એનિમલ ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કિટ એનિમલ ટિશ્યુ અને સેલ માટે કુલ આરએનએ એક્સટ્રક્શન અને પ્યુરિફિકેશન કિટ્સ
કિટ વર્ણન:
વિવિધ પ્રાણીઓના પેશીઓમાંથી ઝડપથી અને અસરકારક રીતે ઉચ્ચ-શુદ્ધતા અને ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા કુલ આરએનએ કાઢો.
આરએનએ ડિગ્રેડેશન વિશે ચિંતા કરવાની જરૂર નથી.આખી સિસ્ટમ RNase-મુક્ત છે
DNA-સફાઈ કૉલમનો ઉપયોગ કરીને અસરકારક રીતે DNA દૂર કરો
DNase ઉમેર્યા વિના DNA દૂર કરો
સરળ - તમામ કામગીરી ઓરડાના તાપમાને પૂર્ણ થાય છે
ઝડપી-ઓપરેશન 30 મિનિટમાં પૂર્ણ કરી શકાય છે
સલામત - કોઈ કાર્બનિક રીએજન્ટનો ઉપયોગ થતો નથી
ઉચ્ચ શુદ્ધતા—OD260/280≈1.8-2.1
કિટ્સ વર્ણન
50 તૈયારીઓ, 200 તૈયારીઓ
આ કીટનો ઉપયોગ કરે છેસ્પિન કૉલમ અને ફોર્મ્યુલાઅમારી કંપની દ્વારા વિકસિત, જે ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતા સાથે વિવિધ પ્રાણીઓના પેશીઓમાંથી ઉચ્ચ-શુદ્ધતા અને ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા કુલ આરએનએ કાઢી શકે છે. તે એક કાર્યક્ષમ DNA-સફાઈ કૉલમ પ્રદાન કરે છે, જે સુપરનેટન્ટ અને ટિશ્યુ લાઇસેટથી જીનોમિક ડીએનએને સરળતાથી અલગ અને શોષી શકે છે, સરળ અને સમય બચાવે છે;RNA-માત્ર કૉલમ RNA ને અસરકારક રીતે બાંધી શકે છે અને એક અનન્ય ફોર્મ્યુલા ઘણાં બધાં નમૂનાઓ સાથે એકસાથે પ્રક્રિયા કરી શકાય છે.
આખી સિસ્ટમ RNase-મુક્ત છે, જેથી કાઢવામાં આવેલ RNA ડિગ્રેજ ન થાય;બફર RW1, Buffer RW2 બફર વૉશિંગ સિસ્ટમ, જેથી મેળવેલ RNA પ્રોટીન, DNA, આયન અને કાર્બનિક સંયોજન પ્રદૂષણથી મુક્ત હોય.
કીટ ઘટકો
| એનિમલ ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કિટ | ||
| કીટ ઘટકો | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 ટી | 200 ટી | |
| બફર RL1* | 25 મિલી | 100 મિલી |
| બફર RL2 | 15 મિલી | 60 મિલી |
| બફર RW1* | 25 મિલી | 100 મિલી |
| બફર RW2 | 24 મિલી | 96 મિલી |
| RNase-મુક્ત ddH2O | 10 મિલી | 40 મિલી |
| RNA-માત્ર કૉલમ | 50 | 200 |
| DNA-સફાઈ કૉલમ | 50 | 200 |
| સૂચના માર્ગદર્શિકા | 1 ટુકડો | 1 ટુકડો |
ઉત્પાદન માહિતી
| ફોર્મેટ | સ્પિન કૉલમ | શુદ્ધિકરણ ઘટક | ફોરજીન કોલમ, રીએજન્ટ |
| પ્રવાહ | 1-24 નમૂનાઓ | તૈયારી દીઠ સમય | ~30 મિનિટ (24 નમૂના) |
| સેન્ટ્રીફ્યુજ | ડેસ્ક સેન્ટ્રીફ્યુજ | પાયરોલિસિસ અલગ | કેન્દ્રત્યાગી વિભાજન |
| નમૂના | પ્રાણી પેશી;કોષ | નમૂનાઓ જથ્થો | પેશી: 10-20 મિલિગ્રામ;કોષ:(1-5)×106 |
| એલ્યુશન વોલ્યુમ | 50-200 μL | મહત્તમ લોડિંગ વોલ્યુમ | 850 μL |
સુવિધાઓ અને ફાયદા
■ RNA અધોગતિ વિશે ચિંતા કરવાની જરૂર નથી;આખી સિસ્ટમ RNase-મુક્ત છે
■ અસરકારક રીતે DNA-નો ઉપયોગ કરીને DNA-સફાઈ કૉલમ દૂર કરો
■ DNase ઉમેર્યા વિના DNA દૂર કરો
■ સરળ-તમામ કામગીરી ઓરડાના તાપમાને પૂર્ણ થાય છે
■ ઝડપી ઓપરેશન 30 મિનિટમાં પૂર્ણ કરી શકાય છે
■ સલામત-કોઈ કાર્બનિક રીએજન્ટ જરૂરી નથી
■ ઉચ્ચ શુદ્ધતા -OD260/280≈1.8-2.1
કીટ એપ્લિકેશન
તે વિવિધ તાજા અથવા સ્થિર પ્રાણી પેશીઓ અથવા સંસ્કારી કોષોમાંથી કુલ RNA ના નિષ્કર્ષણ અને શુદ્ધિકરણ માટે યોગ્ય છે.
