• ફેસબુક
  • લિંક્ડિન
  • યુટ્યુબ
પૃષ્ઠ_બેનર

Escherichia Coli O157: H7 ન્યુક્લિક એસિડ ડિટેક્શન કિટ (PCR ફ્લોરોસન્ટ પ્રોબ મેથડ/લ્યોફિલાઇઝેશન)

કિટ વર્ણન:

બિલાડી.નં.FP103

 

તેનો ઉપયોગ ખોરાક, ખોરાક, પાણીના નમૂનાઓ અને પર્યાવરણીય નમૂનાઓમાં E. coli O157:H7 ની ઝડપી તપાસ અને તપાસ માટે થાય છે.

પૂર્વજન્ય શક્તિ


ઉત્પાદન વિગતો

ઉત્પાદન ટૅગ્સ

FAQ

સ્ત્રોતો ડાઉનલોડ કરો

વર્ણનો

માટે વપરાય છેખોરાક, ખોરાક, પાણીના નમૂનાઓ અને પર્યાવરણીય નમૂનાઓમાં E. coli O157:H7 ની ઝડપી તપાસ અને તપાસ.

[પરીક્ષણ સિદ્ધાંત]

ફ્લોરોસન્ટ પીસીઆર ટેક્નોલૉજીના સિદ્ધાંત અનુસાર, વિશિષ્ટ પ્રાઇમર્સ અને ટાકમેન પ્રોબ્સ એસ્ચેરીચિયા કોલી O157: H7 ના ચોક્કસ જનીન માટે રચાયેલ છે, અને ફ્લોરોસન્ટ પીસીઆર સાધન દ્વારા શોધી કાઢવામાં આવે છે, જેથી એસ્ચેરીચિયા કોલી O157: H7 ની ડીએનએની ગુણાત્મક તપાસની અનુભૂતિ થાય.

 

કિટ સામગ્રી

નોંધ: ROX ચેનલ ચકાસણી શામેલ નથી.

Cઘટકો

સ્પષ્ટીકરણ

Qએકતા

બફર એ

ટ્યુબ

1

બફર બી

ટ્યુબ

1

હકારાત્મક નિયંત્રણ

ટ્યુબ

1

નકારાત્મક નિયંત્રણ

ટ્યુબ

1

અપેક્ષિત ઉપયોગ

માટે વપરાય છે ખોરાક, ખોરાક, પાણીના નમૂનાઓ અને પર્યાવરણીય નમૂનાઓમાં E. coli O157:H7 ની ઝડપી તપાસ અને તપાસ.

સ્ટોરેજ શરતો અને સમાપ્તિ તારીખ

અંધારામાં -20℃ પર સ્ટોર કરો અને વારંવાર થીજવું અને પીગળવાનું ટાળો.

માન્યતા અવધિ 12 છેમહિનાઓ, અને ઉત્પાદન તારીખ બાહ્ય પેકેજિંગ પર બતાવવામાં આવે છે.

સાધનો અને ઉપભોક્તા

ફ્લોરોસન્ટ ક્વોન્ટિટેટિવ ​​પીસીઆર ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ, પીપેટ ગન અને મેચિંગ ટીપ્સ, વોર્ટેક્સ શેકર, મીની સેન્ટ્રીફ્યુજ.

ઉપયોગ

1. નમૂના પ્રક્રિયા

1.1 નમૂનાનો પ્રકાર: આ કિટ ખોરાક, ખોરાક, પાણીના નમૂનાઓ અને એસ્ચેરીચિયા કોલી O157:H7 દ્વારા દૂષિત હોવાની શંકા ધરાવતા અન્ય નમૂનાઓ માટે યોગ્ય છે.ડીપ-પ્રોસેસ્ડ માંસ ઉત્પાદનો, પીણાં અને રંગદ્રવ્યો ધરાવતા અન્ય પદાર્થો માટે, ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલ સંગ્રહને અસર ન થાય તે માટે તેને ધોઈ નાખવાની જરૂર છે.

