અશુદ્ધ નમૂના રીઅલ-ટાઇમ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆર ડાયરેક્ટ મલ્ટિપ્લેક્સ પ્રોબ Qpcr મિક્સ પ્લસ યુ માટે 2× કેન્દ્રિત પ્રિમિક્સ માટે ચાઇના ઉત્પાદક
સંસ્થા પ્રક્રિયાના ખ્યાલને ચાલુ રાખે છે “વૈજ્ઞાનિક સંચાલન, ઉચ્ચ ગુણવત્તા અને કાર્યક્ષમતા પ્રાધાન્યતા, ચાઇના ઉત્પાદક માટે ખરીદનાર સર્વોચ્ચ 2× અશુદ્ધ નમૂના રિયલ-ટાઇમ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆર ડાયરેક્ટ મલ્ટિપ્લેક્સ પ્રોબ Qpcr મિક્સ પ્લસ યુ માટે 2× કેન્દ્રિત પ્રીમિક્સ માટે, અમારો વ્યવસાય ગ્રાહકોને દરેક નોંધપાત્ર અને સુરક્ષિત ઉચ્ચ ગુણવત્તાની સેવાઓ સાથે ગ્રાહકોને દરેક ગુણવત્તાયુક્ત અને સલામત ઉત્પાદનો બનાવવા માટે સમર્પિત છે.
સંસ્થા "વૈજ્ઞાનિક સંચાલન, ઉચ્ચ ગુણવત્તા અને કાર્યક્ષમતા પ્રાધાન્યતા, ખરીદનાર માટે સર્વોચ્ચ" પ્રક્રિયાના ખ્યાલને ચાલુ રાખે છેચાઇના Taq DNA પોલિમરેઝ અને Qpcr, અમારી કંપની વિપુલ પ્રમાણમાં શક્તિ ધરાવે છે અને એક સ્થિર અને સંપૂર્ણ વેચાણ નેટવર્ક સિસ્ટમ ધરાવે છે.અમે ઈચ્છીએ છીએ કે અમે પરસ્પર લાભોના આધારે દેશ-વિદેશના તમામ ગ્રાહકો સાથે સારા વ્યવસાયિક સંબંધો સ્થાપિત કરી શકીએ.
રીઅલ ટાઇમ પીસીઆર પ્રાઇમર ડિઝાઇન સિદ્ધાંતો
ફોરવર્ડ પ્રાઈમર અને રિવર્સ પ્રાઈમર
રીયલ ટાઈમ પીસીઆર માટે, પ્રાઈમર ડીઝાઈન ખૂબ જ મહત્વપૂર્ણ છે.પ્રાઇમર્સ પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશનની વિશિષ્ટતા અને કાર્યક્ષમતા સાથે સંબંધિત છે, અને નીચેના સિદ્ધાંતોના સંદર્ભમાં ડિઝાઇન કરી શકાય છે:
- પ્રાઈમર લંબાઈ: 18-30bp.
- GC સામગ્રી: 40-60%.
- Tm મૂલ્ય: પ્રાઈમર ડિઝાઇન સોફ્ટવેર, જેમ કે પ્રાઈમર 5, પ્રાઈમરનું Tm મૂલ્ય આપી શકે છે.અપસ્ટ્રીમ અને ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રાઈમર્સના Tm મૂલ્યો શક્ય તેટલા નજીક હોવા જોઈએ.Tm ગણતરી સૂત્રનો પણ ઉપયોગ કરી શકાય છે: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR કરતી વખતે, 5 °C ના પ્રાઈમર Tm મૂલ્યથી નીચેનું તાપમાન સામાન્ય રીતે એનેલિંગ તાપમાન તરીકે પસંદ કરવામાં આવે છે (એનીલિંગ તાપમાનમાં અનુરૂપ વધારો PCR પ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતામાં વધારો કરી શકે છે).
- પ્રાઇમર્સ અને પીસીઆર ઉત્પાદનો:
- ડિઝાઇન પ્રાઈમર પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન ઉત્પાદન લંબાઈ પ્રાધાન્ય 100-150bp છે.
- નમૂનાના ગૌણ માળખાકીય વિસ્તારમાં ડિઝાઇન પ્રાઇમર્સ શક્ય તેટલું ટાળવું જોઈએ.
