બકલ સ્વેબ/એફટીએ કાર્ડ ડીએનએ આઇસોલેશન કીટ જીનોમિક ડીએનએ એક્સટ્રેક્શન અથવા બકલ સ્વેબમાંથી શુદ્ધિકરણ કીટ
કિટ વર્ણન:
બકલ સ્વેબ/એફટીએ કાર્ડના નમૂનાઓમાંથી ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા જીનોમિક ડીએનએને ઝડપથી શુદ્ધ કરો.
◮RNase દૂષણ નથી:કિટ દ્વારા આપવામાં આવેલ ડીએનએ-ઓન્લી કોલમ પ્રયોગ દરમિયાન આરએનએઝ ઉમેર્યા વિના જીનોમિક ડીએનએમાંથી આરએનએ દૂર કરવાનું શક્ય બનાવે છે, પ્રયોગશાળાને એક્સોજેનસ આરનેઝ દ્વારા દૂષિત થવાથી અટકાવે છે.
◮ઝડપી ગતિ:ફોરજીન પ્રોટીઝ સમાન પ્રોટીઝ કરતાં વધુ પ્રવૃત્તિ ધરાવે છે, અને પેશીના નમૂનાઓનું ઝડપથી પાચન કરે છે;ઓપરેશન સરળ છે, અને જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ ઓપરેશન 20-80 મિનિટમાં પૂર્ણ કરી શકાય છે.
◮અનુકૂળ:સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઓરડાના તાપમાને કરવામાં આવે છે, અને ડીએનએના 4°C નીચા-તાપમાન સેન્ટ્રીફ્યુગેશન અથવા ઇથેનોલ અવક્ષેપની જરૂર નથી.
◮સલામતી:કોઈ કાર્બનિક રીએજન્ટ નિષ્કર્ષણ જરૂરી નથી.
◮ઉચ્ચ ગુણવત્તા:કાઢવામાં આવેલ જીનોમિક ડીએનએમાં મોટા ટુકડાઓ હોય છે, આરએનએ નથી, આરએનએઝ નથી અને અત્યંત ઓછી આયન સામગ્રી છે, જે વિવિધ પ્રયોગોની જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરી શકે છે.
◮માઇક્રો-ઇલ્યુશન સિસ્ટમ:તે જીનોમિક ડીએનએની સાંદ્રતામાં વધારો કરી શકે છે, જે ડાઉનસ્ટ્રીમ શોધ અથવા પ્રયોગ માટે અનુકૂળ છે.
વર્ણન
આ કીટ બકલ સ્વેબ્સ અને FTA કાર્ડ (બ્લડ સ્પોટ્સ) માંથી ઉચ્ચ સાંદ્રતાવાળા જીનોમિક ડીએનએ મેળવવા માટે એક કાર્યક્ષમ અને ઝડપી પદ્ધતિ પ્રદાન કરે છે.અમારી કંપનીનો ઉપયોગ કરીને's અનન્ય ડીએનએ-માત્ર સિલિકા મેમ્બ્રેન સ્પિન કોલમ અને ફોર્મ્યુલા, ફોરજીન પ્રોટીઝ સાથે મળીને, ઉચ્ચ સાંદ્રતા, ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા જીનોમિક ડીએનએ 80 મિનિટમાં બહાર કાઢી શકાય છે.ખાસ રચાયેલ નાની શુદ્ધિકરણ સ્તંભ જીનોમિક ડીએનએને જોડે છે, અને ડીએનએને થોડી માત્રામાં (15μl) પ્રાપ્ત જીનોમિક ડીએનએની સાંદ્રતા વધારવા માટે ઇલ્યુશન સિસ્ટમ, જે ડાઉનસ્ટ્રીમ શોધ અથવા પ્રયોગ માટે અનુકૂળ છે.કીટ એક સમયે એક અથવા વધુ નમૂનાઓ પર પ્રક્રિયા કરી શકે છે, અને શુદ્ધિકરણ પ્રક્રિયામાં ફિનોલ, ક્લોરોફોર્મ જેવા કાર્બનિક પદાર્થોના નિષ્કર્ષણની જરૂર નથી અને સમય-વપરાશ કરનાર આઇસોપ્રોપેનોલ અથવા ઇથેનોલ અવક્ષેપની જરૂર નથી, અને ઓપરેશન સરળ અને સમય બચાવે છે.