1.2 નમૂનાની પ્રક્રિયા: નમૂનાની તૈયારી, સંવર્ધન સંસ્કૃતિ અને Escherichia coli O157: H7 ના અલગીકરણ માટે "GB 4789.10-2016 ફૂડ સેફ્ટી નેશનલ સ્ટાન્ડર્ડ ફૂડ માઇક્રોબાયોલોજીકલ એક્ઝામિનેશન ઓફ એસ્ચેરીચિયા કોલી O157: H7 ટેસ્ટ" નો સંદર્ભ લો.

  1. Nયુક્લિક એસિડ નિષ્કર્ષણ

1.5 એમએલ સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાં 20 એમએલ સંવર્ધન સોલ્યુશન લો, તેમાં 200 μL માઇક્રોબાયલ લાયસેટ ઉમેરો (વધારાની કીટ જરૂરી છે), 30 સેકન્ડ માટે વમળ, સંક્ષિપ્તમાં સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો અને બાજુ પર રાખો.

ટિપ્પણીઓ: લિસેટમાંથી ન્યુક્લીક એસિડનું નિષ્કર્ષણ 10 મિનિટની અંદર પૂર્ણ થવું જોઈએ, અને તેને લાંબા સમય સુધી સંગ્રહિત કરી શકાતું નથી.

3. ન્યુક્લિક એસિડ એમ્પ્લીફિકેશન

3.1 ઉપયોગ માટે ફ્લોરોસન્ટ જથ્થાત્મક PCR સાધન ચાલુ કરો.

કીટમાંથી બફર A અને બફર B , તેમને સારી રીતે ઓગળે અને થોડા સમય માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.દરેક PCR પ્રતિક્રિયા ટ્યુબમાં 18 μL બફર A અને 2 μL બફર B ઉમેરો.પછી પીસીઆર પ્રતિક્રિયા ટ્યુબમાં 5 એમએલ દરેક નકારાત્મક નિયંત્રણ, એક્સટ્રેક્ટેડ ન્યુક્લીક એસિડ અને હકારાત્મક નિયંત્રણ ઉમેરો, ટ્યુબને કેપ કરો અને થોડા સમય માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.

3.3 PCR પ્રતિક્રિયા ટ્યુબને ફ્લોરોસન્ટ PCR મશીનમાં સ્થાનાંતરિત કરો, અને એમ્પ્લીફિકેશન પ્રયોગો કરવા માટે નીચેની પ્રક્રિયાઓનો ઉપયોગ કરો: પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ માટે 25 mL પસંદ કરો, દરેક ચક્ર માટે 60°C પર ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલ એકત્રિત કરો અને શોધ ચેનલ માટે FAM પસંદ કરો.

પગલું

કાર્યક્રમ

ચક્રની સંખ્યા

1

37℃ 5મિનિટ

1

2

9 5 ℃ 3 મિનિટ

1

3

95°C 15 સે

4 0

60℃ 30s (ફ્લોરોસેન્સ એકત્રિત કરો)

 


  • અગાઉના:
  • આગળ:

  • સમસ્યાઓના વિશ્લેષણ માટે માર્ગદર્શિકાઓ

    The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail:Tech@foregene.com。

     

    કોઈ આરએનએ કાઢી શકાતું નથી અથવા ન્યુક્લીક એસિડની ઉપજ ઓછી છે

    સામાન્ય રીતે પુનઃપ્રાપ્તિ કાર્યક્ષમતાને અસર કરતા ઘણા પરિબળો હોય છે, જેમ કે: સેમ્પલ આરએનએ સામગ્રી, કામગીરીની પદ્ધતિ, ઇલ્યુશન વોલ્યુમ વગેરે..

    સામાન્ય કારણોનું વિશ્લેષણ:

    1. ઓપરેશન દરમિયાન બરફ સ્નાન અથવા નીચા-તાપમાન (4 ° સે) સેન્ટ્રીફ્યુગેશન.

    સૂચન: ઓરડાના તાપમાને (15-25 ° સે) કામગીરી, ક્યારેય બરફ સ્નાન નહીં અને નીચા તાપમાન સેન્ટ્રીફ્યુજ.

    2. અયોગ્ય નમૂના સંગ્રહ અથવા નમૂના સંગ્રહ ખૂબ લાંબા સમય માટે.