- અપસ્ટ્રીમ અને ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રાઈમર્સના 3′ છેડા વચ્ચે 2 અથવા વધુ પૂરક પાયા બનાવવાનું ટાળો.
- પ્રાઈમર 3′ ટર્મિનલ બેઝ 3 વધારાના સળંગ G અથવા C સાથે હાજર હોઈ શકતું નથી.
- પ્રાઈમર્સમાં પૂરક રચનાઓ હોઈ શકતી નથી, અન્યથા હેરપિન સ્ટ્રક્ચર બનાવવામાં આવશે, જે પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશનને અસર કરશે.
- ATCG પ્રાઈમર ક્રમમાં શક્ય તેટલું સમાનરૂપે વિતરિત કરવું જોઈએ, અને 3′ ટર્મિનલ બેઝને T તરીકે ટાળવું જોઈએ.
પરિશિષ્ટ1: સીએલ ડાયરેક્ટRT-qPCR કીટ ઘટકોટી પૂરક પેક
1.સેલ લિસિસ સોલ્યુશન
સેલ લિસિસ સોલ્યુશન | |||
કીટ ઘટકો (24-વેલ લિસિસ સિસ્ટમ / કૂવો) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ટી | 500 ટી | ||
ભાગઆઈ | બફર CL | 20 મિલી | 100 મિલી |
ફોરજીન પ્રોટીઝ પ્લસ II | 400 μl | 1 મિલી × 2 | |
બફર એસ.ટી | 1 મિલી × 2 | 10 મિલી | |
ભાગII | ડીએનએ ઇરેઝર | 400 μl | 1 મિલી × 2 |
RT મિક્સ | |
કીટ ઘટકો (20 μl પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ) | DRT-01011-B1 |
200 ટી | |
5× ડાયરેક્ટ RT મિક્સ | 800 μl |
RNase-મુક્ત ddH2O | 1.7 મિલી × 2 |
qPCR મિક્સ | ||
કીટ ઘટકો (20 μl પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ટી | 1000 ટી | |
2× ડાયરેક્ટ qPCR મિક્સ-તકમાન | 1 મિલી × 2 | 1.7 મિલી × 6 |
20× ROX સંદર્ભ ડાય | 40 μl | 200 μl |
RNase-મુક્ત ddH2O | 1.7 મિલી | 10 મિલી |
સંસ્થા પ્રક્રિયાના ખ્યાલને ચાલુ રાખે છે “વૈજ્ઞાનિક સંચાલન, ઉચ્ચ ગુણવત્તા અને કાર્યક્ષમતા પ્રાધાન્યતા, ચાઇના ઉત્પાદક માટે ખરીદનાર સર્વોચ્ચ 2× અશુદ્ધ નમૂના રિયલ-ટાઇમ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆર ડાયરેક્ટ મલ્ટિપ્લેક્સ પ્રોબ Qpcr મિક્સ પ્લસ યુ માટે 2× કેન્દ્રિત પ્રીમિક્સ માટે, અમારો વ્યવસાય ગ્રાહકોને દરેક નોંધપાત્ર અને સુરક્ષિત ઉચ્ચ ગુણવત્તાની સેવાઓ સાથે ગ્રાહકોને દરેક ગુણવત્તાયુક્ત અને સલામત ઉત્પાદનો બનાવવા માટે સમર્પિત છે.
માટે ચાઇના ઉત્પાદકચાઇના Taq DNA પોલિમરેઝ અને Qpcr, અમારી કંપની વિપુલ પ્રમાણમાં શક્તિ ધરાવે છે અને એક સ્થિર અને સંપૂર્ણ વેચાણ નેટવર્ક સિસ્ટમ ધરાવે છે.અમે ઈચ્છીએ છીએ કે અમે પરસ્પર લાભોના આધારે દેશ-વિદેશના તમામ ગ્રાહકો સાથે સારા વ્યવસાયિક સંબંધો સ્થાપિત કરી શકીએ.