વિશિષ્ટતાઓ
50 તૈયારીઓ
કીટ ઘટકો
| બફર ST1 |
| બફર ST2 |
| લીનિયર Acrylamide |
| બફર PW |
| બફર WB |
| બફર EB |
| ફોરજીન પ્રોટીઝ |
| DNA-માત્ર કૉલમ |
| સૂચનાઓ |
સુવિધાઓ અને ફાયદા
-RNase દૂષણ નથી: કિટ દ્વારા પ્રદાન કરવામાં આવેલ DNA-Only કૉલમ પ્રયોગ દરમિયાન RNase ઉમેર્યા વિના જીનોમિક DNAમાંથી RNA દૂર કરવાનું શક્ય બનાવે છે, પ્રયોગશાળાને એક્સોજેનસ RNase દ્વારા દૂષિત થવાથી ટાળે છે.
-ફાસ્ટ સ્પીડ: ફોરજીન પ્રોટીઝ સમાન પ્રોટીઝ કરતાં વધુ પ્રવૃત્તિ ધરાવે છે, નમૂનાઓનું ઝડપથી પાચન કરે છે;સરળ કામગીરી.
-અનુકૂળ: સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઓરડાના તાપમાને કરવામાં આવે છે, અને ડીએનએના 4°C નીચા-તાપમાન સેન્ટ્રીફ્યુગેશન અથવા ઇથેનોલ અવક્ષેપની જરૂર નથી.
-સુરક્ષા: કોઈ કાર્બનિક રીએજન્ટ નિષ્કર્ષણ જરૂરી નથી.
-ઉચ્ચ ગુણવત્તા: એક્સટ્રેક્ટેડ જીનોમિક ડીએનએમાં મોટા ટુકડાઓ હોય છે, કોઈ RNA નથી, RNase નથી અને અત્યંત ઓછી આયન સામગ્રી છે, જે વિવિધ પ્રયોગોની જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરી શકે છે.
-માઇક્રો-ઇલ્યુશન સિસ્ટમ: તે જીનોમિક ડીએનએની સાંદ્રતા વધારી શકે છે, જે ડાઉનસ્ટ્રીમ શોધ અથવા પ્રયોગ માટે અનુકૂળ છે.
કીટ એપ્લિકેશન
તે નીચેના નમૂનાઓમાંથી જીનોમિક ડીએનએના શુદ્ધિકરણ માટે યોગ્ય છે: બકલ સ્વેબ્સ, એફટીએ કાર્ડ (લોહીના ડાઘ).
સંગ્રહ અને શેલ્ફ જીવન
-આ કીટને ઓરડાના તાપમાને (15-25°C) સૂકી સ્થિતિમાં 12 મહિના માટે સંગ્રહિત કરી શકાય છે;જો તેને લાંબા સમય સુધી સંગ્રહિત કરવાની જરૂર હોય, તો તેને 2-8°C તાપમાને સંગ્રહિત કરી શકાય છે.
નોંધ: જો નીચા તાપમાને સંગ્રહિત કરવામાં આવે, તો દ્રાવણ વરસાદની સંભાવના ધરાવે છે.ઉપયોગ કરતા પહેલા, ચોક્કસ સમયગાળા માટે ઓરડાના તાપમાને કિટમાં સોલ્યુશન મૂકવાની ખાતરી કરો.જો જરૂરી હોય તો, અવક્ષેપ ઓગળવા માટે તેને 37 ° સે પાણીના સ્નાનમાં 10 મિનિટ માટે પહેલાથી ગરમ કરો અને ઉપયોગ કરતા પહેલા તેને મિક્સ કરો.
-ફોરેજેન પ્રોટીઝ સોલ્યુશનમાં એક અનન્ય સૂત્ર છે, જે લાંબા સમય સુધી (3 મહિના) ઓરડાના તાપમાને સંગ્રહિત હોય ત્યારે સક્રિય થાય છે;જ્યારે 4°C પર સંગ્રહિત કરવામાં આવે ત્યારે તેની પ્રવૃત્તિ અને સ્થિરતા વધુ સારી રહેશે, તેથી તેને 4°C પર સંગ્રહિત કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે, યાદ રાખો કે તેને -20°C પર ન રાખો.