    સૂચન: નમૂનાઓને -80 ° સે પર સ્ટોર કરો અથવા પ્રવાહી નાઇટ્રોજનમાં ફ્રીઝ કરો, અને ફ્રીઝ-થોનો વારંવાર ઉપયોગ ટાળો;RNA નિષ્કર્ષણ માટે તાજા એકત્રિત નમૂનાઓનો ઉપયોગ કરવાનો પ્રયાસ કરો.

    3.અપર્યાપ્ત નમૂના lysis

    ભલામણ: કૃપા કરીને ખાતરી કરો કે નમૂના અને કાર્યકારી સોલ્યુશન (લિનિયર એક્રેલામાઇડ) સારી રીતે મિશ્રિત કરવામાં આવ્યા છે અને ઓરડાના તાપમાને (15-25 ° સે) 10 મિનિટ માટે ઉકાળવામાં આવ્યા છે.

    4. eluent ખોટી રીતે ઉમેરવામાં આવ્યું હતું

    ભલામણ: ખાતરી કરો કે RNase-ફ્રી ddH2O શુદ્ધિકરણ કૉલમના પટલની મધ્યમાં ઉમેરવામાં આવે છે.

    5. બફર viRW2 માં નિર્જળ ઇથેનોલનું અયોગ્ય પ્રમાણ

    સૂચન: કૃપા કરીને સૂચનાઓનું પાલન કરો, બફર viRW2 માં નિર્જળ ઇથેનોલની સાચી માત્રા ઉમેરો અને કીટનો ઉપયોગ કરતા પહેલા તેને સારી રીતે ભળી દો.

    6.અયોગ્ય નમૂનાનો ઉપયોગ.

    સૂચન: બફર viRL ના 500μl દીઠ નમૂનાનું 200µl.વધુ પડતા નમૂનાના જથ્થાના પરિણામે RNA નિષ્કર્ષણ દરમાં ઘટાડો થશે.

    7. અયોગ્ય ઉત્સર્જન વોલ્યુમ અથવા અપૂર્ણ ઉત્સર્જન.

    સૂચન: શુદ્ધિકરણ સ્તંભનું એલ્યુએન્ટ વોલ્યુમ 30-50μl છે;જો ઉત્સર્જન અસર સંતોષકારક ન હોય, તો પ્રી-હીટેડ RNase-ફ્રી ddH ઉમેરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.2ઓ અને ઓરડાના તાપમાને મૂકવાનો સમય લંબાવો, જેમ કે 5-10 મિનિટ

    8. બફર viRW2 માં કોગળા કર્યા પછી શુદ્ધિકરણ સ્તંભમાં ઇથેનોલ અવશેષો હોય છે.

    સૂચન: જો બફર viRW2 માં કોગળા કર્યા પછી પણ ઇથેનોલ રહે છે અને 2 મિનિટ માટે ખાલી-ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન થાય છે, તો બાકીના ઇથેનોલને સંપૂર્ણપણે દૂર કરવા માટે ખાલી-ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન પછી શુદ્ધિકરણ કૉલમ ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી શકાય છે.

     

    શુદ્ધ RNA અણુઓનું અધોગતિ

    શુદ્ધ RNA ની ગુણવત્તા નમૂના સંગ્રહ, RNase દૂષણ અને કામગીરી જેવા પરિબળો સાથે સંબંધિત છે.

    સામાન્ય કારણોનું વિશ્લેષણ:

    1. એકત્ર કરાયેલા નમૂના સમયસર સાચવવામાં આવ્યા ન હતા.

    સૂચન: જો નમૂનાનો સંગ્રહ કર્યા પછી સમયસર ઉપયોગ ન થાય, તો કૃપા કરીને તેને -80 ℃ અથવા પ્રવાહી નાઈટ્રોજન પર તરત જ સંગ્રહિત કરો.RNA અણુઓના નિષ્કર્ષણ માટે, જ્યારે પણ શક્ય હોય ત્યારે તાજા એકત્રિત નમૂનાઓનો ઉપયોગ કરવાનો પ્રયાસ કરો.