ઉત્પાદન પરિમાણો
■ ડાઉનસ્ટ્રીમ એપ્લિકેશન્સ: ફર્સ્ટ-સ્ટ્રૅન્ડ cDNA સિન્થેસિસ, RT-PCR, મોલેક્યુલર ક્લોનિંગ, નોર્ધન બ્લૉટ, વગેરે.
■ નમૂનાઓ: પ્રાણીઓની પેશીઓ, સંસ્કારી કોષો
■ માત્રા: પેશીઓ 10-20mg, કોષો(2-5)×106
■ શુદ્ધિકરણ સ્તંભની મહત્તમ DNA બંધન ક્ષમતા: 80 μg
■ એલ્યુશન વોલ્યુમ: 50-200 μl
ડાયાગ્રામ
એનિમલ ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કીટની સારવાર 20mg
તાજા માઉસ નમૂનાઓ, 5% શુદ્ધ કુલ RNA 1% અગર લો
ગ્લાયકોજેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ
1: બરોળ 2: કિડની
3: લીવર 4: હૃદય
સંગ્રહ અને શેલ્ફ જીવન
કિટને ઓરડાના તાપમાને (15–25 ℃) અથવા 2–8 ℃ પર લાંબા સમય સુધી 24 મહિના સુધી સંગ્રહિત કરી શકાય છે.બફર RL1 β- mercaptoethanol (વૈકલ્પિક) ઉમેર્યા પછી 1 મહિના માટે 4 ℃ પર સંગ્રહિત કરી શકાય છે.
ટાંકેલા લેખો
1.IF:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.સેન્ટ્રલ કમ્પોઝિટ ડિઝાઇનના ઑપ્ટિમાઇઝેશન દ્વારા લિવર બેઝ એડિટિંગ માટે mRNA-લોડેડ લિપિડ-લાઇક નેનોપાર્ટિકલ્સ.એડવો.કાર્ય.મેટર.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF:18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.રોગનિવારક સ્ટેમ સેલ તૈયારીમાં કોશિકાઓના સ્વયંસ્ફુરિત એપોપ્ટોસિસ ફોસ્ફેટીડીલસરીનના પ્રકાશન દ્વારા ઇમ્યુનોમોડ્યુલેટરી અસર કરે છે.સિગ્નલ ટ્રાન્સડક્ટ ટાર્ગેટ થેર.2021 જુલાઇ 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF:17.97: Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosine tRNA ફેરફાર ઓન્કોજેનિક mRNA અનુવાદને વધારે છે અને ઇન્ટ્રાહેપેટિક કોલેન્જિયોકાર્સિનોમા પ્રગતિને પ્રોત્સાહન આપે છે.મોલ સેલ.2021 જુલાઇ 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF:9.225: Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mettl14-મધ્યસ્થ m6A ફેરફાર એન્ડોપ્લાઝમિક રેટિક્યુલમ હોમિયોસ્ટેસિસ જાળવી રાખીને લીવરના પુનર્જીવનની સુવિધા આપે છે.સેલ મોલ ગેસ્ટ્રોએન્ટેરોલ હેપેટોલ.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
માટે આરએનએ આઇસોલેશન કિટ્સ અન્ય નમૂના સ્ત્રોતોઉપલબ્ધ છે:
કોષ, છોડ, વાયરલ, રક્ત, વગેરે.