શુદ્ધિકરણ સ્તંભ ભરાયેલું છે
આ કીટમાં, જીનોમિક DNA નિષ્કર્ષણ કામગીરીમાં, શુદ્ધિકરણ સ્તંભ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન સ્ટેપ વિના સેમ્પલ એન્ઝાઈમેટિક લિસિસ મિશ્રણ પર સીધું શોષાય છે, અને અપૂર્ણ એન્ઝાઈમાઈઝેશન અને નમૂનાની ઉચ્ચ સ્નિગ્ધતાને કારણે શુદ્ધિકરણ કોલમ અવરોધિત થઈ શકે છે.
નીચેના સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.
1. પેશીઓના નમૂનાઓની અપૂર્ણ એન્ઝાઇમેટિક પાચન.
ભલામણ: ફોરજીન પ્રોટીઝના નમૂનાની પ્રક્રિયાનો સમય યોગ્ય રીતે વધારી શકાય છે અથવા 5 મિનિટ માટે 12,000 rpm (~13,400 × g) પર સેન્ટ્રીફ્યુગેશન પછી સુપરનેટન્ટ લઈ શકાય છે.
2. પેશીના નમૂનાઓ અથવા મોટા પેશીઓનો વધુ પડતો ઉપયોગ.
ભલામણ: નમૂનામાં 1 બકલ સ્વેબથી વધુ ન હોવું શ્રેષ્ઠ છે;જો નમૂના ખૂબ મોટો હોય, તો તે મુજબ બફર ST1, ફોરજીન પ્રોટીઝ, બફર ST2 ની માત્રા વધારવી.
3. નમૂનાની સ્નિગ્ધતા ખૂબ ઊંચી છે.
ભલામણ: જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ પહેલાં નમૂનાઓને ટ્રિસ-એચસીએલના 10 એમએમ સાથે યોગ્ય રીતે પાતળું કરી શકાય છે.
4. બ્લડ કાર્ડના ટુકડા ચૂસવામાં આવ્યા છે.
ભલામણ: બ્લડ સ્પોટ (FTA કાર્ડ) જીનોમિક નિષ્કર્ષણના સ્ટેપ 6 નો ક્ષણિક સેન્ટ્રીફ્યુગેશન સમય યોગ્ય રીતે વધારી શકાય છે.
ઓછી ઉપજ અથવા ડીએનએ નથી
ઘણીવાર વિવિધ પરિબળો હોય છે જે જીનોમિક ડીએનએ ઉપજને અસર કરે છે, જેમાં નમૂનાની ઉત્પત્તિ, નમૂના સંગ્રહની સ્થિતિ, નમૂનાની તૈયારી, મેનીપ્યુલેશન વગેરેનો સમાવેશ થાય છે.
નિષ્કર્ષણ દરમિયાન જીનોમિક ડીએનએ મેળવી શકાતું નથી
સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.
1. નમૂનાઓની અયોગ્ય જાળવણી અથવા ખૂબ લાંબા સમય સુધી સંગ્રહ જીનોમિક DNA અધોગતિ તરફ દોરી જાય છે.
ભલામણ: ઓરલ સ્વેબ્સ પ્રાધાન્યમાં તાજા નમૂના લેવા જોઈએ, અને જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ કામગીરી માટે સાચવેલ સ્વેબનો ઉપયોગ કરવાની સલાહ આપવામાં આવતી નથી;બ્લડ સ્પોટ સેમ્પલ એ સુનિશ્ચિત કરવું જોઈએ કે ગુણવત્તા લાયક છે અને સંગ્રહ સમય ખૂબ લાંબો ન હોવો જોઈએ.
2. ટીશ્યુનો ખૂબ ઓછો ઉપયોગ અનુરૂપ જીનોમિક ડીએનએના નિષ્કર્ષણમાં પરિણમી શકે છે.
ભલામણ: ઓપરેશન માર્ગદર્શિકામાં બકલ સ્વેબ સેમ્પલિંગ સૂચનાઓને અનુસરો, અને બને તેટલી વાર સાફ કરો જેથી જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ માટે મૌખિક સ્વેબ સાથે પૂરતા કોષો જોડી શકાય;બ્લડ સ્પોટ સેમ્પલ નિષ્કર્ષણ માટે, બ્લડ સ્પોટ કટીંગ એરિયા યોગ્ય રીતે વધારી શકાય છે.