રીઅલ ટાઇમ પીસીઆર પ્રાઇમર ડિઝાઇન સિદ્ધાંતો
ફોરવર્ડ પ્રાઈમર અને રિવર્સ પ્રાઈમર
રીયલ ટાઈમ પીસીઆર માટે, પ્રાઈમર ડીઝાઈન ખૂબ જ મહત્વપૂર્ણ છે.પ્રાઇમર્સ પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશનની વિશિષ્ટતા અને કાર્યક્ષમતા સાથે સંબંધિત છે, અને નીચેના સિદ્ધાંતોના સંદર્ભમાં ડિઝાઇન કરી શકાય છે:
- પ્રાઈમર લંબાઈ: 18-30bp.
- GC સામગ્રી: 40-60%.
- Tm મૂલ્ય: પ્રાઈમર ડિઝાઇન સોફ્ટવેર, જેમ કે પ્રાઈમર 5, પ્રાઈમરનું Tm મૂલ્ય આપી શકે છે.અપસ્ટ્રીમ અને ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રાઈમર્સના Tm મૂલ્યો શક્ય તેટલા નજીક હોવા જોઈએ.Tm ગણતરી સૂત્રનો પણ ઉપયોગ કરી શકાય છે: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR કરતી વખતે, 5 °C ના પ્રાઈમર Tm મૂલ્યથી નીચેનું તાપમાન સામાન્ય રીતે એનેલિંગ તાપમાન તરીકે પસંદ કરવામાં આવે છે (એનીલિંગ તાપમાનમાં અનુરૂપ વધારો PCR પ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતામાં વધારો કરી શકે છે).
- પ્રાઇમર્સ અને પીસીઆર ઉત્પાદનો:
- ડિઝાઇન પ્રાઈમર પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન ઉત્પાદન લંબાઈ પ્રાધાન્ય 100-150bp છે.
- નમૂનાના ગૌણ માળખાકીય વિસ્તારમાં ડિઝાઇન પ્રાઇમર્સ શક્ય તેટલું ટાળવું જોઈએ.
- અપસ્ટ્રીમ અને ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રાઈમર્સના 3′ છેડા વચ્ચે 2 અથવા વધુ પૂરક પાયા બનાવવાનું ટાળો.
- પ્રાઈમર 3′ ટર્મિનલ બેઝ 3 વધારાના સળંગ G અથવા C સાથે હાજર હોઈ શકતું નથી.
- પ્રાઈમર્સમાં પૂરક રચનાઓ હોઈ શકતી નથી, અન્યથા હેરપિન સ્ટ્રક્ચર બનાવવામાં આવશે, જે પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશનને અસર કરશે.
- ATCG પ્રાઈમર ક્રમમાં શક્ય તેટલું સમાનરૂપે વિતરિત કરવું જોઈએ, અને 3′ ટર્મિનલ બેઝને T તરીકે ટાળવું જોઈએ.
પરિશિષ્ટ1: સીએલ ડાયરેક્ટRT-qPCR કીટ ઘટકોટી પૂરક પેક
1.સેલ લિસિસ સોલ્યુશન
સેલ લિસિસ સોલ્યુશન | |||
કીટ ઘટકો (24-વેલ લિસિસ સિસ્ટમ / કૂવો) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ટી | 500 ટી | ||
ભાગઆઈ | બફર CL | 20 મિલી | 100 મિલી |
ફોરજીન પ્રોટીઝ પ્લસ II | 400 μl | 1 મિલી × 2 | |
બફર એસ.ટી | 1 મિલી × 2 | 10 મિલી | |
ભાગII | ડીએનએ ઇરેઝર | 400 μl | 1 મિલી × 2 |
RT મિક્સ | |
કીટ ઘટકો (20 μl પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ) | DRT-01011-B1 |
200 ટી | |
5× ડાયરેક્ટ RT મિક્સ | 800 μl |
RNase-મુક્ત ddH2O | 1.7 મિલી × 2 |
qPCR મિક્સ | ||
કીટ ઘટકો (20 μl પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ટી | 1000 ટી | |
2× ડાયરેક્ટ qPCR મિક્સ-તકમાન | 1 મિલી × 2 | 1.7 મિલી × 6 |
20× ROX સંદર્ભ ડાય | 40 μl | 200 μl |
RNase-મુક્ત ddH2O | 1.7 મિલી | 10 મિલી |
સૂચના માર્ગદર્શિકા: