ડાયરેક્ટ RT-qPCR કિટ III
કિટ વર્ણન:
◮ડાયરેક્ટ RT-qPCR કિટ, ફોરજીન દ્વારા વિકસિત ફોરેઝી રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ અને ફોરેઝી HS ટાક ડીએનએ પોલિમરેઝનો ઉપયોગ કરીને, અનન્ય પ્રતિક્રિયા બફર સાથે, આ કિટને મજબૂત પ્રતિકાર અને સુસંગતતા સાથે બનાવે છે, અને તે નમૂના તરીકે ફોરજીન લિસિસ સિસ્ટમના ઉપયોગની પ્રતિક્રિયાની સીધી ચકાસણી કરી શકે છે.આ કીટ COVID-19 ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શન કીટ અને અન્ય પેથોજેનિક બેક્ટેરિયા ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શન કીટ ડેવલપમેન્ટ માટે અરજી કરી શકે છે.
વર્ણન
ડાયરેક્ટ RT-qPCR કિટ અલગથી પેકેજ્ડ RT-qPCR બફર (ફોરીસી HS Taq DNA પોલિમરેઝ મિશ્રિત સાથે) અને ઉચ્ચ કાર્યક્ષમ પ્રદાન કરે છેફોરેસી રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ (MMLV),બેક-એન્ડ કિટ્સ બનાવવા અને સિસ્ટમ એડજસ્ટમેન્ટ માટે સરળ ચકાસણીની અંદર તેને અનુકૂળ બનાવે છે.
ડાયરેક્ટ RT-qPCR કિટ, ફોરજીન દ્વારા વિકસિત ફોરેઝી રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ અને ફોરેઝી HS ટાક ડીએનએ પોલિમરેઝનો ઉપયોગ કરીને, અનન્ય પ્રતિક્રિયા બફર સાથે, આ કિટને મજબૂત પ્રતિકાર અને સુસંગતતા સાથે બનાવે છે, અને તે નમૂના તરીકે ફોરજીન લિસિસ સિસ્ટમના ઉપયોગની પ્રતિક્રિયાની સીધી ચકાસણી કરી શકે છે.આ કીટ COVID-19 ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શન કીટ અને અન્ય પેથોજેનિક બેક્ટેરિયા ન્યુક્લીક એસિડ ડિટેક્શન કીટ ડેવલપમેન્ટ માટે અરજી કરી શકે છે.
આ કિટ સરળતાથી અને ઝડપી ઉપયોગ કરીને IVD ઉત્પાદનનો સીધો ભાગ બની શકે છે.તેને માત્ર સરળ ચકાસણીની જરૂર છે, ફરીથી વિકાસ કર્યા વિના.
વિશિષ્ટતાઓ
500T, 50,000T
કીટ ઘટકો
| કીટ સમાવિષ્ટો (20 μL પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 ટી | 50,000 ટી | |
| ફોરેસી આરવિપરીત ટ્રાન્સક્રિપ્ટેજ(200 યુ/μL) | 50 μL×1 | 1 એમએલ×5 |
| 2× ડાયરેક્ટ qPCRમિક્સ-તકમાન | 1 એમએલ × 5 | 500 એમએલ×1 |
| સૂચના | 1 | 1 |
ઓપરેટિંગ પગલાં
A: ટેમ્પલેટ અને રીએજન્ટ તૈયાર કરો
1. તૈયાર RNA ટેમ્પલેટ તૈયાર કરો (RNA ટેમ્પલેટ કાઢવા અને શુદ્ધ કરવા માટે ફોરજીન ટોટલ આરએનએ આઇસોલેશન કીટ સીરીઝ કીટનો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે) અથવા સેમ્પલ ક્રેકીંગ પ્રોડક્ટ (ફોરેજીન લિસિસ સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે), ચોક્કસ પ્રાઇમર્સ (10 μM) અને અન્ય સંબંધિત ઉપભોક્તા, સાધન.
2. 2× ડાયરેક્ટ RT-qPCR બફર, RNase-ફ્રી ddH2O અને 20× ROX રેફરન્સ ડાઈ (જો તે જરૂરી હોય તો) બરફ સાથેના બૉક્સમાં મૂકો, આને કુદરતી રીતે ઓગળે અને હળવા હાથે મિક્સ કરો.