3. ફોરજીન પ્રોટીઝ અયોગ્ય રીતે સચવાય છે, પરિણામે તેની પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો અથવા નિષ્ક્રિયતા આવે છે.
ભલામણ: ફોરજીન પ્રોટીઝની સ્ટોરેજ શરતોની પુષ્ટિ કરો અથવા એન્ઝાઈમેટિક પ્રતિક્રિયા માટે તેને નવા ફોરજીન પ્રોટીઝ સાથે બદલો.
4. કીટની અયોગ્ય જાળવણી અથવા સ્ટોરેજનો સમય ઘણો લાંબો છે, જેના પરિણામે કીટમાંના કેટલાક ઘટકો નિષ્ફળ જાય છે.
ભલામણ: સંબંધિત પ્રક્રિયાઓ માટે નવી બકલ સ્વેબ ડીએનએ આઇસોલેશન કીટ ખરીદો.
5. બફર WB સંપૂર્ણ ઇથેનોલ ઉમેરતું નથી.
ભલામણ: પુષ્ટિ કરો કે બફર WB સંપૂર્ણ ઇથેનોલનું યોગ્ય વોલ્યુમ ઉમેરે છે.
6. સિલિકોન ફિલ્મમાં એલ્યુએન્ટ યોગ્ય રીતે ઉમેરવામાં આવતું નથી.
ભલામણ: સિલિકોન પટલની મધ્યમાં 65 °C પૂર્વ-ગરમ એલ્યુએન્ટ ટીપાં ઉમેરો અને ઇલ્યુશન કાર્યક્ષમતા વધારવા માટે ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દો.
ઓછી ઉપજ ધરાવતું જીનોમિક ડીએનએ અલગ
નીચેના સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.
1. નમૂનાઓની અયોગ્ય જાળવણી અથવા ખૂબ લાંબા સમય સુધી સંગ્રહ જીનોમિક DNA અધોગતિ તરફ દોરી જાય છે.
ભલામણ: ઓરલ સ્વેબ પ્રાધાન્યમાં તાજા નમૂના લેવામાં આવે છે, અને સાચવેલ સ્વેબનો ઉપયોગ જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ માટે થવો જોઈએ નહીં.
2. જો પેશીના નમૂનાની માત્રા ખૂબ ઓછી હોય, તો કાઢવામાં આવેલ જીનોમિક ડીએનએ સામગ્રી ઓછી હશે.
ભલામણ: ઓપરેટિંગ માર્ગદર્શિકામાં મૌખિક સ્વેબ સેમ્પલિંગ સૂચનાઓને અનુસરો, શક્ય તેટલી વાર સાફ કરો જેથી જીનોમિક ડીએનએ નિષ્કર્ષણ માટે ઓરલ સ્વેબ સાથે પૂરતા કોષો જોડી શકાય.
3. ફોરજીન પ્રોટીઝ અયોગ્ય રીતે સચવાય છે, પરિણામે તેની પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો અથવા નિષ્ક્રિયતા આવે છે.
ભલામણ: ફોરજીન પ્રોટીઝની સ્ટોરેજ શરતોની પુષ્ટિ કરો અથવા એન્ઝાઈમેટિક પ્રતિક્રિયા માટે તેને નવા ફોરજીન પ્રોટીઝ સાથે બદલો.
4. Eluent સમસ્યાઓ.
ભલામણ: ઇલ્યુશન માટે બફર ઇબીનો ઉપયોગ કરો;જો ddH નો ઉપયોગ કરી રહ્યા હોય2ઓ અથવા અન્ય એલ્યુએન્ટ્સ, પુષ્ટિ કરો કે એલ્યુએટનું pH 7.0-8.5 ની વચ્ચે છે.
5. એલ્યુએટ યોગ્ય રીતે ડ્રોપવાઇઝ ઉમેરવામાં આવ્યું નથી.