આરએનએ કાઢવામાં આવતું નથી અથવા આરએનએ ઉપજ ઓછી છે
પુનઃપ્રાપ્તિ કાર્યક્ષમતાને અસર કરતા વિવિધ પરિબળો ઘણીવાર હોય છે, જેમ કે: ટીશ્યુ સેમ્પલ આરએનએ સામગ્રી, કામગીરીની પદ્ધતિ, ઉત્સર્જન વોલ્યુમ વગેરે.
1. ઓપરેશન દરમિયાન બરફ સ્નાન અથવા ક્રાયોજેનિક (4 °C) સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કરવામાં આવ્યું હતું.
ભલામણ: સમગ્ર પ્રક્રિયા દરમિયાન ઓરડાના તાપમાને (15-25 ° સે) પર કામ કરો, બરફના સ્નાન અને નીચા તાપમાને સેન્ટ્રીફ્યુજ ન કરો.
2. અયોગ્ય નમૂનાની જાળવણી અથવા વધુ પડતા નમૂના સંગ્રહ સમય.
ભલામણ: નમૂનાઓને -80 °C પર સ્ટોર કરો અથવા પ્રવાહી નાઇટ્રોજનમાં સ્થિર કરો અને વારંવાર ફ્રીઝ-થૉનો ઉપયોગ ટાળો;RNA નિષ્કર્ષણ માટે તાજા પેશી અથવા સંસ્કારી કોષોનો ઉપયોગ કરવાનો પ્રયાસ કરો.
3. અપર્યાપ્ત નમૂના lysis.
ભલામણ: ટીશ્યુને એકરૂપ બનાવતી વખતે, ખાતરી કરો કે પેશી પર્યાપ્ત રીતે એકરૂપ છે અને ટીશ્યુ કોષો RNA ના પ્રકાશનને સમજાવવા માટે પૂરતા પ્રમાણમાં વિભાજિત છે.
4. એલુએન્ટ યોગ્ય રીતે ઉમેરવામાં આવ્યું નથી.
ભલામણ: પુષ્ટિ કરો કે RNase-ફ્રી ddH2O શુદ્ધિકરણ સ્તંભ પટલની મધ્યમાં ડ્રોપવાઇઝ ઉમેરવામાં આવે છે.
5. બફર RL2 અથવા બફર RW2 માં સંપૂર્ણ ઇથેનોલનું યોગ્ય પ્રમાણ ઉમેરવામાં આવ્યું ન હતું.
ભલામણ: સૂચનાઓનું પાલન કરો, બફર RL2 અને Buffer RW2 માં સંપૂર્ણ ઇથેનોલની સાચી માત્રા ઉમેરો અને કીટનો ઉપયોગ કરતા પહેલા સારી રીતે ભળી દો.
6. ટીશ્યુ સેમ્પલ ડોઝ યોગ્ય નથી.
ભલામણ: 10-20 મિલિગ્રામ પેશી અથવા (1-5) × 10 નો ઉપયોગ કરો6કોષો પ્રતિ 500 μl બફર RL1, કારણ કે વધુ પડતા પેશીના ઉપયોગથી RNA નિષ્કર્ષણમાં ઘટાડો થઈ શકે છે.
7. અયોગ્ય ઇલ્યુશન વોલ્યુમ અથવા અપૂર્ણ ઇલ્યુશન.
ભલામણ: શુદ્ધિકરણ સ્તંભનું એલ્યુશન વોલ્યુમ 50-200 μl છે;જો ઉત્સર્જન અસર સંતોષકારક ન હોય, તો પ્રીહિટેડ RNase-ફ્રી ddH ઉમેર્યા પછી ઓરડાના તાપમાને પ્લેસમેન્ટનો સમય વધારવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.2ઓ, દા.ત. 5-10 મિનિટ માટે.
8. બફર RW2 ધોવા પછી શુદ્ધિકરણ સ્તંભમાં ઇથેનોલ અવશેષો છે.
ભલામણ: જો બફર RW2 ધોવા પછી ઇથેનોલ અવશેષો હોય, તો ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન 1 મિનિટ માટે, ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઑપરેશન માટેનો સમય વધારીને 2 મિનિટ કરી શકાય છે, અથવા શુદ્ધિકરણ કૉલમ ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે મૂકી શકાય છે જેથી તે પર્યાપ્ત રીતે અવશેષો દૂર કરી શકાય.
શુદ્ધ થયેલ આરએનએ ડિગ્રેજ થાય છે
શુદ્ધ RNA ની ગુણવત્તા નમૂનાની જાળવણી, RNase દૂષણ અને મેનીપ્યુલેશન વગેરે જેવા પરિબળો સાથે સંબંધિત છે.