B: RT-qPCR સિસ્ટમ તૈયાર કરો
પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમના પ્રતિક્રિયા બફરના અડધા વોલ્યુમ મેળવો (ઉદાહરણ તરીકે, જો સિસ્ટમનું વોલ્યુમ 20 μL છે, તો તેને 10 μL 2× ડાયરેક્ટ RT-qPCR બફર મેળવવાની જરૂર છે.). માટેએન્ઝાઇમની અનુરૂપ માત્રા, અમે તે સૂચવીએ છીએM-MLV: 10-30 U/20 μL પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ,તાકડીએનએ પોલિમરેઝ：1-2 U/20 μL પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમઆ અમારું સૂચન છે, તમારે તેનું પરીક્ષણ કરવું જોઈએ અને તેને સમાયોજિત કરવું જોઈએ), RNA ટેમ્પલેટ, ચોક્કસ પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ ઉમેરો અને RNase-ફ્રી ddH ઉમેરો2O થી 20 μL.RT-qPCR પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીની વિશિષ્ટ તૈયારી નીચેના કોષ્ટક 1 નો સંદર્ભ લઈ શકાય છે.
કોષ્ટક 1 : RT-qPCR સિસ્ટમ તૈયાર કરો
| ઘટક | વોલ્યુમ | અંતિમ એકાગ્રતા |
| 2× ડાયરેક્ટ RT-qPCR બફર | 10 μL | 1× |
| ફોરેસી રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ(MMLV) | 10-30 યુ | |
| ફોરેસી HS Taq DNA પોલિમરેઝ | 1-2 યુ | |
| ફોરવર્ડ પ્રાઈમર(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| રિવર્સ પ્રાઈમર(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ચકાસણી(4 μM) | 1 μL | 200nM |
| ઢાંચો(RNA અથવા Lysate) | X μL | |
| 20× ROX સંદર્ભ ડાય | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| કુલ વોલ્યુમ | 20 μL |
નોંધ: ફોરવર્ડ પ્રાઈમર અને રિવર્સ પ્રાઈમર એ લક્ષ્ય જનીનનાં ચોક્કસ પ્રાઈમર છે.qPCR ની સિસ્ટમ વ્યવહારિક પ્રાયોગિક અને PCR મોડેલો અનુસાર ગોઠવી શકાય છે.અમે મોટાભાગના પ્રાઇમરની અંતિમ સાંદ્રતા માટે 400nM ની ભલામણ કરીએ છીએ.કૃપા કરીને તૈયાર કરેલ સાંદ્રતા અને ભલામણ કરેલ અંતિમ સાંદ્રતા અનુસાર ચોક્કસ પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ્સના વોલ્યુમને સમાયોજિત કરો.
1*: વિવિધ જથ્થાત્મક PCR સાધનો અનુસાર ROX સંદર્ભ ડાયની યોગ્ય અંતિમ સાંદ્રતા પસંદ કરો.સામાન્ય જથ્થાત્મક પીસીઆર સાધનોની શ્રેષ્ઠ ROX સંદર્ભ ડાય સાંદ્રતા નીચેના કોષ્ટકમાં બતાવવામાં આવી છે:
| જથ્થાત્મક પીસીઆર સાધનો | ROX સંદર્ભ ડાયની અંતિમ સાંદ્રતા |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/સ્ટેપ વન,વગેરે | 1× (ઉદાહરણ તરીકે, 20 μL પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીમાં 1μl 20×ROX સંદર્ભ ડાય ઉમેરો) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P અને Mx4000, વગેરે. | 0.5× (ઉદાહરણ તરીકે, 20 μL પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીમાં 0.5μl 20×ROX સંદર્ભ ડાય ઉમેરો) |
| રોશે પીસીઆર ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ, બાયો-રેડ પીસીઆર ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ, એપેન્ડોર્ફ ક્વોન્ટિટેટિવ પીસીઆર ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ, વગેરે. | ROX સંદર્ભ ડાય વિના |
સંગ્રહ અને શેલ્ફ જીવન
કીટ -20 ± 5℃ પર સંગ્રહિત થવી જોઈએ.તેને તરત જ -20 ℃ થર્મોસ્ટેટિક રેફ્રિજરેટરમાં સંગ્રહિત કરવું જોઈએ.જો તેને યોગ્ય સ્થિતિમાં સંગ્રહિત કરવામાં આવે તો તેની માન્યતા અવધિ 2 વર્ષ છે.
