુટેડ આરએનએમાં ઇથેનોલ અવશેષો.

ભલામણ: ખાતરી કરો કે બફર RW2 ધોવા પછી, ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઑપરેશન ઑપરેશન માટે સૂચવેલ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઝડપે કરો, ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઑપરેશનનો સમય વધારીને 2 મિનિટ કરો જો ત્યાં હજુ પણ ઇથેનોલ અવશેષો હોય, અથવા તેને રૂમના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દો અને ઇથેનોલના રિસેપ્શન પછી 5 મિનિટ સુધી રૂમના તાપમાને છોડી દો. આઇડીયુ

ન્યુલ્સીક એસિડ નમૂનાના પ્રકારોનું અલગતા

ફોરજીનની આરએનએ આઇસોલેશન કીટ નીચેના નમૂનાના સોસમાંથી કુલ આરએનએ અલગતા/નિષ્કર્ષણ મેળવી શકે છે: પ્રાણી પેશી, છોડ, કોષો, વાયરલ, રક્ત, વગેરે.

હું કીટ કેવી રીતે સ્ટોર કરી શકું

24 મહિના માટે ઓરડાના તાપમાને સંગ્રહ.