    2. એકત્ર કરાયેલા નમૂનાઓ વારંવાર થીજી જતા અને પીગળતા હતા.

    સૂચન: નમૂનાના સંગ્રહ અને સંગ્રહ દરમિયાન વારંવાર ઠંડું અને પીગળવાનું ટાળો (એક કરતાં વધુ નહીં), અન્યથા ન્યુક્લિક એસિડની ઉપજ ઘટશે.

    3.RNase ઑપરેટિંગ રૂમમાં રજૂ કરવામાં આવ્યું હતું અથવા કોઈ નિકાલજોગ ગ્લોવ્સ, માસ્ક વગેરે પહેરવામાં આવ્યા ન હતા.

    સૂચન: આરએનએ પરમાણુઓનું નિષ્કર્ષણ એક અલગ આરએનએ ઓપરેશન રૂમમાં શ્રેષ્ઠ રીતે કરવામાં આવે છે, અને પ્રયોગ પહેલાં પ્રાયોગિક કોષ્ટક સાફ કરવામાં આવે છે.પ્રયોગ દરમિયાન નિકાલજોગ ગ્લોવ્ઝ અને માસ્ક પહેરો જેથી આરએનએઝના પરિચયને કારણે થતા આરએનએ ડિગ્રેડેશનને ટાળી શકાય.

    4. ઉપયોગ દરમિયાન રીએજન્ટ RNase દ્વારા દૂષિત થાય છે.

    સૂચન: સંબંધિત પ્રયોગો માટે નવી વાઈરલ આરએનએ આઈસોલેશન કિટથી બદલો.

    5. સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, પીપેટ ટીપ્સ, વગેરેનું RNase દૂષણ. સૂચન: ખાતરી કરો કે સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, પીપેટ ટીપ્સ અને પીપેટ બધા RNase-મુક્ત છે.

     

    શુદ્ધ RNA અણુઓએ ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોને અસર કરી

    શુદ્ધિકરણ સ્તંભ દ્વારા શુદ્ધ થયેલ આરએનએ અણુઓ ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગોને અસર કરશે જો ત્યાં વધુ પડતા મીઠાના આયનો અથવા પ્રોટીન હોય, જેમ કે: રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન, નોર્ધન બ્લોટ, વગેરે..

    1. એલ્યુટેડ આરએનએ પરમાણુઓમાં મીઠાના આયનો બાકી છે.

    ભલામણ: ખાતરી કરો કે બફર viRW2 માં નિર્જળ ઇથેનોલનું યોગ્ય પ્રમાણ ઉમેરવામાં આવ્યું છે, અને ઑપરેટિંગ સૂચનાઓ પર યોગ્ય સેન્ટ્રીફ્યુગેશન ગતિ અનુસાર શુદ્ધિકરણ કૉલમને બે વાર ધોઈ લો; જો હજી પણ મીઠું આયનો બાકી હોય, તો તમે શુદ્ધિકરણ કૉલમમાં બફર viRW2 ઉમેરી શકો છો, અને તેને ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ સુધી છોડી શકો છો.પછી મીઠું આયનોના દૂષણને સૌથી વધુ હદ સુધી દૂર કરવા માટે સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કરો

    2. એલ્યુટેડ આરએનએ અણુઓમાં ઇથેનોલ બાકી છે

    સૂચન: બફર viRW2 દ્વારા શુદ્ધિકરણ સ્તંભોને ધોઈ નાખવામાં આવ્યા છે તેની ખાતરી કર્યા પછી, ઑપરેટિંગ સૂચનાઓ પર કેન્દ્રત્યાગી ગતિ અનુસાર ખાલી-ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન કરો.જો હજુ પણ ઇથેનોલ બાકી હોય, તો તેને ખાલી ટ્યુબ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન પછી ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે છોડી શકાય છે જેથી બાકીના ઇથેનોલને મહત્તમ હદ સુધી દૂર કરી શકાય.

    સૂચના માર્ગદર્શિકા:

    વાયરલ આરએનએ આઇસોલેશન કીટ સૂચના માર્ગદર્શિકા

     

    તમારો સંદેશ અહીં લખો અને અમને મોકલો