ભલામણ: સિલિકોન મેમ્બ્રેનની મધ્યમાં એલ્યુએન્ટ ટીપાં ઉમેરો અને ઇલ્યુશન કાર્યક્ષમતા વધારવા માટે ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી દો.
6. ઇલ્યુશન પ્રવાહી ખૂબ ઓછું એકઠું થાય છે.
ભલામણ: સૂચનોમાં આવશ્યકતા મુજબ જીનોમિક ડીએનએ ઇલ્યુશન માટે એલ્યુએન્ટનો ઉપયોગ કરો, ઓછામાં ઓછું 15 μl કરતાં ઓછું નહીં.
જીનોમિક ડીએનએની ઓછી શુદ્ધતા અલગ
ઓછી જીનોમિક ડીએનએ શુદ્ધતા ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોના નિષ્ફળતા અથવા અસંતોષકારક પરિણામો તરફ દોરી શકે છે, જેમ કે: ઉત્સેચકો ખુલ્લા કાપી શકાતા નથી, પીસીઆર રસના જનીન ટુકડાને મેળવી શકતા નથી, વગેરે.
સંભવિત કારણો નીચે મુજબ છે.
1. હેટેરોપ્રોટીન પ્રદૂષણ, આરએનએ પ્રદૂષણ.
વિશ્લેષણ: બફર પીડબ્લ્યુનો ઉપયોગ કરીને શુદ્ધિકરણ કૉલમ ધોવાઇ ન હતી;બફર PW વૉશ શુદ્ધિકરણ કૉલમ યોગ્ય કેન્દ્રત્યાગી ગતિનો ઉપયોગ કરીને ધોવાઇ ન હતી.
ભલામણ: ઇથેનોલ ઉમેરતા પહેલા ખાતરી કરો કે સુપરનેટન્ટમાં કોઈ વરસાદ નથી;સૂચનો અનુસાર શુદ્ધિકરણ કૉલમ ધોવાની ખાતરી કરો, અને આ પગલું અવગણી શકાય નહીં.
2. અશુદ્ધતા આયન પ્રદૂષણ.
વિશ્લેષણ: બફર WB વૉશ શુદ્ધિકરણ કૉલમ અવગણવામાં આવી હતી અથવા ફક્ત એક જ વાર ધોવાઇ હતી, પરિણામે શેષ આયનીય દૂષણ થયું હતું.
ભલામણ: શેષ આયનોને શક્ય તેટલું દૂર કરવા માટે બફર WB ને 2 વખત ધોવાનું સુનિશ્ચિત કરો.
3. આરએનએ એન્ઝાઇમ દૂષણ.
વિશ્લેષણ: વિદેશી RNases બફરમાં ઉમેરવામાં આવ્યા હતા;બફર PW વૉશ ઑપરેશન ખોટું હતું, પરિણામે RNase અવશેષો, ડાઉનસ્ટ્રીમ RNA પ્રાયોગિક કામગીરીને અસર કરે છે, જેમ કે ઇન વિટ્રો ટ્રાન્સક્રિપ્શન.
ભલામણ: ફોરજીન શ્રેણીની ન્યુક્લીક એસિડ આઇસોલેશન કીટ RNase ના વધારાના ઉમેરા વગર RNA ને દૂર કરી શકે છે, આમ buccal Swab/FTA કાર્ડ DNA આઇસોલેશન કીટમાં RNase ઉમેરવાની જરૂર નથી;બફર પીડબ્લ્યુ વૉશિંગ પ્યુરિફિકેશન કૉલમ માટેની સૂચનાઓનું પાલન કરવાની ખાતરી કરો, અને આ પગલું અવગણી શકાય નહીં.
4. ઇથેનોલ અવશેષ.
વિશ્લેષણ: બફર WB એ શુદ્ધિકરણ સ્તંભને ધોયા પછી ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કર્યું ન હતું.
ભલામણ: સૂચનાઓ અનુસાર યોગ્ય ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ઓપરેશન કરો.
5. અન્ય અશુદ્ધતા પ્રદૂષણ.
પૃથ્થકરણ: સાચવેલા નમૂનાઓ અથવા વિશિષ્ટ નમૂનાઓ પ્રીટ્રેટેડ નથી.
ભલામણ: સૂચના મુજબ નમૂનાને સારી રીતે પ્રીટ્રીટ કરો.
