ફોર ડાયરેક્ટ RT-qPCR કિટ
કિટ વર્ણન:
◮આરએનએ શુદ્ધિકરણ પ્રક્રિયાઓ વિના સ્વેબ સંગ્રહમાંથી સીધા વાસ્તવિક સમયના એમ્પ્લીફિકેશન માટે.આ કિટ એક કલાકની અંદર qRT-PCR ચક્ર પૂર્ણ કરે છે.એન્ઝાઇમ મિશ્રણ એ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેઝ, હોટ-સ્ટાર્ટ ટાક ડીએનએ પોલિમરેઝ, આરનેઝ ઇન્હિબિટરનું ઑપ્ટિમાઇઝ મિશ્રણ છે.રિએક્શન બફર ઑપ્ટિમાઇઝ બફર ઘટકો, Mg સહિત તમામ જરૂરી ઘટકો ધરાવે છે.2+, dUTP અને dNTP.
વર્ણન
ForeDirect RT-qPCR કિટ આરએનએ શુદ્ધિકરણ પ્રક્રિયાઓ વિના સ્વેબ સંગ્રહમાંથી આરએનએ ડાયરેક્ટ રીઅલ-ટાઇમ એમ્પ્લીફિકેશન માટે ડિઝાઇન કરવામાં આવી છે.આ કિટ એક કલાકની અંદર qRT-PCR ચક્ર પૂર્ણ કરે છે.એન્ઝાઇમ મિશ્રણ એ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેઝ, હોટ-સ્ટાર્ટ ટાક ડીએનએ પોલિમરેઝ, આરનેઝ ઇન્હિબિટરનું ઑપ્ટિમાઇઝ મિશ્રણ છે.રિએક્શન બફર ઑપ્ટિમાઇઝ બફર ઘટકો, Mg સહિત તમામ જરૂરી ઘટકો ધરાવે છે.2+, dUTP અને dNTP.
વિશિષ્ટતાઓ
100T
કીટ ઘટકો
| ન્યુક્લિક એસિડ પ્રકાશન એજન્ટ |
| આરએનએ રક્ષક |
| 2× RT-qPCR બફર |
| એન્ઝાઇમ મિશ્રણ(Taq&M-MLV) |
| સૂચનાઓ |
પીસીઆર એપ્લિકેશન
1. એકવાર પીસીઆર પ્રતિક્રિયા ટ્યુબ થોડા સમય માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ થઈ જાય, તેને એમ્પ્લીફિકેશન ઈન્સ્ટ્રુમેન્ટના નમૂના ટાંકીમાં મૂકો.
2. થર્મલ પ્રોટોકોલ
| પગલું | તાપમાન | સમય | સાયકલ | |
| 1 | રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન | 50℃ | 15 મિનિટ | 1 |
| 2 | પ્રિ-ડિનેચરેશન | 95℃ | 1 મિનિટ | 1 |
| 3 | વિકૃતિકરણ | 95℃ | 10 સેકન્ડ | 42 |
| 4 | એનિલ/એક્સ્ટેંશન | 60℃ | 30 સેકન્ડ | |
નૉૅધ:દરેક ચક્રના એક્સ્ટેંશન સ્ટેપ પછી તરત જ ફ્લોરોસન્ટ સિગ્નલ મળી આવ્યું હતું.
3. સેટ કર્યા પછી, ફાઇલ સાચવો અને પ્રતિક્રિયા પ્રોગ્રામ ચલાવો.
ઓપરેટિંગ પગલાં
રીએજન્ટ તૈયાર કરતા પહેલા, કીટમાંના તમામ રીએજન્ટ્સને ઓરડાના તાપમાને પીગળીને હળવા હાથે મિશ્રિત કરવા જોઈએ.
રીએજન્ટ તૈયારી
1. ન્યુક્લીક એસિડ પ્રકાશન મિશ્રણ તૈયાર કરો
| ઘટક | નમૂના અથવા નિયંત્રણ દીઠ વોલ્યુમ |
| ન્યુક્લિક એસિડ પ્રકાશન એજન્ટ | 5μL |
| આરએનએ રક્ષક | 0.5 μL |
2. પ્રતિક્રિયા મિશ્રણ તૈયાર કરો
| ઘટક | નમૂના અથવા નિયંત્રણ દીઠ વોલ્યુમ |
| 2× RT-qPCR બફર | 15 μL |
| એન્ઝાઇમ મિશ્રણ(Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| પ્રાઇમર્સ અને પ્રોબ્સ | 1μL |
સંગ્રહ અને શેલ્ફ જીવન
-કીટ -20 પર સંગ્રહિત હોવી જોઈએ± 5℃.માન્યતા અવધિ 12 મહિના છે.
-પુનરાવર્તિત ફ્રીઝ-થો સાયકલ (<5 સાયકલ) ટાળો.