1. ટિશ્યુ સેમ્પલ સમયસર રાખવામાં આવતા નથી.
ભલામણ: જો પેશીના નમૂનાઓ અથવા કોષોનો સંગ્રહ કર્યા પછી સમયસર ઉપયોગ કરવામાં આવતો નથી, તો તરત જ -80 °C અથવા પ્રવાહી નાઇટ્રોજન પર ક્રાયોપ્રિઝર્વ કરો.આરએનએ કાઢવા માટે, જ્યારે પણ શક્ય હોય ત્યારે નવા લીધેલા પેશી અથવા કોષના નમૂનાનો ઉપયોગ કરો.
2. પેશીના નમૂનાઓનું વારંવાર ફ્રીઝ-પીગળવું.
ભલામણ: પેશીના નમૂનાઓનો સંગ્રહ કરતી વખતે, તેને સાચવવા માટે નાના ટુકડાઓમાં કાપવા શ્રેષ્ઠ છે, અને નમૂનાના વારંવાર ફ્રીઝ-પીગળવા અને આરએનએના અધોગતિને ટાળવા માટે તેનો ઉપયોગ કરતી વખતે એક ટુકડાને દૂર કરો.
3. ઓપરેશન દરમિયાન RNase દાખલ કરવામાં આવે છે અથવા નિકાલજોગ ગ્લોવ્સ, માસ્ક વગેરે પહેર્યા નથી.
ભલામણ: આરએનએ નિષ્કર્ષણ પ્રયોગો અલગ આરએનએ મેનિપ્યુલેશન રૂમમાં શ્રેષ્ઠ રીતે કરવામાં આવે છે અને પ્રયોગ પહેલાં ટેબલ સાફ કરવામાં આવે છે.
RNase ની રજૂઆતને કારણે થતા RNA અધોગતિને ઘટાડવા માટે પ્રયોગ દરમિયાન નિકાલજોગ ગ્લોવ્ઝ અને માસ્ક પહેરો.
4. ઉપયોગ દરમિયાન રીએજન્ટ્સ RNase થી દૂષિત થાય છે.
ભલામણ: સંબંધિત પ્રયોગો માટે નવી એનિમલ ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કિટ સાથે બદલો.
5. આરએનએ મેનીપ્યુલેશનમાં વપરાતી સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, ટીપ્સ વગેરે RNase થી દૂષિત છે.
ભલામણ: ખાતરી કરો કે આરએનએ નિષ્કર્ષણમાં વપરાતી સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, ટીપ્સ, પાઈપેટ્સ વગેરે તમામ RNase-મુક્ત છે.
શુદ્ધ મેળવેલ આરએનએ ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોને અસર કરે છે
શુદ્ધિકરણ સ્તંભ દ્વારા શુદ્ધ થયેલ આરએનએ, જો મીઠાના આયનો, પ્રોટીનની સામગ્રી ખૂબ મોટી હોય તો ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગને અસર કરશે, જેમ કે: રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન, નોર્ધન બ્લોટ એટ અલ.
1. વિસર્જન થયેલ આરએનએમાં મીઠું આયન અવશેષો હોય છે.
ભલામણ: ખાતરી કરો કે બફર RW2 માં ઇથેનોલનું યોગ્ય પ્રમાણ ઉમેરવામાં આવ્યું છે અને ઓપરેશન માટે દર્શાવેલ કેન્દ્રત્યાગી ગતિએ 2 શુદ્ધિકરણ કૉલમ ધોવા;જો ત્યાં કોઈ મીઠું આયન અવશેષો હોય, તો શુદ્ધિકરણ કૉલમને બફર RW2 પર ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દો અને મીઠું દૂષણને મહત્તમ રીતે દૂર કરવા માટે સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કરો.
2. એલ્યુટેડ આરએનએમાં ઇથેનોલ અવશેષો.
ભલામણ: ખાતરી કરો કે બફર RW2 ધોવા પછી, ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઑપરેશન ઑપરેશન માટે સૂચવેલ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઝડપે કરો, ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઑપરેશનનો સમય વધારીને 2 મિનિટ કરો જો ત્યાં હજુ પણ ઇથેનોલ અવશેષો હોય, અથવા તેને રૂમના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દો અને ઇથેનોલના રિસેપ્શન પછી 5 મિનિટ સુધી રૂમના તાપમાને છોડી દો. આઇડીયુ
